核酸检测hiv最佳时刻 血液筛查病毒核酸检测的室间质量点评

王芳

【摘要】 意图 对血液筛查病毒核酸检测的室间质量点评进行剖析， 点评本试验室核酸检测成果的准确性。办法 10份本年度由卫计委临床查验中心第一次发放的病毒核酸查核样本， 选用同本室惯例核酸标本相同的检测办法， 别离进行乙型肝炎病毒的脱氧核糖核酸（HBV-DNA）、丙型肝炎病毒的核糖核酸（HCV-RNA）、人类免疫缺点性病毒的核糖核酸（HIV-RNA）三个项意图混检和单检， 运用本室聚合酶链式反响（PCR）检测体系， 严厉按标准操作。依据反响成果与本室检测成果进行比照， 调查室间质量点评成果， 剖析本试验室核酸检测成果准确性。成果 10份标本的HBV-DNA、HCV-RNA、

HIV-RNA室间质量点评中， 定性成果与预期共同， 阳性成果检测CT值， 与全国同一检测体系靶值附近。HBV-DNA阳性标本别离为样本11、样本13、样本14、样本18、样本19， 混样检测CT值成果别离为37.1、36.6、37.7、37.8、35.5， 而该试剂混检全国均匀CT值别离为35.0、35.4、37.0、37.6、35.3， 单检CT值别离为33.4、32.6、35.7、37.5、34.0， 全国均值依次为32.5、32.4、34.4、35.2、32.6。HCV-RNA检测出阳性成果1个， 为样本15， 混检和单检CT值别离为35.4、31.5；而该样本同一检测试剂的混检和单检全国均匀CT值别离为33.0、30.0。HIV-RNA阳性成果2个， 别离为样本11、样本17， 本室混检CT值别离为41.8、41.0， 全国均值别离为41.0、41.2， 单检CT值为37.2、38.0， 全国均值为38.0、38.4。定论 室间质量点评的运用， 可用于试验室检测体系的功能验证， 有利于进步和确保试验室作业质量。

【关键词】 血液筛查病毒；核酸；脱氧核糖核酸；核糖核酸；室间质量点评

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2018.13.118

特异性靶核酸序列一般经聚合酶链式反响， 进行体外高效扩增， 此技能作为分子生物学检测先进办法， 广泛运用于多种疾病中， 如乙肝、丙肝、艾滋病等， 具有共同优势， 但由于此技能发展时间短， 现在还存在必定运用局限性， 尤其在供血体系， 部分试验室选用的是多人份混样检测形式， 故而， 室间质量点评必不可少， 直接关系着基因扩增查验的准确性、有用性， 关系着血液的质量安全[1]。本文旨在剖析血液筛查病毒核酸检测室间质量点评成果的运用。现陈述如下。

1 资料与办法

1. 1 资料

1. 1. 1 检测体系 上海浩源核酸检测体系自动化磁珠操作渠道Chitas 1200， ABI 7500 PCR扩增仪， 两台设备均经校准合格， 校准期内运转正常。

1. 1. 2 检测试剂与耗材 配套运用上海浩源核酸检测试剂盒， 运用前均经进货承认并在有用期内运用， 所用耗材如搅拌棒、PCR反响管、PCR耗材等均由试剂生产商供给， 要求无DNA酶， 无RNA酶。

1. 1. 3 室内质控血清 运用北京康彻思坦公司供给的商品化的HBV-DNA、HCV-RNA、HIV-RNA核酸检测标准血清， 浓度别离为200 IU/ml， 1000 IU/ml， 2000 IU/ml的核酸質控品， 是试剂最低检出限的2～5倍。

