山东省菏泽市牡丹区气候 菏泽市牡丹区238例手足口病病例核酸检测剖析

刘芳+卞学丽

[摘要] 意图 把握菏泽市牡丹区手足口病病原学盛行特征，为疫情研判和防控供给科学根据。 办法 使用实时荧光定量PCR对2013年1月～2016年12月搜集的238例手足口病标本进行检测，并对成果进行剖析。 成果 238例手足口病病例标本中，肠道病毒核酸阳性184例（77.31%）。其间EV71阳性95例，占阳性标本总数的51.63%（95/184）；CoxA16阳性32例，占17.39%（32/184）；其他肠道病毒57例，占30.98%（57/184）。EV71型病毒在2013年和2015年呈高发盛行，2014年和2016年呈低发盛行。CoxA16型病毒在2013年和2015年未检测到，2014年和2016年均有必定程度的盛行。184例试验室确诊病例中1～3岁年纪散居儿童占67.39%。男女性其他份额为2.02。 定论 EV71型病毒是牡丹区HFMD的首要病原体。

[关键词] 牡丹区；手足口病；实时荧光定量PCR；EV71

[中图分类号] R512.5 [文献标识码] B [文章编号] 1673-9701（2017）08-0143-03

[Abstract] Objective To understand the epidemiological characteristics of hand-foot-mouth disease in Mudan district of Heze city， and provide scientific evidence for evaluation and prevention of epidemic situation. Methods The samples of 238 hand-foot-mouth disease cases collected from January 2013 to December 2016 were analyzed by real-time fluorescence quantitative PCR， and the results were analyzed. Results Of the 238 cases of hand-foot-mouth disease， 184 cases（77.31%） were positive for nucleic acid of enteroviruses. Among them， EV71 was positive in 95 cases， accounting for 51.63%（95/184） of the total number of positive cases； CoxA16 was positive in 32 cases， accounting for 17.39%（32/184）； other enteroviruses were in 57 cases， accounting for 30.98%（57/184）. EV71 virus was highly prevalent in 2013 and 2015， and was lowly prevalent in 2014 and 2016. CoxA16 virus was not detected in 2013 and 2015， and was prevalent in 2014 and 2016 to a certain degree. Among 184 laboratory confirmed cases， scattered children with 1～3 years of age accounted for 67.39%. The sex ratio of male to female was 2.02. Conclusion EV71 virus is the main pathogen of HFMD in Mudan District.

[Key words] Mudan district； Hand-foot-mouth disease； Real-time fluorescence quantitative PCR； EV71

手足口病（hand-foot-mouth disease，HFMD）是全球范圍广泛撒播的一种盛行症，简单呈现必定程度的爆发，形成社会、医疗和家庭的严峻担负[1]。HFMD发病以5岁以下婴幼儿常见，是我国法定陈述办理丙类盛行症[2]。引起HFMD的病毒归于小RNA病毒科肠道病毒属，有二十多种，人肠道病毒71型（Human enterovirus 71，EV71）、柯萨奇病毒A组（CoxA）中的16型最为常见，其他CoxA4、5、9、10型及B组的2、5型也较常见[3]。CoxA16感染的症状较轻，EV71感染性最强，并且除引发手、足、口腔等部位的皮疹或疱疹症状外，还可引起脑膜炎、脑炎、缓和型瘫痪等严峻的神经系统并发症[4]。近年来，牡丹区手足口病持续高发，是当时严峻的公共卫生问题之一。本文对2013年1月～2016年12月间在牡丹区区域内搜集的238例HFMD病例标本的核酸检测成果进行剖析，评论其盛行规则，为往后更科学的防控HFMD供给根据。

1 材料与办法

1.1 一般材料

牡丹区疾病防备操控中心从定点医院菏泽市盛行症医院对HFMD临床确诊病例随机采样，2013年1月～2016年12月共搜集居住地为牡丹区的病例标本共238份。

1.2 办法

发病3 d内搜集患者的肛拭子标本，在低温条件下运送至菏泽市疾病防备操控中心手足口病检测试验室，-20℃保存，需长时刻保存的标本存于-70℃冰箱。肛拭子样本充沛震动，4℃下高速离心，吸出上清液提取核酸。选用瑞士 Roche公司Roche High Pure Viral RNA Kit试剂盒提取标本病毒核酸，达安生物科技有限公司肠道病毒通用（EV）型、肠道病毒71（EV71）型、柯萨奇病毒A16（CoxA16）型荧光测定试剂盒制造反响系统，实时荧光定量PCR仪（ABI，StepOnePlus）进行核酸扩增反响。反响如下：逆转录50℃ 15 min；预扩增95℃ 15 min；扩增94℃ 15s→55℃ 45 s（搜集荧光），40个循环。反响完毕后，待检样品FAM通道呈典型S型扩增曲线且Ct值≤38，则陈述为阳性；无典型S型扩增曲线或Ct值>38，则陈述为阴性。

