基质金属蛋白酶抑制剂 基质金属蛋白酶及其抑制剂在非小细胞肺癌患者中的表达及临床意义
朱鹏飞+++++陈刚+++++钟方明
[摘要] 意图 探討基质金属蛋白酶（MMP-2、MMP-9）及其按捺剂（TIMP-1、TIMP-2）在非小细胞肺癌（NSCLC）患者中的表达及临床含义。 办法 选取2015年5月～2016年11月我院收治的非小细胞肺癌患者90例作为研讨组、良性肺病患者80例作为对照组，选用免疫组化法剖析两组患者肺病安排中的MMP-9、MMP-2、TIMP-1、TIMP-2的表达。 成果 检测成果显现，研讨组患者的MMP-9、MMP-2、TIMP-1、TIMP-2的表达显着高于对照组（P<0.05）；在研讨组患者中MMP-9以及TIMP-1在腺癌安排中的表达显着高于鳞癌（P<0.05），TIMP-2在鳞癌的表达显着高于腺癌（P<0.05），MMP-2在鳞癌安排的表达显着高于腺鳞癌以及腺癌（P<0.05）；呈现淋巴结搬运的MMP-9、MMP-2、TIMP-1、TIMP-2表达显着高于无淋巴结搬运患者（P<0.05），跟着患者临床分期的添加，MMP-9、MMP-2、TIMP-1、TIMP-2的表达也在升高（P<0.05），呈现低分解的患者MMP-9、MMP-2、TIMP-1、TIMP-2的表达显着高于高分解患者（P<0.05）。 定论 经过检测发现MMP-9、MMP-2以及TIMP-1、TIMP-2的表达跟非小细胞肺癌患者的临床病理特征联络亲近，能够作为其确诊以及医治的根据，值得进一步推行和运用。
[要害词] 基质金属蛋白酶；按捺剂；非小细胞肺癌；确诊作用；临床价值
[中图分类号] R734.2 [文献标识码] A [文章编号] 1673-9701（2017）32-0012-04
[Abstract] Objective To investigate the expression and clinical significance of matrix metalloproteinases（MMP-2， MMP-9） and its inhibitors （TIMP-1， TIMP-2） in the patients with non-small cell lung cancer （NSCLC）. Methods A total of 90 patients with non-small cell lung cancer（NSCLC） who were admitted to our hospital from May 2015 to November 2016 were selected as the study group and 80 patients with benign pulmonary disease were selected as the control group. The expressions of MMP-9， MMP-2， TIMP-1 and TIMP-2 in lung disease tissues were analyzed by immunohistochemistry in both groups. Results According to the test results， the expressions of MMP-9， MMP-2， TIMP-1 and TIMP-2 in the study group were significantly higher than those in the control group（P<0.05）； the expressions of MMP-9 and TIMP-1 in adenocarcinoma tissues in the study group were significantly higher than those in squamous cell carcinoma（P<0.05）. The expression of TIMP-2 in squamous cell carcinoma was significantly higher than that in adenocarcinoma（P<0.05）， and the expression of MMP-2 in squamous cell carcinoma was significantly higher than that in adenosquamous carcinoma and adenocarcinoma（P<0.05）； the expressions of MMP-9， MMP-2， TIMP-1 and TIMP-2 in lymph node metastasis were significantly higher than those in the patients without lymph node metastasis（P<0.05）. The expressions of MMP-9， MMP-2， TIMP-1 and TIMP-2 were also increased with the increase of clinical