桂枝茯苓胶囊 桂枝茯苓胶囊对乳腺增生大鼠性激素水平缓乳腺安排的影响
常秀娟+周军+张帅+陈健+陈春苗+王振中+萧伟
[摘要] 意图：研讨桂枝茯苓胶囊对乳腺增生大鼠的血清性激素水平及乳腺安排形状学的影响。办法：选用苯甲酸雌二醇打针液对SD雌性未孕大鼠按0.5 mg·kg-1肌肉打针制造乳腺增生模型，调查受试药桂枝茯苓胶囊2.0，1.0，0.5 g·kg-1和阳性对照药乳癖消0.5 g·kg-1灌胃给药5周后对乳腺增生模型大鼠乳头直径、高度，乳腺安排形状学的改变和性激素水平改变。成果：桂枝茯苓胶囊可改进大鼠乳头肿胀度，减轻乳腺安排的病变，下降血清雌二醇（E2）和升高孕酮（P）水平。定论：桂枝茯苓胶囊改进乳腺病理改变，调理大鼠性激素水平可能是医治乳腺增生疾病的重要机制。
[关键词] 桂枝茯苓胶囊；乳腺增生；性激素
乳腺增患病（cyclomastopathy）是乳腺主质和间质不同程度地增生与复古不全所形成的的乳腺结构在数量和形状上的反常，是乳腺外科临床最常见的乳房疾病，好发于25～45岁的中青年妇女。跟着生活环境改变、生活节奏加速、社会压力增大等要素，乳腺增生发病率逐年添加。研讨标明，性激素水平与乳腺增生有关[1]，笔者就桂枝茯苓胶囊对乳腺增生大鼠模型进行了研讨，成果标明，桂枝茯苓胶囊能调理血清雌二醇（E2）、孕酮（P）水平，按捺乳腺增生，为桂枝茯苓胶囊医治乳腺增生供给根底理论依据。
1 资料
桂枝茯苓胶囊规范0.31 g/粒，为江苏康缘药业股份有限公司出产，批号090912；乳癖消规范0.32 g/片，由辽宁好护理药业有限责任公司出产，批号091103；苯甲酸雌二醇打针液，规范2 g·L-1/支，上海通用药业股份有限公司，批号090501；雌二醇（E2），孕酮（P）试剂盒均为北京华英生物技术研讨所出产，批号091012。
游标卡尺（上海舒耀仪器设备有限公司）；Eppendorf5804R冷冻离心机；r-911全自动放免计数仪（我国科技大学实业总公司）。
SD雌性未孕大鼠，180～200 g，90只，由浙江省试验动物中心购入，合格证号SCXK（浙）2008-0033。养殖在温度（21±1）℃和湿度52%左右操控的规范动物房内。每天12 h的白天和黑夜循环（6：00熄），自在进食水和食物。动物试验进程的一切操作，均依照我国科技部2006年公布的《关于善待动物的指导性定见》进行。
2 办法
乳腺增生模型参照文献造模[2-4]，60只SD大鼠随机分为6组，别离为模型对照组（等量生理盐水10 mL·kg-1）、空白对照组（等量生理盐水10 mL·kg-1）、阳性对照组（乳癖消0.5 g·kg-1）、桂枝茯苓胶囊高、中、低剂量组（2.0，1.0，0.5g·kg-1）。正常组大鼠大腿外侧肌肉打针生理盐水（0.05 mL/只），每2日1次，模型大鼠肌肉打针苯甲酸雌二醇0.5 mg·kg-1，每2日1次至试验完毕。造模2周后开端灌胃给药，每日1次，给药5周，末次给药0.5 h后选材。
2.1 乳腺增生的测定 造模前、后用游标卡尺准确丈量大鼠第2对左右2个乳房直径及乳头高度，并调查其外观。
2.2 脏器系数和胸腺系数的测定 末次给药30 min后处死大鼠，别离测定体重、胸腺、脾脏和子宫卵巢质量，核算脏器系数。胸腺系数=胸腺质量（g）/体重（g）×100；子宫系数=子宫质量（g）/体重（g）×100。
2.3 激素的测定 试验前禁食12 h，末次给药后30 min，以10%水合氯醛按0.35 g·kg-1腹腔打针麻醉，腹主动脉取血5 mL，3 000 r·min-1高速冷冻离心15 min，取血清加4 mL冷石油醚，混匀后再次离心。吸弃上相，下相用氮气吹干后枯燥密封，待测。
运用r-911全自动放免计数仪以及放射免疫试剂盒，按产品阐明书，对血清进行雌二醇（E2）、孕酮（P）检测。
2.4 病理检测 取大鼠第2对乳房安排于10%甲醛溶液中固定，惯例HE染色，光镜下调查各组大鼠乳腺安排增生程度。
2.5 计算学办法 选用SPSS 18.0计算软件剖析，试验数据用±s标明，组间比较选用方差剖析，t查验进行显着性剖析。
