同仁堂人参皂苷rh2价格 HPLC法测定补元合肾酒中人参皂苷Rg1、Re、Rb1的含量

卢瀚思　辜勇军　黄娟++龚琳慧++白俊毅

【摘 要】 意图：树立补元合肾酒中人参皂苷Rg1、Re、Rb1的含量测定办法。 办法：选用高效液相法对制剂中的人参皂苷Rg1、Re、Rb1进行含量测定。 成果：人参皂苷Rg1、Re、Rb1进样量别离在39.16～1174.8ng、18.774～563.22ng、36.768～1103.04ng范围内与峰面积出现杰出的线性关系（r>0.999）；均匀回收率别离为99.84%，99.31%，99.76%，RSD为1.08%，1.96%，1.37%。 定论：样品处理办法合理，办法学调查契合定量要求，成果精确，可用于补元合肾酒中人参皂苷Rg1、Re、Rb1的含量检测。

【关键词】 补元合肾酒 人参皂苷Rg1 人参皂苷Re 人参皂苷Rb1 HPLC

Study on Quality Standard of Buyuanheshen Vinum

ABSTRACT Objective： To establish a method for the determination of ginsenoside Rg

1，Re，Rb1 in Buyuanheshen Vinum. Methods： The contents of ginsenoside Rg1， Re Rb1 in Buyuanheshen Vinum were determined by HPLC. Results： The content of ginsenoside Rg1， Re， Rb1 showed good liner relationships with respective peak area within the range of 39.16～1174.8ng， 18.774～563.22ng and 36.768～1103.04ng （ r>0.999） ， respectively； and the average recovery were 99.84%， 99.31% and 99.76%， RSD were 1.08%， 1.96%， 1.37%. Conclusion The quantitative method was simple， specific， accurate and reliable， which has good reproducibility and the ability of effectively controling the quality of compound Buyuanheshen Vinum.

KEY WORDS Buyuanheshen Vinum； Ginsenoside Rg1； Ginsenoside Re； Ginsenoside Rb1； TLC； HPLC； Quality standard

補元合肾酒传承于成都肛肠专科医院“济川摄生驻颜不老方”，该方始于我国已逝闻名中医肛肠病学专家、成都肛肠专科医院创始人黄济川先生的摄生驻颜法，通过多年临床使用验证与研讨改善。该制剂处方由红参、巴戟天、肉苁蓉等8味中草药组成，具有填精补髓、益阴扶阳、强筋壮骨、除皱消斑、增强免疫、增强活力之成效，可用于肾虚导致的各类疾病的医治。

经处方进行剖析，红参为该方中君药，首要活性成分为人参皂苷Rg1、Re、Rb1。为了操控本制剂的质量，挑选人参皂苷Rg1、Re、Rb1作为含量测定的目标成分。本文在参阅了《我国药典》及有关文献[1，2]的基础上，树立了补元合肾酒中人参皂苷Rg1、Re、Rb1的含量测定

办法。

1 仪器与试药

补元合肾酒为克己（批号：151201、151202、151203）。人参皂苷Re对照品（批号：110754-201525，含量：92.3%），人参皂苷Rb1对照品（批号：110704-201424，含量：93.7%），人参皂苷Rg1对照品（批号：110703-201530，含量：91.7%），以上对照品均购自我国食物药品检定研讨院。Waters e2695 高效液相色谱仪；色谱柱InertSustain C18（25cm×4.6mm，5μm）；BT125D电子天平（赛多利斯科学仪器有限公司）；AUW120电子天平（日本岛津）；旋转蒸发器（上海申顺生物科技）；纯水机（密理博（上海）交易有限公司）。乙腈、甲醇为色谱纯；水为克己超纯水；其他试剂均为剖析纯。

2 办法与成果

2.1 色谱条件 色谱柱：InertSustain C18（25cm×4.6mm，5μm）；活动相A：水；活动相B：乙腈；检测波长203nm；流速1.0mL·min-1，进样量：20μL；柱温：30℃，按下表1进行梯度洗脱。在此条件下其他成分对人参皂苷Rg1、Re、Rb1的测定无搅扰，人参皂苷Rg1与人参皂苷Re别离度为2.35，满意色谱检测要求。对照品、供试品及阴性对照色谱图见图1。

2.2 对照品溶液制备 精细称取人参皂苷Rg1对照品置10mL量瓶中，加甲醇制成每毫升约含1.5mg人参皂苷Rg1的对照品储藏液；精细称取人参皂苷Re对照品置10mL量瓶中，加甲醇制成每毫升约含0.5mg人参皂苷Re的对照品储藏液；精细称取人参皂苷Rb1对照品置10mL量瓶中，加甲醇制成每毫升约含1.5mg人参皂苷Rb1的对照品储藏液；别离精细移取上述储藏液各1mL置同一10mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，得到每毫升约含0.15mg人参皂苷Rg1、0.05mg人参皂苷Re、0.15mg人参皂苷Rb1的混合对照品溶液。

