小鼠灌胃量：小鼠最大灌胃量的研讨

鄢海燕等

[摘要] 意图 研讨小鼠最大灌胃量及其对小鼠心电图和心肌安排的影响。 办法 选用不同体重的小鼠灌胃后测定胃最大容量；以PEG6000制备不同黏度的溶液，以不同灌胃量灌胃后，记载小鼠心电图T波改动，制备小鼠心肌安排病理切片，光镜调查。 成果 在必定的体重范围内，小鼠体重与其灌胃量间存在必定的线性联系。与空白组比较，20 g/100 ml和40 g/100 ml两种黏度的PEG6000灌胃后小鼠心电图T波改动没有计算学含义（P>0.05），小鼠心肌安排切片未见异常。 定论 可按线性联系计算小鼠的最大灌胃量；以最大灌胃量灌胃，在必定黏度范围内，小鼠的心电图及心肌安排未受影响。

[关键词] 小鼠；灌胃；最大耐受剂量

[中图分类号] R-33 [文献标识码] A [文章编号] 1674-4721（2015）01（b）-0004-03

Study on the maximum tolerant dosage of mice by gastric perfusion

YAN Hai-yan ZOU Chun-cai YANG Yang LI Ping DENG Xiao-yang

Pharmacy School of Wannan Medical College in Anhui Province，Wuhu 241002，China

[Abstract] Objective To study the maximum tolerant dosage of mice by gastric perfusion and examine the influence of the electrocardiogram and myocardial tissue. Methods The maximum capacity was determined by using different body weight of mice after gastric perfusion.PEG6000 solution with different viscosity was prepared，and the T wave changes in ECG were recorded after administrating various dosages by gastric perfusion.The pathological sections of myocardial tissue was prepared and observed by using light and electron microscopy. Results In a certain weight range，linear relationship exists between the weight of mice and the gastric volume.Compared with the blank group，T wave changes of ECG in mice after gastric perfusion with 20 g/ml and 40 g/ml PEG6000 solutions had no statistical difference（P>0.05），and myocardial tissue sections in mice showed no abnormalities. Conclusion Maximum intragastric volume of mice can be calculated according to the linear relationship；It has no effect of ECG and myocardial tissue with the greatest amount of intragastic gavage in a certain solution viscosity range.

[Key words] Mice；Gastric perfusion；Maximum tolerant dosage

在口服药物的药理药效研讨中常要求以最大给药体积给小鼠灌胃，并习惯性规则灌胃最大容量以20 g体重1 ml药量为极限[1-4]，有的以每鼠0.8 ml为最大极限[5-8]。这种习惯性用法经预试验承认，在大都状况下不会因灌胃量问题而导致小鼠逝世[9-12]，但所给药量是否是最大灌胃量值得商讨，灌胃量对小鼠生理目标（如心电图）及安排（如心肌安排）的影响也未见相关报导。

1 材料与办法

1.1 仪器

AUW-220D型电子天平（日本岛津公司），1015型安排切片机（德国莱卡公司）；BP-600A全自动大小鼠无创血压丈量体系（成都泰盟软件有限公司），CKX41显微镜（奥林巴斯公司），日立H-7650透射电子显微镜（日本日立公司）。

1.2 药品与试剂

氨基甲酸乙酯（乌拉坦）（批号：20130916，天津市克复精细化工研讨所），聚乙二醇-6000（批号：20120908，天津市化学试剂三厂），无水乙醇（批号：20140405，天津市百世化工有限公司），苏木素-伊红染色液（醇液）（批号：20140311，无锡市江原实业技贸总公司）。

