大鼠灌胃 小蓟有用部位的提取及其大鼠灌胃液的制备
陈菲++++++盛柳青++++++王建美
[摘要] 意图 提取小蓟的有用部位并制备小蓟各提取物大鼠灌胃液。 办法 选用体系溶剂法提取小蓟的有用部位，并选用吐温-80增溶、羧甲基纤维素钠（CMC-Na）助悬和食用油溶解等不同的办法制备小蓟各提取物大鼠灌胃液并进行安稳性调查。 成果 小蓟乙醇提取物的得率最大，选用色拉油溶解能较好地制备小蓟乙醚和乙酸乙酯提取物灌胃液；选用较高温度下CMC-Na助悬能较好地制备小蓟乙醇提取物灌胃液。 定论 体系溶剂法能较好地提取小蓟各有用部位，小蓟各提取物大鼠灌胃液制备办法可行，安稳性好。
[关键词] 小蓟；体系溶剂法；制备；大鼠灌胃液
[中图分类号] R285.5 [文献标识码] A [文章编号] 1674-4721（2014）01（c）-0007-03
小蓟为菊科植物刺儿菜[Cirsium Setosum（Willd.）MB.]的全草或根，散布于我国大部分区域，在中欧、俄罗斯东部、日本、朝鲜等区域亦有散布。小蓟入药始见于《名医别录》，为传统的中药，小蓟性凉、味甘、苦，归心、肝经，具有凉血止血，祛瘀消肿之成效，用于鼻出血、吐血、尿血、便血、崩漏下血、外伤出血、痈肿疮毒等。现代研讨证明，小蓟全株含胆碱、儿茶酚胺类、皂苷、生物碱等成分，其提取物有显着的缩短血管、缩短凝血时刻的效果[1-4]。为了使用小蓟的药理活性树立试验大鼠缺血模型，本试验选用体系溶剂法提取了不同极性规模的小蓟有用部位，并把各提取物制备成利于大鼠服用的灌胃液，现报导如下。
1 资料与办法
1.1 仪器与试药
恒温水浴锅（杭州蓝天化验仪器厂），旋转蒸腾器（上海青浦沪西仪器厂）；小蓟由金华市药材供应站供给并经本院吴远文副教授判定；石油醚、乙醚、乙酸乙酯、乙醇均为剖析纯；尼泊金乙酯、羧甲基纤维素钠（CMC-Na）、吐温-80为药用；色拉油为食用。
1.2 办法
1.2.1 体系溶剂法提取小蓟药材
1.2.1.1 石油醚除杂 精确称取枯燥的小蓟药材400 g，切碎，装入5000 ml圆底烧瓶中，以1∶8的料液比参加石油醚，浸泡30 min后，置75℃恒温水浴锅中回流提取3次，第1次1 h，第2次45 min，第3次30 min，过滤，滤液收回石油醚后弃去。
1.2.1.2 提取乙醚部位 取蒸腾除掉石油醚的小蓟药材，装入5000 ml圆底烧瓶中，以1∶8的料液比参加乙醚，浸泡30 min后，置40℃恒温水浴锅中回流提取3次，第1次1 h，第2次45 min，第3次30 min，过滤，兼并3次提取液，滤液在旋转蒸腾仪上减压收回溶剂。浓缩液挥干溶剂后称重并计算得率[5]。
1.2.1.3 提取乙酸乙酯部位 取蒸腾除掉乙醚的小蓟药材，装入5000 ml圆底烧瓶中，以1∶8的料液比参加乙酸乙酯，浸泡30 min后，置85℃恒温水浴锅中按“1.2.1.2”所述办法提取并计算得率。
1.2.1.4 提取乙醇部位 取蒸腾除掉乙酸乙酯的小蓟药材，装入5000 ml圆底烧瓶中，以1∶8的料液比参加乙醇，浸泡30 min后，置90℃恒温水浴锅中按“1.2.1.2”所述办法提取并计算得率。