1. 1. 4 室间质量点评质控血清样本 10支卫计委临床查验中心发放的血液筛查核酸检测质评样本， 编号别离为11～20。

1. 2 办法 运用上海浩源核酸样本处理检测体系Chitas 1200进行PCR模板的制备：挑取70份现已经本室核酸检测成果阴性的惯例核酸标本， 每7份别离与1份室间质量点评样本进行混样（8人份混合检测）， 并同当日检测标本一同随机摆放， 严厉按仪器和试剂操作说明书进行标本混样、病毒核酸裂解、提取、纯化， 最终制备出扩增反响液置于ABI 7500扩增仪中扩增核酸序列， 依据荧光信号的改变表明扩增成果， 病毒核酸浓度到达检测限时的扩增循环数以CT值表明， CT值与病毒含量成反比， 若CT值>45则成果为阴性。室间质量点评于2017年3月进行， 依照质控中心要求检测日期范围内检测， 截止日期前实施网络上报。检测室间质量点评样本数共10个， 依照PCR试验室各项检测标准操作履行， 收到反响后对成果进行剖析。

1. 3 调查目标 依据反响成果与本室检测成果进行比照， 调查室间质量点评成果， 剖析本试验室核酸检测成果准确性。

2 成果

2. 1 定性检测值比较 HBV-DNA室间质量点评中， 样品11～20混检和单检成果别离为+、-、+、+、-、-、-、+、+、-， 定性成果与预期共同， 阳性成果检测CT值， 与全国同一检测体系靶值附近。

HCV-RNA室间质量点评中， 样品11～20混检和单检成果别离为-、-、-、-、+、-、-、-、-、-， 定性成果与预期共同， 阳性成果检测CT值， 与全国同一检测体系靶值附近。

HIV-RNA室间质量点评中， 样品11～20混检和单检成果别离为+、-、-、-、-、-、+、-、-、-， 定性成果与预期共同， 阳性成果检测CT值， 与全国同一检测体系靶值附近。

2. 2 定量检测CT值比较 HBV-DNA阳性标本别离为样本11、样本13、样本14、样本18、样本19， 混样检测CT值成果别离为37.1、36.6、37.7、37.8、35.5， 而该试剂混检全国均匀CT值别离为35.0、35.4、37.0、37.6、35.3， 单检CT值别离为33.4、32.6、35.7、37.5、34.0， 全国均值依次为32.5、32.4、34.4、35.2、32.6。HCV-RNA检测出阳性成果1个， 为样本15， 混检和单检CT值别离为35.4、31.5；而该样本同一检测试剂的混检和单检全国均匀CT值别离为33.0、30.0。HIV-RNA阳性成果2个， 别离为样本11、样本17， 本室混检CT值别离为41.8、41.0， 全国均值别离为41.0、41.2， 单检CT值为37.2、38.0， 全国均值为38.0、38.4。

3 评论

室间质量点评主要是将经过试验室质量考评成果的比对， 对既定项目查验成果的共同性、准确性进行客观点评， 了解检测成果差异， 提出针对性改善办法[2， 3]， 进步试验室检测技能， 进而促进试验室作业质量趋于共同， 取得可比性， 具有削减过失、改善作业、进步作业质量等优势[4-6]。也是对检测试验室所展开的项目检测才能的点评与验证。

本文10份查核样本中， HBV-DNA共检测出5个阳性样本， HCV-RNA共检出1个阳性样本， HIV-RNA共检出2个阳性样本， 此次成果中， 定性查看与卫计委临床查验中心反响的预期成果彻底相符， 定量检测中上述三个项目本室检测值与全国同一检测体系均匀值根本相符， 精密度较佳， 而混样检测成果中三个项意图阴性成果与预期彻底符合， 准确性好。在实践作业中， 样本检出才能差或许是受标本管挑选、标本留取办法和离心时限、标本质量、环境温度、湿度等影响， 操作不妥极有或许导致在PCR扩增反响液制备前期核酸降解， 进而影响查看成果[7-10]。

综上所述， 室间质量点评可以反映试验室作业质量， 经过比照检测成果， 利于削减过失、改善作业， 進一步标准试验操作， 进步质评成果。

参考文献

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[收稿日期：2018-01-08]