多卵巢综合征前期症状 和肽素检测在心肾综合征大鼠模型中的确诊价值
盛晓生+林丽+俞章平+蒋李珍+丁明星+郭方明
[摘要] 意图 研讨和肽素（copeptin，CPP）水平对大鼠心肾综合征（cardiorenal syndrome，CRS）的确诊价值。 办法45只雄性SD大鼠选用部分肾切除术兼并心肌梗死术树立CRS模型，随机分红CK组（空白对照组）、MI组（心肌梗死组）、CRS组（心肾综合征组），造模后1～5周检测血清中CPP浓度的改变及血液动力学、肾功用的水平。成果 与CK组比，造模后MI组和CRS组血肌酐（SCr）、尿肌酐（UCr）、尿素氮（BUN）均显着升高（P<0.05），并且与MI组比较，CRS组SCr在第5周显着升高，BUN在1 w、3 w、4 w、5 w均显着升高（P<0.05）。与CK组比较，CRS组在造模后1 w、2 w、3 w、4 w、5 w血清中CPP显着升高（P<0.05）；与MI组比较，CRS组造模后1 w、5 w血清中CPP显着升高（P<0.05）。 定论 心肾综合征大鼠血清和肽素水平显着升高，具有必定的确诊价值。
[要害词] 和肽素；心肾综合征；心肾功用；大鼠
[中图分类号] R541.6 [文献标识码] A [文章编号] 1673-9701（2017）34-0024-04
The diagnostic value of copeptin detection in rat models of cardiorenal syndrome
SHENG Xiaosheng1 LIN Li2 YU Zhangping1 JIANG Lizhen1 DING Mingxing3 GUO Fangming3
1.Department of Cardiology， Jinhua People's Hospital in Zhejiang Province， Jinhua 321000， China； 2.Department of Anesthesiology， Jinhua People's Hospital in Zhejiang Province， Jinhua 321000， China； 3.Department of Medical Sci7ence， Jinhua Polytechnic， Jinhua 321007， China
[Abstract] Objective To study the value of copeptin（CPP） in the diagnosis of cardiorenal syndrome（CRS） in rats. Methods 45 male Sprague-Dawley rats were treated with partial nephrectomy combined with myocardial infarction to establish CRS model and randomly divided into CK group （blank control group）， MI group （myocardial infarction group） and CRS group （cardiorenal syndrome group）. The changes of serum CPP concentration and hemodynamics， and the level of renal function were measured in the next 1-5 weeks after modeling. Results Compared with those in CK group， the serum creatinine （SCr）， urinary creatinine （UCr） and blood urea nitrogen （BUN） in MI group and CRS group after modeling were significantly higher （P<0.05）. The SCr of the CRS group significantly increased in the week 5 compared with that of the MI group， and the BUN of the CRS group were significantly increased in the week 1 3， 4， 5 compared with that of the MI group（P<0.05）. The serum CPP of CRS group was significantly higher than that of the CK group at 1w， 2w， 3w， 4w and 5w after modeling（P<0.05）. The CPP of CRS group was significantly higher than that of the MI group at 1w and 5w after modeling（P<0.05）. Conclusion The level of serum copeptin in rats with cardiorenal syndrome is significantly increased， and has certain diagnostic value.