1.2.1.5 提取水溶性成分 取蒸腾除掉乙醇的小蓟药材，置于5000 ml陶瓷罐中，以1∶8的料液比参加蒸馏水，浸泡30 min后，煮沸提取3次，第1次1 h，第2次45 min，第3次30 min，过滤，兼并3次提取液，滤液浓缩至150～200 ml备用。
1.2.2 小蓟各提取物大鼠灌胃液的制备
1.2.2.1 小蓟乙醚提取物灌胃液制备 取工艺挑选用小蓟乙醚提取物（含药材400 g，同“1.2.1”制备），分红3份，别离按3种不同的办法进行灌胃液制造，第1种办法是选用2%吐温-80增溶，第2种办法是选用1%CMC-Na溶液助悬，第3种办法是用适量色拉油溶解乙醚提取物。3种办法制造完成后进行安稳性调查，挑选成果与安稳性最好的办法进行小蓟乙醚提取物灌胃液的制备。
1.2.2.2 小蓟乙酸乙酯提取物灌胃液的制备 因乙酸乙酯的极性与乙醚比较挨近，因而可参照乙醚提取物制造的办法。
1.2.2.3 小蓟乙醇提取物灌胃液的制备 取工艺挑选用小蓟乙醇提取物（含药材400 g，同“1.2.1”制备），分红5份，按5种不同的办法进行灌胃液制造，第1种办法是选用2%吐温-80增溶，第2种办法是直接用水溶解，第3种办法是用色拉油溶解，第4种办法是在常温下用1%CMC-Na溶液助悬，第5种办法是在较高温度下用1%CMC-Na溶液助悬。5种办法制造完成后进行安稳性调查，挑选成果与安稳性最好的办法进行小蓟乙醇提取物灌胃液的制备。
1.2.2.4 小蓟水提物灌胃液的制备 取“1.2.1.5”项下制备的小蓟水提液，在快速拌和下慢慢参加5%尼泊金乙酯乙醇溶液适量，用蒸馏水定容至200 ml，制成每毫升含生药量为2 g的灌胃液。
因水提物在水中溶解性好，因而水提物灌胃液的制备不进行制备办法挑选和安稳性调查。
2 成果
2.1 不同溶剂提取物的得率
各提取部位称重并计算得率（提取物相对于药材的百分比）（表1）。
由表1可知，不同溶剂的提取率存在较大的差异，其得率的巨细次序为：乙醇>乙酸乙酯>乙醚，能够看出，得率随溶剂极性的增大而增大。别的小蓟的水溶性部分因为含有较多的多糖等成分，使浓缩较为困难，因而直接浓缩到灌胃液所需体积，不计算得率。
2.2 小蓟各提取物大鼠灌胃液制备的挑选成果
2.2.1 小蓟乙醚提取物灌胃液制备的挑选成果
从调查成果来看，提取物加2%吐温-80制备的溶液初始呈溶解情况，24 h后溶液呈絮凝状，摇匀即散。用1%CMC-Na溶液制备的溶液在CMC-Na溶解中混悬不均匀，直接用色拉油溶解的溶液呈彻底溶解情况，安稳性好。故选取色拉油溶解的办法进行乙醚提取物灌胃液的制备：取小蓟乙醚提取物用少数色拉油溶解，加0.1%尼泊金乙酯，用色拉油定容至200 ml，制成每毫升含生药量为2 g的灌胃液。
2.2.2 小蓟乙酸乙酯提取物灌胃液制备的挑选成果
因乙酸乙酯的极性与乙醚比较挨近，所以也用色拉油作溶剂溶解提取物：取小蓟乙酸乙酯提取物用少数色拉油溶解，加0.1%尼泊金乙酯，用色拉油定容至200 ml，制成每毫升含生药量为2 g的灌胃液。从溶解情况来看，提取物根本溶解，有少数不溶物，在给大鼠灌胃前可先摇匀再灌服。
