幽门螺旋杆菌阳性 湖州区域651例糖尿病患者幽门螺杆菌耐药状况查询剖析
李叶芳+张军++姚林华++张玲
[摘要] 意图 剖析浙江省湖州区域糖尿病患者幽门螺杆菌感染及抗生素的耐药状况，为糖尿病幽门螺杆菌的铲除供给理论依据。 办法 挑选2014年1月～2015年12月浙江省湖州市中心医院及湖州市第一人民医院就医的行胃镜查看的糖尿病患者，搜集1211例胃镜下胃黏膜标本进行幽门螺杆菌别离培育，并用平板掺入法对幽门螺杆菌进行药敏实验。 成果 1211例胃黏膜标本中幽门螺杆菌别离培育阳性菌株651株，阳性率为53.76%。651株幽门螺杆菌对克拉霉素、左氧氟沙星、甲硝唑的耐药率分别为25.35%、35.33%和95.70%，其他抗生素未呈现耐药，其间对克拉霉素和左氧氟沙星的两层耐药率为13.21%，对克拉霉素、左氧氟沙星和甲硝唑的三重耐药率为11.37%。定论 湖州区域糖尿病患者幽门螺杆菌对克拉霉素、左氧氟沙星和甲硝唑独自抗生素均有十分高的耐药率，鉴于此状况，在铲除幽门螺杆菌之前假如能够行内镜下培育将有利于幽门螺杆菌的铲除。
[关键词] 幽门螺杆菌；培育；耐药；糖尿病
[中图分类号] R587.1 [文献标识码] B [文章编号] 1673-9701（2016）27-0128-03
幽门螺杆菌是于1983年被Marshall与Warre发现，并与消化性溃疡、前期胃癌、MALT淋巴瘤等密切相关，并且相关攻略及研讨主张在胃癌高发区、功能性消化不良等患者也需求铲除幽门螺杆菌[1]。从流行病学剖析幽门螺杆菌在全球感染率约28%～84%，相对来讲西方发达国家的感染率较低[2，3]。因为在一些区域幽门螺杆菌的感染率较高，假如铲除幽门螺杆菌费用较大，可是有研讨标明在健康无症状的幽门螺杆菌感染者中，经过铲除幽门螺杆菌能够下降胃癌的发生率[4]，所以现在国际上相继有攻略指出幽门螺杆菌感染者需求铲除细菌[5，6]。糖尿病患者作为特殊人群比正常人群更易感染幽门螺杆菌，并且铲除率相对较低，糖尿病人群感染幽门螺杆菌后简单呈现消化道症状[7]，所以挑选一种适宜的彻底治愈计划十分必要。
1 资料与办法
1.1一般资料
挑选2014年1月～2015年12月湖州市中心医院及湖州市第一人民医院就诊的糖尿病患者共1121例，签定胃镜查看同意书及幽门螺杆菌培育同意书，进行胃镜查看及幽门螺杆菌培育、药敏。依照杭州致远医学检验所关于幽门螺杆菌培育及药敏要求，标本需求置于含5%甘油的牛脑心浸液中，并运用冰袋冷藏或干冰运送至该所进行别离培育、断定及抗生素敏感性测验。糖尿病患者男601例，女520例，均匀年纪（51.2±3.5）岁，均匀病程（5.1±1.3）年。
1.2资料
牛脑心浸液（Oxoid，英国）；哥伦比亚琼脂平板（Oxoid，英国）；去纤维蛋白绵羊血（杭州致远医学检验所克己）
1.3 幽门螺杆菌培育
幽门螺杆菌别离培育和断定由杭州致远进行[8]，将两家医院供给的胃黏膜样本研磨成混匀液接种于含5%去纤维蛋白绵羊血的琼脂平板上，放置在37℃微需氧环境（5%O2，10%CO2，85%N2）中培育，在培育后96 h调查菌落的成长状况。经过涂片镜检菌体形状，并需求经过氧化酶、过氧化氢酶和尿素酶实验阳性的菌株方可断定为幽门螺杆菌阳性，假如未发现菌落，延伸培育时刻至第7天，如再无成长可断定为阴性。