1.3 统计学办法

使用Microsoft Excel软件树立数据库，对标本材料和成果进行录入及剖析处理。

2 成果

2.1 检测成果

2013年1月～2016年12月牡丹区共搜集238份HFMD临床确诊病例标本，EV核酸检测阳性184例，检出率77.31%（184/238）。其间EV71阳性95例，占阳性标本总数的51.63%（95/184）；CoxA16阳性32例，占17.39%（32/184）；其他肠道病毒57例，占30.98%（57/184）。

2.2 年度散布

2013年1月～2016年12月搜集样品的阳性率各年分别为90.32%（56/62），64.41%（38/59），71.43%（35/49）和80.88%（55/68）。2013年85.71%（48/56）的阳性病例是EV71型病毒感染，占绝对优势；其他肠道病毒阳性占14.29%（8/56）；未检测到CoxA16型病毒阳性。2014年EV71型和CoxA16型均有阳性感染，份额分别为28.95%（11/38）和26.32%（10/38），还有44.74%（17/38）的阳性病例是其他肠道病毒感染。2015年EV71型再次成为优势病毒株，占77.14%（27/35）；其他肠道病毒占22.86%（8/35）；无CoxA16型阳性病例。2016年EV71型阳性占16.36%（9/55）；CoxA16型阳性占40.00%（22/55）；其他肠道病毒阳性占43.64%（24/55）。见表1。

2.3 人群散布

184例肠道病毒阳性病例中，男123例，占66.85%；女61例，男占33.15%。男女性其他份额为2.02。年纪最大9岁，最小3个月。以1～组和2～组病例最多，1～3岁幼童占67.39%（124/184），5岁以下儿童共占97.28%（179/184）。见表2。

3评论

1957年新西兰初次报导HFMD，1958年别离出CoxA16型肠道病毒，1959年提出HFMD命名，1972年美国初次承认EV71型病毒，尔后这两种病毒型别替换呈现成为HFMD的首要病原体[5]。

对HFMD病病原体各型其他感染状况进行监测与剖析，以把握当地HFMD病原体的盛行趋势，可对该病的医治和防控供给精确牢靠的试验室根据[6]。经过临床症状和体征难以确定病原体类型，现在，HFMD的病原学检测技能首要包含病毒别离、血清学检测、RT-PCR和实时荧光定量PCR等办法。实时荧光定量PCR办法避免了前两種办法不能满意标本量大、时刻急迫的问题，又因省去了惯例RT-PCR扩增后产品要进行电泳剖析的过程，所以不管从敏感性、特异性与速度上都是最具有优势的HFMD的病原学检测技能[7，8]。

使用实时荧光定量PCR办法检测搜集的238例HFMD临床确诊病例样本，EV核酸检测阳性184例，检出率77.31%。其间EV71占阳性标本总数的51.63%，CoxA16占17.39%，其他肠道病毒占30.98%。EV71型病毒在2013年和2015年呈高发盛行，2014年和2016年呈低发盛行。CoxA16型病毒在2013和2015年未检测到，2014年和2016年均有必定程度的盛行。这标明EV71型病毒是牡丹区HFMD的首要病原体，并且EV71型和CoxA16型病毒的盛行程度均具有隔一年一改变的特征。这与周边相邻区域的盛行特征类似[9，10]。这一距离式盛行特征对本区HFMD的盛行趋势判别具有重要意义。

对健康人群的研讨标明[11，12]，约44%新生儿体内具有从母体取得的EV71抗体，1个月后抗体水平敏捷下降，1～23月龄的婴幼儿抗体阳性率仅为0.8%，2～5岁儿童抗体阳性率每年进步约12%，15岁以上人群血清抗体阳性率超越50%，因而5岁以下（尤其是3岁以下）儿童是HFMD的高发人群。牡丹区的184例试验室确诊病例中，1～3岁幼童占67.39%，5岁以下共占97.28%。男女性其他份额为2.02，标明男童比女童更易感染HFMD，这可能是和男童活动量大且卫生习惯较差有关。这些人群散布的特征与其他区域的研讨成果共同[13，14]。对菏泽市HFMD儿童病例EV71型抗体水平的检测剖析标明[15]，男童EV71 IgM抗体阳性率明显高于女童，男童的EV71急性感染发病率明显高于女童。

现在手足口病疫苗虽已上市，但因属二类疫苗且价格较高，接种率有限，并且此疫苗仅用于防备EV71型病毒感染的HFMD，所以手足口病的防备和操控作业需持续坚持警惕性，在传染源、传达途径和易感人群等各个环节采纳活跃有用的防控办法，不能漫不经心。

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