2.2.3 小蓟乙醇提取物灌胃液制备的挑选成果
从调查成果来看，乙醇提取物加2%吐温-80制备的溶液初始呈溶解情况，24 h后溶液呈沉积状，摇匀即散。选用水和色拉油都只能部分地溶解提取物。选用1%CMC-Na溶液制备的溶液颗粒呈安稳的悬浮情况，但在加热的条件下助悬构成的颗粒相对较细。因而试验选取在较高温度下1%CMC-Na溶液助悬的办法进行小蓟乙醇提取物灌胃液的制备：取小蓟乙醇提取物置80℃水浴中加热，将制造好的适量1% CMC-Na溶液也置80℃水浴中加热。把提取物在加热情况下参加到CMC-Na溶液中，边加边拌和，加完后持续拌和一段时刻，缓慢参加5%尼泊金乙酯乙醇溶液适量，加1% CMC-Na溶液定容至200 ml。制成每毫升含生药量为2 g的灌胃液。
3 评论
在体系溶剂法提取中，挑选乙醚、乙酸乙酯、乙醇、水作为提取溶剂，首要是考虑到这4个溶剂根本能提取出小蓟的不同极性的有用部位，为课题组下一步试验动物的建模打好根底[6]。别的石油醚作为非极性有机溶剂，只能提取一些非极性的无效成分，所以试验挑选石油醚作为除杂的溶剂。
大鼠作为常用的试验动物，在挑选灌胃液的溶剂时应考虑无毒和对大鼠的试验调查影响最小，乙醚、乙酸乙酯、乙醇作为常用的有机溶剂对试验动物有必定的毒性，所以其提取物有必要挑选其他溶剂作成灌胃液，色拉油和水无毒且对大鼠试验无影响，而试验又不触及高脂模型，所以挑选色拉油和水作为大鼠灌胃液的溶剂[7]。
在制造办法挑选中，试验挑选了用表面活性剂吐温-80增溶、高分子溶液如CMC-Na溶液助悬和食用油直接溶解的办法添加各提取物的溶解度，其间考虑到动物试验的安全性，吐温-80的浓度控制在2%[8]。在用CMC-Na溶液助悬时，CMC-Na浓度越高，对微粒的悬浮性越好[9]，但浓度升高，黏稠度增大，对灌胃带来的阻力会增大，因而在预试验时，挑选1%作为CMC-Na溶液的浓度。
[参考文献]
[1] 冯子明，杨桠楠，姜建双，等.小蓟的化学成分研讨[J].我国试验方剂学杂志，2012，18（6）：87-89.
[2] 祁爱蓉，徐彩，蔡芳香.小蓟、小蓟炭的首要成份及止血效果研讨总述[J].内蒙古中医药，2012，20（10）：104.
[3] 曹琴，陈建涛.小蓟的化学成分研讨[J].药学实践杂志，2010，28（4）：35-37.
[4] 李丹，吴莲波.中药小蓟的药理效果研讨进展[J].黑龙江中医药，2010，（3）：46-47.
[5] 戴冰，邹双华，刘磊，等.新疆软紫草体系溶剂法提取别离部位的抗生育效果研讨[J].中药材，2007，30（9）：1120-1122.
[6] 李端.中药化学技能[M].2版.北京：公民卫生出版社，2010：15-16.
[7] 马健康，姜艳霞，马洪波，等.体系溶剂法调查羊蹄根对小鼠血小板削减症的试验研讨[J].时珍国医国药，2009， 20（5）：1179-1180.
[8] 郭志鑫，孙会敏，杨锐，等.药用辅料聚山梨酯80（吐温-80）质量情况剖析[J].药学实践杂志，2012，30（6）：63-65.
[9] 杨桂明.中药药剂学[M].2版.北京：公民卫生出版社，2010：180-184.