1.4 幽门螺杆菌药敏测验
将6种含不同抗生素溶液调整成临界耐药浓度倾泻平板，加2 μL待测菌悬液于平板上，枯燥，并置于微需氧环境（5%O2，10%CO2，85%N2，湿度>80%）中培育，并于72 h后判读药敏成果，依据平板有无菌落形成断定有无耐药，有菌株则判读为耐药；每个样本药敏实验均重复2次，并以NCTC11637作为阳性质控菌株。临界点耐药值的设定规范：阿莫西林2 μg/mL，呋喃唑酮2 μg/mL，四环素2 μg/mL，克拉霉素2 μg/mL，左氧氟沙星2 μg/mL，甲硝唑8 μg/mL[8]。
2 成果
2.1 幽门螺杆菌的别离培育
于2014年1月～2015年12月在湖州市中心医院及湖州市第一人民医院共对1211份糖尿病胃黏膜标本进行了幽门螺杆菌的别离培育，一共取得幽门螺杆菌阳性菌株651株，培育阳性别离率为53.76%。男性标本共601份，别离取得阳性菌株351株，培育阳性别离率为58.40%；女人标本共520份，别离取得阳性菌株300株，培育阳性别离率为57.69%。
2.2幽门螺杆菌的耐药率
651株幽门螺杆菌菌株进行药敏实验，其间对克拉霉素、左氧氟沙星、甲硝唑的耐药率分别为25.35%（165/651）、35.33%（230/651）和95.70%（623/651），其他幽门螺杆菌菌株对阿莫西林、呋喃唑酮、四环素未呈现耐药，其间对克拉霉素和左氧氟沙星的两层耐药率为13.21%（86/651），对克拉霉素、左氧氟沙星和甲硝唑的三重耐药率为11.37%（74/651）。
3评论
幽门螺杆菌是一种单极、多鞭毛、螺形曲折的革兰阴性菌，首要散布在胃黏膜安排中，而67%～80%的胃溃疡和95%的十二指肠溃疡是由幽门螺杆菌引起。幽门螺杆菌在糖尿病患者中的感染率较一般人群高，能够引起如上腹部饱胀、不适或痛苦，常伴有其他不良症状，如嗳气、腹胀、反酸和胃口减退等，乃至可呈现重复发生性剧烈腹痛、上消化道少数出血等。而较大一部分糖尿病患者血糖长时刻操控不抱负，常并发较多并发症，易引发感染，服用抗菌药物的几率较一般人群高，形成幽门螺杆菌对立菌药物耐药性或许性增大，现在以为糖尿病患者长时刻血糖紊乱能够形成体内免疫系统应对的改动，关于外源性的病菌反抗才能下降，长时刻的间断性的服用相关抗生素后会使机体关于药物的代谢呈现削弱，进而使药物敏感性减低，这需求添加药物运用量等战胜耐药状况。
现在浙江省湖州区域一般人群2015年耐药状况克拉霉素、左氧氟沙星、甲硝唑的耐药率分别为21.80%、29.32%和94.76%，对阿莫西林、呋喃唑酮、四环素耐药的菌株未发现，可是呈现必定份额的多重耐药[9]。而本次研讨发现在糖尿病人群中幽门螺杆菌培育阳性率较一般人群高，可是耐药状况类似。浙江省其他区域如萧山区发现克拉霉素与左氧氟沙星的耐药率分别是13.65%和16.58%[10]，而在温州瑞安区域对克拉霉素和左氧氟沙星的耐药率保持在20%左右[11]。每个区域因为疾病谱、饮食习气及用药习气等不同，幽门螺杆菌的耐药必定呈现异常，剖析每一个区域的耐药特色能够更好地辅导用药。