1.3 试验动物

SD健康小鼠（男女参半），体重16～38 g，合肥蜀山试验动物繁衍中心供给。

1.4 办法

1.4.1 生理状况下小鼠最大灌胃容量测定 取不同体重的小鼠100只，按（20±0.2）、（23±0.2）、（25±0.2）、（26±0.2）、（27±0.2）、（28±0.2）、（29±0.2）、（30±0.2）、（31±0.2）、（32±0.2） g分为10组，每组10只，男女兼有，麻醉后剖腹，露出胃和小肠，然后用加蓝墨水的生理盐水灌胃至蓝墨水经过幽门时中止灌注，所耗费的生理盐水量就是在生理状况下小鼠灌胃的最大容量。

1.4.2 PEG6000溶液灌胃后对小鼠心脏的影响 取SD健康小鼠150只，随机分为试验组和对照组。试验组用20 g/100 ml、40 g/100 ml的PEG6000溶液灌胃，灌胃剂量为0.6 ml/20 g、1.0 ml/20 g、1.4 ml/20 g，对照组以相同剂量的生理盐水灌胃。各组小鼠用乌拉坦麻醉后仰卧固定，待安稳后记载灌胃后2、4、6、8、10 min的心电图。调查并比较两组心电图的改动。

1.4.3 小鼠心脏的病理切片调查 心电图记载结束后放血处死小鼠，取心脏安排标本，用4%中性甲醛固定，按病理查验程序进行，惯例白腊包埋，切片，5 μm，HE染色，光学显微镜调查。

1.5 计算学处理

选用SPSS 11.0计算软件对数据进行剖析和处理，计量材料以x±s表明，选用方差剖析，以P<0.05为差异有计算学含义。

2 成果

2.1 生理状况下小鼠体重与灌胃体积的联系

灌胃体积随小鼠体重的添加而添加，趋势逐突变缓，并且在必定的体重范围内灌胃体积与小鼠体重呈线性联系，线性方程为：y=0.0836x-0.6161，r=0.9598（图1）。

图1 生理状况下小鼠体重与灌胃体积的联系

A.改动趋势曲线；B.线性联系曲线

2.2 PEG6000溶液灌胃后小鼠心电图的改动

不同浓度PEG6000灌胃后，与其相同灌胃剂量的空白组比较，心电图的T波改动值差异无计算学含义（P>0.05）（表1）。

2.3 心肌安排病理学成果

光镜调查心肌安排的病理学改动，不同浓度PEG6000灌胃后，与其相同灌胃剂量的空白组的心肌安排比较，未见安排病理学改动（图2）。

3 评论

调查药物的黏稠度、小鼠胃容量对小鼠生理目标、安排的影响而断定一个能够遍及适用的灌胃体积数值十分必要[13-16]。若灌胃量偏小，达不到预期给药剂量；灌胃体积过大并超越胃内最大容积，重则小鼠逝世，轻则药液会沿着针管流出食道，乃至溢出口腔，不只会使进入胃中的实践药量削减，并且过度舒张的胃壁会影响并振奋迷走神经，从而对心脏发作抑制效果，形成小鼠的心电图发作改动，心肌安排发作改动，影响药物特别是心血管疾病药物的药理药效试验成果。对小鼠最大灌胃量问题的调查与研讨是药理药效研讨的基础性作业，若不能精确掌握给药体积，后续试验的精确性和重复性将难以实现[17-20]。

通常状况下，不同体重小鼠间的灌胃量是依据小鼠的体重比值进行换算。经过本试验生理状况下小鼠最大灌胃容量的测定，承认在必定的小鼠体重范围内，灌胃量和小鼠体重存在必定的线性联系，因而断定某一体重小鼠的最大灌胃容量后，可依据不同小鼠的体重状况按线性联系加以调整。

不同浓度的PEG6000溶液，黏稠度不同。本试验可知，与空白组比较，相同灌胃量的不同浓度PEG6000溶液灌胃后对小鼠心电图T波改动的影响差异无计算学含义（P>0.05），心肌安排病理切片也未见改动。在进行药理药效研讨时，关于有必定黏稠度的制剂，尽可能进步药物浓度，可到达最大给药量。

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（收稿日期：2014-08-29 本文修改：李亚聪）