（收稿日期：2013-10-11 本文修改：郭静娟）
2.2.2 小蓟乙酸乙酯提取物灌胃液制备的挑选成果
因乙酸乙酯的极性与乙醚比较挨近，所以也用色拉油作溶剂溶解提取物：取小蓟乙酸乙酯提取物用少数色拉油溶解，加0.1%尼泊金乙酯，用色拉油定容至200 ml，制成每毫升含生药量为2 g的灌胃液。从溶解情况来看，提取物根本溶解，有少数不溶物，在给大鼠灌胃前可先摇匀再灌服。
2.2.3 小蓟乙醇提取物灌胃液制备的挑选成果
从调查成果来看，乙醇提取物加2%吐温-80制备的溶液初始呈溶解情况，24 h后溶液呈沉积状，摇匀即散。选用水和色拉油都只能部分地溶解提取物。选用1%CMC-Na溶液制备的溶液颗粒呈安稳的悬浮情况，但在加热的条件下助悬构成的颗粒相对较细。因而试验选取在较高温度下1%CMC-Na溶液助悬的办法进行小蓟乙醇提取物灌胃液的制备：取小蓟乙醇提取物置80℃水浴中加热，将制造好的适量1% CMC-Na溶液也置80℃水浴中加热。把提取物在加热情况下参加到CMC-Na溶液中，边加边拌和，加完后持续拌和一段时刻，缓慢参加5%尼泊金乙酯乙醇溶液适量，加1% CMC-Na溶液定容至200 ml。制成每毫升含生药量为2 g的灌胃液。
3 评论
在体系溶剂法提取中，挑选乙醚、乙酸乙酯、乙醇、水作为提取溶剂，首要是考虑到这4个溶剂根本能提取出小蓟的不同极性的有用部位，为课题组下一步试验动物的建模打好根底[6]。别的石油醚作为非极性有机溶剂，只能提取一些非极性的无效成分，所以试验挑选石油醚作为除杂的溶剂。
大鼠作为常用的试验动物，在挑选灌胃液的溶剂时应考虑无毒和对大鼠的试验调查影响最小，乙醚、乙酸乙酯、乙醇作为常用的有机溶剂对试验动物有必定的毒性，所以其提取物有必要挑选其他溶剂作成灌胃液，色拉油和水无毒且对大鼠试验无影响，而试验又不触及高脂模型，所以挑选色拉油和水作为大鼠灌胃液的溶剂[7]。
在制造办法挑选中，试验挑选了用表面活性剂吐温-80增溶、高分子溶液如CMC-Na溶液助悬和食用油直接溶解的办法添加各提取物的溶解度，其间考虑到动物试验的安全性，吐温-80的浓度控制在2%[8]。在用CMC-Na溶液助悬时，CMC-Na浓度越高，对微粒的悬浮性越好[9]，但浓度升高，黏稠度增大，对灌胃带来的阻力会增大，因而在预试验时，挑选1%作为CMC-Na溶液的浓度。
[参考文献]
[1] 冯子明，杨桠楠，姜建双，等.小蓟的化学成分研讨[J].我国试验方剂学杂志，2012，18（6）：87-89.
[2] 祁爱蓉，徐彩，蔡芳香.小蓟、小蓟炭的首要成份及止血效果研讨总述[J].内蒙古中医药，2012，20（10）：104.
[3] 曹琴，陈建涛.小蓟的化学成分研讨[J].药学实践杂志，2010，28（4）：35-37.
[4] 李丹，吴莲波.中药小蓟的药理效果研讨进展[J].黑龙江中医药，2010，（3）：46-47.
[5] 戴冰，邹双华，刘磊，等.新疆软紫草体系溶剂法提取别离部位的抗生育效果研讨[J].中药材，2007，30（9）：1120-1122.
[6] 李端.中药化学技能[M].2版.北京：公民卫生出版社，2010：15-16.
[7] 马健康，姜艳霞，马洪波，等.体系溶剂法调查羊蹄根对小鼠血小板削减症的试验研讨[J].时珍国医国药，2009， 20（5）：1179-1180.
[8] 郭志鑫，孙会敏，杨锐，等.药用辅料聚山梨酯80（吐温-80）质量情况剖析[J].药学实践杂志，2012，30（6）：63-65.
[9] 杨桂明.中药药剂学[M].2版.北京：公民卫生出版社，2010：180-184.