2.3 供试品溶液的制备 精细汲取药酒25mL至圆底烧瓶中，45℃旋蒸至无醇味后转移至分液漏斗中，圆底烧瓶用5mL纯化水洗刷2次，洗刷液兼并至分液漏斗中。用乙醚萃取3次，每次10mL，弃去乙醚层；水层用水饱满的正丁醇萃取3次，每次10mL，兼并正丁醇层；用氨试液洗刷正丁醇层5次，每次5mL，弃去水层；取正丁醇层，60℃旋蒸至干，残渣用甲醇溶解于5mL量瓶中，定容，摇匀，经孔径0.45μm微孔滤膜滤过，取续滤液，即得。

2.4 规范曲线制作 别离精细汲取人参皂苷对照品Rg1、Re、Rb1储藏液各0.1mL，0.2mL，0.5mL，1mL，1.5mL，2.0mL，3.0mL，置10mL量瓶中，用甲醇稀释至刻度，汲取上述溶液及人参皂苷Rg1、Re、Rb1对照品储藏液，各进样20μL。以进样量为横坐标，峰面积积分值为纵坐标制作作业曲线，树立回归方程，见表2。

2.5 仪器精细度 汲取“2.3.2”项下中制造的混合对照品溶液20μL，以HPLC含量测定办法重复进样6次，测定峰面积，成果人参皂苷Rg1、Re、Rb1的峰面积RSD值别离为0.82%、1.58%、0.97%，标明仪器精细度杰出。

2.6 安稳性试验 取同一批次（批号：151201）样品6份，室温下放置，别离于0、2、4、8、12、24h按HPLC含量测定办法进行测定，成果人参皂苷Rg1、Re、Rb1峰面积的RSD别离为0.78%、1.63%、1.12%，标明供试品溶液各组分在24h内安稳。

2.7 重复性试验 取同一批药酒样品6份，别离按供试品溶液制备办法操作制备样品，以HPLC含量测定办法测定峰面积积分值，核算人参皂苷Rg1的RSD为1.52%；人参皂苷Re 的RSD为1.71%；人参皂苷Rb1的RSD为1.65%。

2.8 加样回收率试验 精细汲取已知含量的同一批样品9份，每份12.5mL，别离参加一定量的对照品，按供试品溶液制备项下操作，每一个浓度制备3份样品，按色谱条件测定各样品含量，核算回收率。人参皂苷Rg1、Re、Rb1均匀回收率别离为99.84%，99.31%，99.76%，RSD为1.08%，1.96%，1.37%。

2.9 样品含量测定 取3批样品（批号：151201、151202、151203），别离按含量测定办法进行测定，成果见表3。

3 评论

补元合肾酒为复方制剂，含有的成分杂乱，严峻搅扰供试品的含量检测。咱们对人参皂苷成分常用的萃取、大孔吸附树脂、C18小柱层析等提纯办法[3]进行了调查，其间以萃取处理办法提纯作用较好且操作简洁。咱们进一步对萃取溶剂量和萃取次数进行了挑选，优选出了最佳的样品处理办法。

在活动相梯度条件挑选过程中，别离尝试了多种液相色谱条件[4，5，6]，其间《中华人民共和国药典》2015年版一部红参含量检测色谱办法的主峰别离度与峰型最佳，契合要求，适用于一起测定补元合肾酒中人参皂苷Rg1、Re、Rb1的含量。

综上所述，本办法操作简略，测定成果精确，灵敏度高，重现性好，办法学研讨体系适应性试验契合规定，可用于补元合肾酒的定量剖析办法。

参阅文献

[1]高杨， 陈林伟， 陈丹妮，等. HPLC法测定气血双补酒中人参皂苷Rg_1、Re和Rb_1的含量[J]. 中华中医药学刊， 2015（09）：2095-2097.

[2] 侯桂兰， 林能明， 方罗，等. 红参组方的注射剂中人参皂甙Rg1、Re、Rb1的含量测定[J]. 我国中医药科技， 2007， 14（6）：433-434.

[3] 孙彩华， 付迎， 蒋毅超. 高效液相色谱法对生脉胶囊中人参皂苷Rg1和Re的含量测定[J]. 我国醫药导报， 2016， 13（01）：9-12.

[4]国家药典委员会. 中华人民共和国药典2015年版（一部）[M]. 我国医药科技出版社， 2015：153-154.

[5]苑雅萍， 李云涛， 郭佳超. HPLC测定参芪颗粒中人参皂苷Rg1，Re，Rb1的含量[J]. 我国试验方剂学杂志， 2010， 16（16）：74-75.

[6]任睿， 贾宜军， 金红宇. HPLC测定益气复脉口服液中红参的含量[J]. 现代食物与药品杂志， 2006， 16（4）：8-11.

榜首作者

卢瀚思（1988-），男，硕士在读，研讨方向：药剂学；

通讯作者

白俊毅（1984-），男，博士在读，中药师，研讨方向：中药新制剂开发与使用