stage（P<0.05）. The expressions of MMP-9， MMP-2， TIMP-1 and TIMP-2 in the patients with poor differentiation were significantly higher than those in highly differentiated patients（P<0.05）. Conclusion According to the test results， the expressions of MMP-9， MMP-2 and TIMP-1 and TIMP-2 are closely related to the clinicopathological characteristics of non-small cell lung cancer（NSCLC）， which can be used as a basis for its diagnosis and treatment， and is worthy of further promotion and application.endprint
[Key words] Matrix metalloproteinases； Inhibitors； Non-small cell lung cancer； Diagnostic effect； Clinical value
非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer，NSCLC）是一种常见恶性肿瘤，包含腺癌、鳞癌和大细胞癌，简直占肺癌总量的80%，非小细胞肺癌跟小细胞肺癌比较，非小细胞肺癌细胞的成长速度比较慢，分散搬运比较晚，许多患者在确诊时现已是中晚期了[1]。非小细胞肺癌患者的生存率比较低，大多数都是由于肿瘤呈现了复发搬运而导致逝世的，因而肿瘤的搬运和成长是NSCLC确诊和医治的要害。相关研讨标明，非小细胞肺癌侵袭以及搬运的才能除跟诱导其发作基质金属蛋白酶降解酶以及降解细胞基底膜和细胞外基质有关以外，要害的是基质金属蛋白酶及其按捺剂与NSCLC患者的肿瘤有亲近联络[2]。本研讨选用免疫组化法检测MMP-9、MMP-2、TIMP-1、TIMP-2在NSCLC安排中的表达，现报导如下。
1 材料与办法
1.1一般材料
选取2015年5月～2016年11月我院收治的非小细胞肺癌患者90例作为研讨组，归入规范：经病理查看现已确诊为非小细胞肺癌患者；在手术前未选用抗肿瘤药物等医治；知情并赞同本研讨，经医院道德委员会同意。扫除规范：在手术前进行了抗肿瘤医治的患者；不赞同本研讨的患者。研讨组患者中男57例，女33例，年纪33～75岁，均匀（51.39±5.14）岁；其间腺癌32例，鳞癌39例，腺鳞癌19例；根据世界抗癌联盟的分期规范：Ⅰ期患者29例，Ⅱ期患者30例，Ⅲ期患者31例；低分解患者57例，高分解患者33例；未呈现淋巴搬运患者36例，淋巴搬运患者54例。选取80例良性肺病患者作为对照组，对照组中男48例，女32例，年纪34～74岁，均匀（50.40±5.23）岁。两组患者在一般材料方面比较，差异无统计学含义（P>0.05），具有可比性。
1.2办法
鼠抗人MMP-9、MMP-2、TIMP-1、TIMP-2单克隆的抗体以及S-P试剂盒由福建迈新生物有限公司出产，工作液的浓度一般选用1：50[3]。选用免疫组化法对S-P试剂进行染色，进程为：将白腊切片进行惯例脱蜡，3%的H2O2甲醇溶液在室温孵育，时刻为20 min，选用微波抗原进行修正，时刻为15 min。等候室温冷却今后，37°C下将10%的羊血清孵育20 min，此刻滴加一抗，分别为1：20的MMP-2抗体、1：15的MMP-9抗体以及1：20的TIMP-1抗体，TIMP-2是工作液，在4°C过夜[4]。然后将生物素符号羊抗鼠IgG进行孵育，时刻30 min，2～5 min DAB显色，苏木素完成复染今后，脱水并进行通明封片。阳性对照运用迈新公司供给的阳性乳腺癌安排，而阴性对照则运用PBS来替代一抗[5]。
1.3调查目标
1.3.1 检测MMP-9、MMP-2、TIMP-1、TIMP-2 经过对两组患者的MMP-9、MMP-2、TIMP-1、TIMP-2进行检测，比照调查两组患者的MMP-9、MMP-2、TIMP-1、TIMP-2在不同肺安排的表达状况以及在腺癌、鳞癌和腺鳞癌中的不同表达；MMP-9、MMP-2、TIMP-1、TIMP-2与临床分期、分解程度以及淋巴结搬运的联络。
1.3.2 剖析MMP-9、MMP-2、TIMP-1、TIMP-2的表达状况 选用半定量办法对MMP-9、MMP-2、TIMP-1、TIMP-2的表达状况进行剖析，经过核算染色强度以及阳性细胞百分比来断定。染色强度共分为4级，棕褐色为3分，棕黄色为2分，淡黄色为1分，未染色为0分[6]。阳性细胞百分比共分为5级，>75%为4分，50%～75%为3分，25%～50%为2分，5%～25%为1分，<5%为0分[7]。成果的断定以染色强度的总分与阳性细胞百分比的总分进行结合，6～7分为强阳性，4～5分为中度阳性，2～3分为弱阳性，0～1分为阴性[8]。