3 成果
3.1 桂枝茯苓胶囊对乳头直径、乳头高度的影响 正常组大鼠隔毛看不见乳头方位，将毛分隔后，可见乳头呈小颗粒状，贴在皮肤上，柔软，单个稍拱起。与正常组比较，模型组大鼠乳头直径和高度显着增大（P<0.01，表1），乳头竖起充血。在打针雌二醇第3周达肿胀顶峰，第4周肿胀度相等，在第5周开端下降。桂枝茯苓胶囊高、中剂量组乳头直径、高度与模型组比较显着减小（P<0.01，P<0.05，表1）。成果标明，桂枝茯苓胶囊对雌二醇诱导的乳腺增生有显着的按捺造用。
3.2 桂枝茯苓胶囊对体重及脏器系数的影响 与正常对照组比，模型组胸腺系数显着下降（P<0.01）、子宫系数显着增大（P<0.01，），阐明大鼠在雌激素影响下免疫力下降，胸腺萎缩，子宫囊肿。与模型组比较，桂枝茯苓胶囊高中剂量组胸腺系数显着增大（P<0.05）、子宫系数显着下降（P<0.05），乳癖消组胸腺系数、子宫系数与模型组比较P<0.01（表2）。成果标明，桂枝茯苓胶囊有改进子宫囊肿，进步免疫力效果。
3.3 桂枝茯苓胶囊对血清雌二醇（E2）、孕酮（P）含量的影响 血清雌激素和孕激素检测的成果标明，乳腺增生大鼠模型组雌激素水平升高、孕激素水平下降，与正常组比较P<0.01；桂枝茯苓胶囊高剂量组E2，P水平与模型组比较P<0.01，P<0.05；乳癖消组E2，P水平与模型组比较P<0.01（表3）。endprint
成果标明，桂枝茯苓胶囊能调理雌激素和孕激素水平，可能是桂枝茯苓胶囊医治乳腺增生的重要分子机制。
3.4 桂枝茯苓胶囊对乳腺病理安排学的影响 病理成果显现正常组大鼠乳腺小叶腺泡数少，腺泡和导管内无分泌物；模型组乳腺小叶体积增大，小叶内腺泡数量增多，导管扩张，腔内有多量分泌物；乳癖消组乳腺小叶腺泡数和腺泡内分泌较模型组削减，扩张的导管数量和分泌物也削减，表现出乳腺增生的病理特征；桂枝茯苓高、中、低剂量组乳腺小叶腺泡数较模型组显着削减，腺泡和导管直径显着削减（P<0.01）（表4，图1）。成果标明，桂枝茯苓胶囊能显着按捺乳腺增生，改进乳腺增生大鼠的病理学特征。
4 评论
依照文献[3，5]选用苯甲酸雌二醇打针液和黄体酮打针液打针制造大鼠乳腺增生模型，笔者屡次预试验发现大鼠在打针苯甲酸雌二醇打针液期间雌激素水平上升显着，但停药1周后即康复正常水平，大鼠激素调理存在自愈性，故本文选用隔日打针苯甲酸雌二醇打针液至给药完毕[4]。
桂枝茯苓胶囊由东汉张仲景《金匮要略》中桂枝茯苓丸经过剂型变革而来，其组成为桂枝、茯苓、桃仁、丹皮、芍药，具有活血化瘀、消徵散结之功[6]。
临床上多用于卵巢囊肿、子宫肌瘤、乳腺增生等妇科血瘀证的医治[7-9]。医学研讨以为，乳腺增生症的发病主要与内分泌激素失谐和精力要素有关[10]，特别是与下丘脑-垂体-卵巢-乳腺内分泌轴平衡失调有关[11]，雌激素、雄激素、孕激素等性激素对乳腺的发育及病理改变均起着主导效果[12]，雌激素促进乳管及管周纤维安排成长，孕酮促进乳腺小叶及乳腺泡安排发育，正常的乳腺安排结构，跟着月经周期激素水平改变而发作着生理性增生-复古这种周期性的改变[1]。内分泌失调导致乳腺增生症已为大多数研讨者所公认。早在1883年，就有人提出本病可能与性激素有关；1947年初次提出雌激素与孕激素失调为本病的病因，即长时间的雌激素影响乳腺安排而无孕激素的操控和维护效果，是导致乳腺增生的主要原因[13]。大鼠经过打针雌激素而损坏体内雌孕激素平衡状况，当体内雌激素水平添加[14-15]，孕激素水平削减时，雌激素长时间影响乳腺安排，而缺少孕激素的操控和维护效果，引起乳腺本质增生过度和复古不全，导致乳腺安排结构发作紊乱，乳腺导管上皮和纤维安排不同程度的增生和腺管或腺泡构成囊肿。本研讨标明，桂枝茯苓胶囊可以下降乳腺增生模型的雌激素、升高孕激素水平，改进乳头肿胀程度，增强大鼠免疫力，按捺乳腺增生，并对大鼠子宫感染有显着的按捺造用。乳癖消调理雌激素效果略优于本药，其他目标效果同桂枝茯苓胶囊，然乳癖消全方组方杂乱，包括多味贵重补养药材，必定程度上影响了医治效果的专一性[16]，临床使用桂枝茯苓胶囊更显优势。