[Key words] Copeptin； Cardiorenal syndrome； Heart and kidney function； Diagnosis； Rat
心力衰竭患者的办理自身是一項具有挑战性的使命，但随同着恶化的肾功用会大大添加逝世率和发病率。急性心衰患者常会随同肾功用恶化，即急性心肾综合征。前期确诊和医治是避免患者再次住院及下降医疗费用的要害。生物标志物已经是确诊和猜测心衰患者高度活络和特异的东西。和肽素（Copeptin，CPP）由Holwerda于1972年初次发现，是糖基化的39个氨基酸长的肽段，富含亮氨酸，为前精氨酸加压素（arginine vasopressin，AVP，亦称AND）的前体肽C-结尾最终一部分，与AVP具有类似的血浆水平[1]。和肽素的丈量对心血管疾病（如心脏衰竭、心肌梗死和卒中）和肾脏疾病及感染等的确诊均具有必定的价值，有望成为一个安稳的和活络的前期确诊、预后点评新式标志物[2，3]，因而本文经过和肽素在心肾综合征大鼠模型中的检测，查询其对心肾综合征的确诊价值。现报导如下。endprint
1 材料与办法
1.1 动物造模
45只雄性SD大鼠，体重250～280 g，SPF级，购自上海斯莱克试验动物有限责任公司，许可证号：SCXK（沪）2012-0002，合格证号：0278317。试验大鼠在动物房环境中习惯6 d后，选用随机抓取办法分为3组（每组15只），包含CK组（空白对照组）、MI组（心肌梗死组）和CRS组（心肾综合征组），依照文献报导的办法选用复合术式建模[4]。
空白对照（CK）组：进行惯例喂食，不做任何其他处理。心肌梗死（MI）组：10%水合氯醛3 mL/kg腹腔麻醉，胸部皮肤去毛，碘伏消毒，左边胸部剪开皮肤，钝性别离肌肉，3、4肋间开胸器撑开肋骨，扯开心包膜露出心脏，结扎左冠状动脉骨干。肉眼查询左心室壁变白，ECG QRS波形变高变宽，S波与T波交点（J点）显着举高，或许呈现R波消失，呈典型QS波形时，提示结扎成功。关胸，逐层缝合肌肉与皮肤。待动物复苏后放回笼中养殖。术后3 d肌注10万单位青霉素钠抗感染。心肾综合征（CRS）组：切除左边肾脏并结扎冠状动脉建模。10%水合氯醛3 mL/kg腹腔麻醉，腹部皮肤去毛，碘伏消毒。翻开腹腔，结扎左边肾脏肾动脉、肾静脉和输尿管后，切除左边肾脏，封闭腹腔，逐层缝合。余下过程与MI组相同。一切的试验程序依照试验动物同意协议进行。
1.2 心功用点评
3组大鼠别离于第9天、第5周时刻，10%水合氯醛3 mL/kg腹腔麻醉后，颈部正中纵行切开2 cm切断，露出右颈总动脉，PE50导管插管至左心室，选用生物信号处理系统剖析心功用参数，包含心率（HR）、左室收缩压（LVSP）、左室舒张末压（LVEDP）、左室内压改变速率（±dp/dtmax）等的改变。
1.3 肾功用点评
建模成功后，眼眶取血及尿液搜集，每周1次，共5次，进行肾功用检测。运用BUN测验盒（南京建成生物工程研讨一切限公司，货号：C013-2，批号：20161228）以生化法检测血清中各组BUN的水平；运用肌酐（Cr）测定试剂盒（宁波瑞源生物科技有限公司，货号：2400746，批号：2017020802）以肌氨酸氧化酶法检测各组大鼠血清及尿液中的Cr水平（SCr、UCr）。
1.4 ELISA检测CPP水平
建模成功后，每周一次行眼眶取血，选用CPP的ELISA試剂盒检测各组大鼠血清CPP水平。
1.5计算学剖析
一切数据计算运用SPSS22.0计算学软件包进行剖析。计量材料以均数±规范差（x±s）标明，多组间比较选用单要素方差剖析，进一步两两比较选用LSD-t查验，P<0.05为差异具有计算学含义。
2 成果
2.1 各组大鼠血流动力学改变的改变