1.4统计学办法
选用SPSS18.0统计学软件对数据进行统计剖析，计数材料用[n（%）]表明，比较选用χ2查验，P<0.05为差异有统计学含义。
2 成果
2.1两组患者MMP-9、MMP-2、TIMP-1、TIMP-2的阳性表达状况比较
经过对两组患者的MMP-9、MMP-2、TIMP-1、TIMP-2进行检测，研讨组患者的MMP-9、MMP-2、TIMP-1、TIMP-2的表达显着高于对照组（P<0.05），见表1。
2.2 研讨组患者MMP-9、MMP-2、TIMP-1、TIMP-2的表达与临床病理特征的联络
在研讨组患者中，MMP-9以及TIMP-1在腺癌安排中的表达显着高于鳞癌（P<0.05），TIMP-2在鳞癌的表达显着高于腺癌（P<0.05），MMP-2在鳞癌安排的表达显着高于腺鳞癌以及腺癌（P<0.05）；呈现淋巴结搬运患者的MMP-9、MMP-2、TIMP-1、TIMP-2的表达水平显着高于无淋巴结搬运患者（P<0.05），跟着患者临床分期的添加，MMP-9、MMP-2、TIMP-1、TIMP-2的表达水平也在升高（P<0.05），呈现低分解的患者MMP-9、MMP-2、TIMP-1、TIMP-2的表达水平显着高于高分解患者（P<0.05）。见表2。
3 评论
非小细胞肺癌的致癌要素有许多，例如肺部的慢性感染、电离辐射、工作环境、吸煙以及遗传等，临床首要体现为咳嗽、胸部肿痛、低热和痰血等[9]。非小细胞肺癌患者的生存率比较低，一般在5年左右，大多数都是由于肿瘤呈现了复发搬运而导致逝世的，所以确诊和医治的要害是发现肿瘤的搬运及侵袭[10]。肿瘤发作搬运或侵袭的进程是一个多阶段、多进程的杂乱进程，首要有粘附、降解和搬迁[11]。基质金属蛋白酶是一种基底膜降解的蛋白水解酶，依靠锌离子内肽酶，能完成对细胞外基质一切成分进行降解，尤其是MMP-9以及MMP-2，是基质金属蛋白酶中十分要害的两种[12]。基质金属蛋白酶的降解作用对肿瘤的搬运和侵袭起到了要害的作用，而基质金属蛋白酶有其天然按捺剂，能够完成对基质金属蛋白酶活性的下调，然后按捺其对细胞外基质的降解，确保体内正常生理状态下细胞外基质的安稳和重建，假如调理进程中呈现失控，则可能会引发其他各种病理的进程[13]。其间TIMP-1、TIMP-2是特异性的按捺剂，能够经过对MMP-9和MMP-2的活性进行下调来完成对肿瘤细胞搬运和侵袭的按捺，然后保持细胞外基质[14]。本研讨经过免疫组化法对NSCLC患者以及良性肺病患者的肺安排中的MMP-9、MMP-2、TIMP-1、TIMP-2进行检测，成果显现，在研讨组患者中MMP-9、MMP-2、TIMP-1、TIMP-2的阳性表达显着高于对照组（P<0.05）。endprint
当癌变发作的时分，基质金属蛋白酶及其按捺剂的表达都会呈现显着的上调，可是按捺剂的增高程度不能够按捺基质金属蛋白酶的活性，二者间的平衡仍是会被打破[15]。经过对肺癌安排中的MMP-9、MMP-2、TIMP-1、TIMP-2进行检测，发现不同的安排类型中MMP-9、MMP-2、TIMP-1、TIMP-2的表达水平也是不一样的[16]。由于腺癌的搬运和侵袭发作比较早，MMP-9的高表达能够完成对肿瘤细胞的滋润，导致发作侵袭的时机比较高，研讨显现在研讨组患者中MMP-9以及TIMP-1在腺癌的安排中表达显着高于鳞癌（P<0.05），而TIMP-2在鳞癌的表达显着高于腺癌（P<0.05），MMP-2在鳞癌安排的表达水平显着高于腺鳞癌以及腺癌（P<0.05）。基质金属蛋白酶及其按捺剂的表达跟临床特征体现也存在很亲近的联络，而且这些目标也能够作为判别是否呈现肿瘤搬运或侵袭的根据[17]。在NSCLC患者中当呈现淋巴结搬运后，MMP-9、MMP-2、TIMP-1、TIMP-2的表达水平就会上升，与未发作搬运的患者有显着的差异；患者的临床分期与MMP-9、MMP-2、TIMP-1、TIMP-2的表达也存在着亲近的联络，当不断定临床分期的时分，经过基质金属蛋白酶及其按捺剂的表达就能够根本断定医治的计划[18]；基质金属蛋白酶及其按捺剂的检测在不同分解程度瘤细胞之间的表达也存在着差异，表达水平的增高跟瘤安排分解程度的下降以及肿瘤的开展有很大的联络[19]。研讨显现，呈现淋巴结搬运患者的MMP-9、MMP-2、TIMP-1、TIMP-2的表达水平显着高于无淋巴结搬运患者（P<0.05），而跟着患者临床分期的添加，MMP-9、MMP-2、TIMP-1、TIMP-2的表达水平也在升高（P<0.05），低分解患者MMP-9、MMP-2、TIMP-1、TIMP-2的表达水平显着高于高分解患者（P<0.05）。由此可见，检测MMP-9、MMP-2、TIMP-1、TIMP-2的表达能够作为临床医治的根据，协助患者进步医治的作用[20]。
综上所述，基质金属蛋白酶及其按捺剂在非小细胞肺癌患者中的表达，能够作为确诊以及医治的根据，关于进步医治作用、改进预后都有活跃的含义，值得进一步推行和运用。
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（收稿日期：2017-08-17）endprint