从上世纪90年代开端研讨发现克拉霉素的耐药只要1%～8%，可是现在从全世界规模来讲克拉霉素的耐药现已上升到16%～24%。可是甲硝唑的耐药一向稳定在20%～40%。青霉素的耐药率整体在1%～3%之间[12，13]。现在以为克拉霉素的耐药能够导致幽门螺杆菌铲除率下降，特别是含有克拉霉素的三联疗法。一项荟萃剖析比较了2006～2011年与2000～2005年含铋剂的四联疗法发现，现在铲除率仍能稳定在80%[14]。而含克拉霉素的三联疗法从80%降到62%。含铋剂的四联医治往往不会遭到克拉霉素耐药的影响[15]。可是或许遭到甲硝唑耐药的影响，含甲硝唑的四联幽门螺杆菌的铲除作用与甲硝唑耐药成反比，甲硝唑耐药每升高1%，而铲除作用下降0.5%[16]。左氧氟沙星的耐药关于幽门螺杆菌铲除率影响更大，在左氧氟沙星不耐药的状况下，含左氧氟沙星的三联和含左氧氟沙星、铋剂的四联疗法铲除率均能到达97%，而存在左氧氟沙星耐药的条件下，四联的铲除率和三联的铲除率下降到71%和38%[17]。在耐药状况下经过添加用药时刻比较发现14 d的随同疗法较10 d的四联疗法有更高的铲除率[18]。假如一个区域有较大样本的幽门螺杆菌耐药状况，那么能够依据耐药状况调整医治计划，并得到抱负的医治作用，有研讨标明关于部分甲硝唑或许克拉霉素耐药的患者，经过添加运用抗生素的剂量能够战胜抗生素耐药状况，可是在糖尿病这一特定人群中相关研讨比较少[19，20]。
糖尿病患者相关于一般健康人群来讲更简单患有其他疾病，并且带来的并发症也较多，咱们之前的研讨发现铲除幽门螺杆菌能够改进胃轻瘫状况，可是总的铲除率较一般人群要低。经过对湖州市糖尿病幽门螺杆菌耐药状况发现，幽门螺杆菌的耐药较一般人群高[7]。幽门螺杆菌的耐药问题依据多项依据标明有逐步上升的趋势，并且在糖尿病患者中因为多种并发症与幽门螺杆菌感染有关，关于糖尿病患者耐药的详细机制研讨现在较少，论述的不是很清楚，未来咱们将依据临床成果深化发掘相关耐药机制，并结合糖尿病老鼠等动物模型研讨相关机制，寻觅战胜耐药的办法。药物糖尿病患者中迫切需求挑选适宜的医治计划，抱负状态下是得到患者幽门螺杆菌的耐药状况剖析及关于CYP2C19的代谢状况，然后依据耐药状况及代谢分型决议医治计划，往往这样能够得到很高的铲除率，可是在临床上也发现有少部分患者即便依据这两项成果也不能铲除幽门螺杆菌，估测与幽门螺杆菌患者比一般人群有更多的黏膜下感染有关，形成黏膜层的细菌即便铲除，可是不久会复发，有待更多的耐药患者黏膜检测来验证。
[参考文献]
[1] Sugano K，Tack J，Kuipers EJ，et al. Kyoto global consensus report on Helicobacter pylori gastritis[J]. Gut，2015，64（9）：1353-1367.
[2] Eusebi LH，Zagari RM，Bazzoli F.Epidemiology of Helicobacter pylori infection[J]. Helicobacter，2014，19（Suppl S1）：1-5.
[3] Megraud F，Coenen S，Versporten A，et al. Helicobacter pylori resistance to antibiotics in Europe and its relationship to antibiotic consumption[J]. Gut，2013，62（1）：34-42.