血流动力学成果显现，在第9地利刻点三组大鼠的LVSP和LVEDP水平差异有计算学含义（F=9.04、36.47，P=0.02、0.00，P均<0.05），在5w时刻点三组大鼠的LVEDP水平差异有计算学含义（F=21.59，P=0.00<0.01）；与CK组比，MI组、CRS组大鼠LVSP在9 d时刻点显着下降（t=8.58、9.44，P<0.05），LVEDP显着升高（t=3.47、13.44，P<0.05），LVEDP在5w时刻点显着升高（t=20.72、9.29，P<0.05），与MI组比较，CRS组LVEDP在第9地利显着升高（t=44.84，P<0.05），见表1。
2.2部分肾切除术兼并心肌梗死术对大鼠SCr、UCr、BUN的影响
在1 w、2 w、3 w、4 w和5 w时刻点三组大鼠的SCr水平差异有计算学含义（F=5.24、5.32、4.16、4.24、19.87，P=0.03、0.01、0.045、0.04、0.00，P均<0.05），在1 w、2 w、3 w、4 w和5 w时刻点三组大鼠的UCr水平差异有计算学含义（F=6.37、7.67、6.30、4.69、14.75，P=0.01、0.01、0.02、0.04、0.00，P均<0.05），在1w、2w、3w、4w和5w时刻点三组大鼠的BUN水平差异有计算学含义（F=29.87、4.17、5.18、20.50、12.34，P=0.00、0.05、0.03、0.00、0.00，P均<0.05）；与CK组比，MI组大鼠血肌酐（SCr）在第4周显着升高（t=3.07，P<0.05），UCr在1w、2w、3w、4w和5w时刻点均显着升高（t=13.16、14.12、6.48、10.61，t=22.09，P<0.05）。CRS组大鼠2w、3w、4w、5w时刻点血肌酐（SCr）显着升高（t=3.85、3.81、4.33、7.62，P<0.05），尿肌酐（UCr）在1 w、2 w、3 w、4 w和5 w时刻点均显着升高（t=16.17、13.12、15.09、21.09、23.66，P<0.05）。与CK组比，MI组在造模后5w血清中BUN显着升高（t=4.66，P<0.05），CRS组在造模后1 w、3 w、4 w、5 w血清中BUN显着升高（t=8.49、4.99、9.49、8.72，P<0.05），与MI组比较，CRS组SCr在2 w、3 w、4 w、5 w显着升高（t=3.01、2.36、5.55，P<0.05），BUN在1 w、3 w、4 w、5 w均显着升高（t=10.23、2.50、7.80、3.80，P<0.05），见表2。
2.3 部分肾切除术兼并心肌梗死术对大鼠血清CPP的影响
在1 w、2 w、3 w、4 w和5 w时刻点三组大鼠的血清CPP水平差异有计算学含义（F=4.51、6.66、5.99、6.99、7.05，P=0.02、0.01、0.02、0.01、0.01，P均<0.05）；与CK组比，CRS组在造模后1 w、2 w、3 w、4 w、5 w血清中CPP显着升高（t=12.59、12.60、10.17、19.70、11.70，P<0.05），与MI组比较，CRS组造模后1 w、4 w、5 w血清中CPP显着升高（t=10.58、4.50、7.79，P<0.05），见表3。endprint
3 討论
心肾功用妨碍常一起存在，研讨发现约70%心力衰竭（HF）兼并肾危害，其间29%有中度或严峻肾功用不全[5]，而肾功用是最重要的预后要素之一，肾妨碍预示着逝世的危险添加。因而，近年来对心肾综合征的研讨越来越多，心肾综合征（cardiorenal syndrome，CRS）是指心脏或肾脏中任一个器官的急性或缓慢病理生理紊乱引起另一器官急性或缓慢功用紊乱.以及其他原因引起心脏和肾脏一起功用反常的一组临床综合征[6]。本研讨CRS组大鼠模型成功结扎了冠状动脉，形成了急性心肌梗死、心功用的下降；一起部分肾切除形成肾功用危害，同CK组比较，造模后血肌酐显着升高，达到了急性肾功用危害的规范，符合心肾综合征确诊规范[7-9]。