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Effects of Guizhi Fuling capsule on sex hormone levels and breast
issue morphology of mammary gland hyperplasia model rats
CHANG Xiu-juan1，2，3， ZHOU Jun1，2，3， ZHANG Shuai1，2，3， CHEN Jian1，2，3， CHEN Chun-miao1，2，3，
WANG Zhen-zhong1，2，3， XIAO Wei1，2，3*
（1.Jiangsu Kanion Pharmaceutical Co.， Ltd.， Lianyungang 222001， China；
2. State Key Laboratory of New-tech for Chinese Medicine Pharmaceutical Process， Lianyungang 222001， China；
3.Jiangsu Enterprise Academician Workstation， Lianyungang 222001， China）
[Abstract] Objective： To research the effects of Guizhi Fuling capsule on sex hormones levels in blood serum and breast issue morphology of hyperplasia of mammary glands model rats.Method： The unpregnancy SD rat models of hyperplasia of mammary glands were established by injecting 0.5 mg·kg-1benzoate estradiol.After five weeks doses，the effects of Guizhi Fuling capsule 2.0，1.0，0.5 g·kg-1and Rupixiao tablet 0.5 g·kg-1on the changes of papilla diameter， height and breast issue morphology of the naimal models were explored， and sex hormoneslevels in blood serum were measured.Result： Guizhi Fuling capsule can inhibitnipple swell，improve breast tissue morphology pathological profiles of the animalmodels， and decrease oestradiol（E2） level and increase progesterone（P） level in blood serum.Conclusion： These results suggested that Guizhi Fuling capsule could，improve mammary gland pathological profiles .Regulating sex hormone levels may be its important mechanism for treatment ofhyperplasia of mammary glands.
[Key words] Guizhi Fuling capsule； hyperplasia of mammary glands； sex hormone
doi：10.4268/cjcmm20142111
[责任编辑 马超一]endprint