[4] Ford AC，Forman D，Hunt RH，et al. Helicobacter pylori eradication therapy to prevent gastric cancer in healthy asymptomatic infected individuals：Systematic review and meta analysis of randomised controlled trials[J]. BMJ，2014， 348：g3174.
[5] Fallone CA，Chiba N，van Zanten SV，et al. The Toronto consensus for the treatment of Helicobacter pylori infection in adults[J]. Gastroenterology，2016，151（1）：51-69.
[6] Sigal M，Rothenberg ME，Logan CY，et al. Helicobacter pylori activates and expands Lgr5（+）stem cells through direct colonization of the gastric glands[J]. Gastroenterology，2015，150（7）：1392-1404.
[7] 姚林华，胡奕，张玲，等. 铲除幽门螺杆菌对糖尿病胃轻瘫的影响[J]. 我国现代医师，2014，52（22）：151-153.
[8] Su P，Li Y，Li H，et al. Antibiotic resistance of Helicobacter pylori isolated in the southeast coastal region of China[J].Helicobacter，2013，18（4）：274-279.
[9] 钮萍萍，张军，戴利成，等. 2015年浙江省湖州区域幽门螺杆菌常用抗生素耐药监测剖析[J]. 生物技术通讯，2015， 279（3）： 441-443.
[10] 郭锋，张法红，毕青，等. 萧山区域不同年纪人群中幽门螺杆菌耐药性剖析[J]. 中华消化内镜杂志，2015，32（9）：631-632.
[11] 施正超，余铭，李克诚，等. 2009-2014年浙江省瑞安区域幽门螺杆菌常用抗生素耐药监测剖析[J]. 中华消化内镜杂志，2015，32（4）：257-259.
[12] Shiota S，Reddy R，Alsarraj A，et al. Antibiotic resistance of Helicobacter pylori among male United States veterans[J].Clin Gastroenterol Hepatol，2015，13（9）：1616-1624.
[13] Yang JC，Lin CJ，Wang HL，et al. High-dose dual therapy is superior to standard first line or rescue therapy for Helicobacter pylori infection[J]. Clin Gastroenterol Hepatol，2014，12（5）：895-905.
[14] Fischbach LA，Goodman KJ，Feldman M，et al. Sources of variation of Helicobacter pylori treatment success in adults worldwide：A meta-analysis[J]. Int J Epidemiol， 2002，31（1）：128-139.
[15] Shaikh T，Fallone CA. Effectiveness of second- through sixth-line salvage Helicobacter pylori treatment：Bismuth quadruple therapy is almost always a reasonable choice[J].Can J Gastroenterol Hepatol，2016.
[16] Venerito M，Krieger T，Ecker T，et al. Meta-analysis of bismuth quadruple therapy versus clarithromycin triple therapy for empiric primary treatment of Helicobacter pylori infection[J]. Digestion，2013，88（1）：33-45.
[17] Liao J，Zheng Q，Liang X，et al. Effect of fluoroquinolone resistance on 14-day levofloxacin triple and triple plus bismuth quadruple therapy[J]. Helicobacter，2013，18（5）：373-377.
[18] Gisbert JP，Molina-Infante J，Harb Y，et al. Nonbismuth quadruple（concomitant） therapy for eradication of H. pylori：Standard vs optimized（14-day， high-dose PPI） regimen[J]. Gastroenterology，2014，149（1）：S394-S395.
[19] Graham DY，Lee YC，Wu MS. Rational Helicobacter pylori therapy：Evidence-based medicine rather than medicine-based evidence[J]. Clin Gastroenterol Hepatol，2014，12（2）：177-186.
[20] Wenzhen Y，Yumin L，Quanlin G，et al. Is antimicrobial susceptibility testing necessary before first-line treatment for Helicobacter pylori infection？ Meta-analysis of randomized controlled trials[J]. Intern Med，2010，49（12）：1103-1109.
（收稿日期：2016-05-01）