本文成果提示，CRS大鼠模型树立后，心肾综合征组大鼠左室收缩压、左室舒张末压、左室内压改变速率等心功用目标均显着下降，CRS组大鼠血肌酐与MI组、CK组比较，在2周、5周均有显着升高，尿肌酐和BUN除第二周外，在其他各时刻点均有升高，标明大鼠肾功用也显着下降，与对照组比较有显着的计算学差异，阐明CRS组大鼠存在心肾共损，促进和加剧了疾病的一起发展。但至今停止，心肾综合征心、肾交互作用的杂乱机制仍未能彻底提醒，有学者指出胱抑素C、NAGL、KIM-1等生化标志物有助于CRS的前期确诊和预后判别[10，11]。别的，也有相关研讨显现，中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白、肾危害分子-1（KIM-1）、胱抑素C（CysC）、N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶（NAG）、白细胞介素-18（IL-18）、心房利钠肽（NAP）、肌钙蛋白（cTn）、促炎性细胞因子、肿瘤坏死因子-α、IL-1、IL-6、不对称的二甲基精二酸及髓过氧化物酶也是 CRS 的新颖目标[12，13]。但对和肽素的研讨现在仍较少。和肽素（copeptin）是AVP前体羧基结尾的一段多肽，很多文献报导，在多种心肺血管疾病中，患者血液中AVP水平显着升高，且与疾病严峻程度和预后亲近相关，因而AVP曾被认为是这些疾病的重要标志性预警分子。但AVP极不安稳，半衰期短，因而不适合作为生物标志物，与AVP相反的是，和肽素在血中长时刻保持安稳，利于检测，能够作为生物标志物代替AVP的检测[14]。
Morgenthaler NG[15]报导和肽素与心血管疾病包含冠心病、急性心肌梗死、心功用不全以及肾功用不全均有亲近的联系。Khan等[16]在1项前瞻性单中心研讨（LAMP研讨）中对980例急性心肌梗死（AMI）患者进行临床随访查询，计算学剖析标明入院时血浆和肽素水平与患者病死率和心衰等事情发生亲近相关[16]。王建红等[17]研讨发现和肽素在心力衰竭患者的确诊和医治中有着重要的指导含义。但近年学者发现和肽素与肾功用也有必定联系。Meijer E等[18]研讨指出高Copeptin浓度与肾功用差、肾血流削减、肾小球肥大和蛋白尿等有关。别的，Engelbertz C等[19]研讨发现，和肽素水平升高与冠心病兼并肾功用不全的逝世率有亲近联系。但和肽素用于心肾综合征的确诊方面，现在国内外研讨尚少。
本文研讨标明，CRS组大鼠血清和肽素水平显着升高，1周、5周各个时刻点和对照组比较有计算学含义。阐明和肽素水平心肾共损存在必定的联系，心肾综合征可导致和肽素水平的反常升高。尽管MI组在各个时刻点和CK组比较和肽素也显着升高，但与MI组比较，在1 w、4 w、5 w时，CRS组和肽素水平显着升高，差异具有计算学含义，阐明心肾综合征和肽素水平比心功用不全不伴肾功用危害升高愈加显着，对前期确诊心肾综合征有必定的含义。有学者研讨发现[20]，和肽素在有心功用不全伴肾功用不全患者中显着高于无肾功用不全患者，差异有计算学含义，阐明心肾功用一起危害能够使和肽素目标显着升高。Choudhary R等[21]也指出Copeptin是一个潜在的心肾综合征的预后目标，和肽素升高与急性心衰射血分数下降、肾小球滤过率下降、蛋白尿添加、逝世率添加有关。但本文研讨成果未能清晰和肽素确诊心肾综合征的目标规模值，也未能清晰和肽素在辨别确诊心肾综合征与心功用不全不伴肾功用危害的目标规模，需求更多和更很多样本的研讨。
综上所述，心肾综合征导致心肾一起呈现危害的医治仍是一个很大的难题，故前期猜测与干涉显得尤为重要。检测CRS大鼠血清和肽素水平对前期发现心肾并损程度有必定的协助，为临床上心肾等重要器官急诊应激病况的猜测供给客观根据。
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（收稿日期：2017-09-06）endprint