（收稿日期：2013-10-11 本文修改：郭静娟）
2.2.2 小蓟乙酸乙酯提取物灌胃液制备的挑选成果
因乙酸乙酯的极性与乙醚比较挨近，所以也用色拉油作溶剂溶解提取物：取小蓟乙酸乙酯提取物用少数色拉油溶解，加0.1%尼泊金乙酯，用色拉油定容至200 ml，制成每毫升含生药量为2 g的灌胃液。从溶解情况来看，提取物根本溶解，有少数不溶物，在给大鼠灌胃前可先摇匀再灌服。
2.2.3 小蓟乙醇提取物灌胃液制备的挑选成果
从调查成果来看，乙醇提取物加2%吐温-80制备的溶液初始呈溶解情况，24 h后溶液呈沉积状，摇匀即散。选用水和色拉油都只能部分地溶解提取物。选用1%CMC-Na溶液制备的溶液颗粒呈安稳的悬浮情况，但在加热的条件下助悬构成的颗粒相对较细。因而试验选取在较高温度下1%CMC-Na溶液助悬的办法进行小蓟乙醇提取物灌胃液的制备：取小蓟乙醇提取物置80℃水浴中加热，将制造好的适量1% CMC-Na溶液也置80℃水浴中加热。把提取物在加热情况下参加到CMC-Na溶液中，边加边拌和，加完后持续拌和一段时刻，缓慢参加5%尼泊金乙酯乙醇溶液适量，加1% CMC-Na溶液定容至200 ml。制成每毫升含生药量为2 g的灌胃液。
3 评论
在体系溶剂法提取中，挑选乙醚、乙酸乙酯、乙醇、水作为提取溶剂，首要是考虑到这4个溶剂根本能提取出小蓟的不同极性的有用部位，为课题组下一步试验动物的建模打好根底[6]。别的石油醚作为非极性有机溶剂，只能提取一些非极性的无效成分，所以试验挑选石油醚作为除杂的溶剂。
大鼠作为常用的试验动物，在挑选灌胃液的溶剂时应考虑无毒和对大鼠的试验调查影响最小，乙醚、乙酸乙酯、乙醇作为常用的有机溶剂对试验动物有必定的毒性，所以其提取物有必要挑选其他溶剂作成灌胃液，色拉油和水无毒且对大鼠试验无影响，而试验又不触及高脂模型，所以挑选色拉油和水作为大鼠灌胃液的溶剂[7]。
在制造办法挑选中，试验挑选了用表面活性剂吐温-80增溶、高分子溶液如CMC-Na溶液助悬和食用油直接溶解的办法添加各提取物的溶解度，其间考虑到动物试验的安全性，吐温-80的浓度控制在2%[8]。在用CMC-Na溶液助悬时，CMC-Na浓度越高，对微粒的悬浮性越好[9]，但浓度升高，黏稠度增大，对灌胃带来的阻力会增大，因而在预试验时，挑选1%作为CMC-Na溶液的浓度。
[参考文献]
[1] 冯子明，杨桠楠，姜建双，等.小蓟的化学成分研讨[J].我国试验方剂学杂志，2012，18（6）：87-89.
[2] 祁爱蓉，徐彩，蔡芳香.小蓟、小蓟炭的首要成份及止血效果研讨总述[J].内蒙古中医药，2012，20（10）：104.
[3] 曹琴，陈建涛.小蓟的化学成分研讨[J].药学实践杂志，2010，28（4）：35-37.
[4] 李丹，吴莲波.中药小蓟的药理效果研讨进展[J].黑龙江中医药，2010，（3）：46-47.
[5] 戴冰，邹双华，刘磊，等.新疆软紫草体系溶剂法提取别离部位的抗生育效果研讨[J].中药材，2007，30（9）：1120-1122.
[6] 李端.中药化学技能[M].2版.北京：公民卫生出版社，2010：15-16.
[7] 马健康，姜艳霞，马洪波，等.体系溶剂法调查羊蹄根对小鼠血小板削减症的试验研讨[J].时珍国医国药，2009， 20（5）：1179-1180.
[8] 郭志鑫，孙会敏，杨锐，等.药用辅料聚山梨酯80（吐温-80）质量情况剖析[J].药学实践杂志，2012，30（6）：63-65.
[9] 杨桂明.中药药剂学[M].2版.北京：公民卫生出版社，2010：180-184.
（收稿日期：2013-10-11 本文修改：郭静娟）