真菌D葡聚糖检测 真菌（1，3）—β—D—葡聚糖检测在前期确诊ICU肺侵袭性真菌感染中的临床价值
汪艳 沈翠芬 夏森林
[摘要] 意图 评论真菌（1，3）-β-D-葡聚糖检测（G试验）在前期确诊ICU肺侵袭性真菌感染（IFI）中的临床价值。办法 挑选2014年1月～2017年1月入住浙江省湖州市中心医院呼吸重症监护病房（RICU）和急诊重症监护病房（EICU）108例怀疑为肺部侵袭性真菌感染患者，依据出院时临床确诊分为IFI组（42例）和非IFI组（66例），运用G试验检测两组患者入院当天的真菌（1，3）-β-D-葡聚糖浓度，并与传统的真菌培育办法比较。 成果 IFI组G试验值为（78.7±32.1）pg/mL，显着高于非IFI组（9.6±4.2）pg/mL，差异有计算学含义（P<0.01）；IFI组患者中，G试验阳性率高达81.0%，高于真菌培育查验办法（66.7%），但差异无计算学含义（P>0.05）；血浆G试验确诊IFI的灵敏度为81.0%、特异度为92.4%、阳性猜测值为87.1%、阴性猜测值为88.4%，而真菌培育办法的灵敏度为66.7%、特异度为80.3%、阳性猜测值为68.3%、阴性猜测值为79.1%。 定论 血浆（1，3）-β-D-葡聚糖检测（G试验）具有快速、精确、简易等特色，在ICU肺IFI前期确诊中具有较杰出的临床价值。
[关键词] （1，3）-β-D-葡聚糖；G试验；肺侵袭性真菌感染；真菌培育
[中图分类号] R519 [文献标识码] B [文章编号] 1673-9701（2018）07-0122-03
[Abstract] Objective To investigate the clinical value of fungal（1，3）-β-D-glucan detection（G test） in the early diagnosis of pulmonary invasive fungal infection（IFI） in ICU. Methods From January 2014 to January 2017， 108 patients suspected of pulmonary invasive fungal infection who were admitted to Respiratory Intensive Care Unit（RICU） and Emergency Intensive Care Unit（EICU） in Huzhou Central Hospital of Zhejiang Province were selected. According to clinical diagnosis at discharge， the patients were divided into IFI group（n=42） and non-IFI group（n=66）. The G test was used to detect the fungal（1，3） -β-D-glucan concentration on the day of admission in both groups， which was compared with the traditional fungal culture method. Results The G test value in IFI group was（78.7±32.1）pg/mL， which was significantly higher than that of（9.6±4.2） pg/mL in the non-IFI group， and the difference was statistically significant（P<0.01）； the positive rate of G test in IFI group was 81.0%， which was higher than that of 66.7% in fungal culture test， but the difference was not statistically significant（P>0.05）； the sensitivity of plasma G test in diagnosing IFI was 81.0%， specificity was 92.4%， positive predictive value was 87.1%， and negative predictive value was 88.4%. The sensitivity of fungal culture method was 66.7%， specificity was 80.3%， positive predictive value was 68.3%， and negative predictive value was 79.1%. Conclusion The plasma（1-3）-β-D-glucan detection（G test） is fast， accurate and simple. In the ICU pulmonary IFI early diagnosis， it has a more outstanding clinical value.
[Key words] （1，3） -β-D-glucan； G test； Pulmonary invasive fungal infection； Fungal culture
近年來重症监护病房（intensive care unit，ICU）中，因为广谱抗生素的广泛运用，免疫抑制剂、糖皮质激素运用添加，危重患者如杂乱腹部手术、严峻伤口、重症胰腺炎、糖尿病、恶性肿瘤、急性肝肾功用衰竭等疾病增多，胃肠外养分、中心静脉导管、留置导尿等有创技能广泛开展，侵袭性真菌感染（invasive fungal infection，IFI）发病率逐年增高，病况发展敏捷，病死率高达30%～80%[1，2]。而肺部侵袭性真菌感染临床表现缺少特异性，前期辨认极为困难，且安排病理检测及真菌培育时刻长，常延误病况。因而，怎么前期精确快速简洁地确诊和医治ICU肺侵袭性真菌感染患者，对预后至关重要。真菌（1，3）-β-D-葡聚糖在前期的真菌感染确诊已在临床上较广泛运用[3，4]，但在ICU肺侵袭性真菌感染方面鲜有报导。本研讨旨在经过检测临床确诊为肺侵袭性真菌感染患者的血浆真菌（1，3）-β-D-葡聚糖水平，并与真菌培育成果比照，评论真菌（1，3）-β-D-葡聚糖检测在ICU肺侵袭性真菌感染患者前期确诊与医治中的临床价值。
1 材料与办法
1.1 一般材料
挑选108例怀疑为肺部侵袭性真菌感染患者，均为2014年1月～2017年1月浙江省湖州市中心医院呼吸重症监护病房（respiratory intensive care unit，RICU）和急诊重症监护病房（emergency intensive care unit，EICU）住院患者，男67例，女41例；年纪38～94岁，均匀（60.1±21.3）岁；以出院临床确诊为依据，且规范契合2013年侵袭性真菌感染确诊和医治攻略[5]，将患者分为IFI组42例，非IFI组66例。
1.2 仪器与设备
MB-80S微生物动态快速检测体系、T01智能恒温仪、真菌（1，3）-β-D-葡聚糖检测（G试验）试剂盒、离心机、无热原真空采血管（肝素抗凝剂）、无热源规范反响管、二氧化碳培育箱、血平板、巧克力平板。
1.3 檢测办法
（1）血浆真菌（1，3）-β-D-葡聚糖水平的测定（G试验）：一次性真空无热源采血管收集静脉血2 mL，3000 r/min，离心10 min；一切患者入院当天收集0.1 mL别离的血浆参加样品处理液；混匀后于T01智能恒温仪70℃保温10 min，取出后马上放入T01智能恒温仪冷却槽中冷却5 min即为待测血清样品；取0.2 mL待测血清样品参加酶反响主剂中，溶解后移液至无热源规范反响管中，刺进MB-80S微生物动态试管检测仪中进行反响。90 min后反响结束，检测软件将主动处理数据，计算出样品供试溶液中的真菌（1，3）-β-D-葡聚糖测量值。判别规范：G试验成果在0～60 pg/mL为阴性；成果>60 pg/mL为阳性。（2）真菌培育：抽取血液进行G试验的一起，依据患者的状况留取标本送血或痰、尿等体液做真菌培育及真菌涂片查看。相应标本的真菌培育操作均按《全国临床查验操作规程（第3版）》[6]进行。
1.4 调查目标
检测一切入组患者入院当天的血浆真菌（1，3）-β-D-葡聚糖测量值（pg/mL）；两种检测办法的阳性率=确诊试验阳性患者例数/患者总例数×100%；比较G试验和真菌培育两种办法在一切入组患者确诊IFI的特异度、敏感度、阳性猜测值（positive predictive value，PPV）和阴性猜测值（negative predictive value，NPV）。
1.5 计算学办法
选用SPSS19.0计算软件进行剖析，计量材料进行正态性查验，正态分布者以均数±规范差（x±s）表明，两组正态分布的计量材料比较选用t查验；计数材料以比或率表明，选用χ2查验；P<0.05为差异有计算学含义。
2 成果
2.1 两组患者真菌（1，3）-β-D-葡聚糖检测成果比较
108例ICU怀疑为肺部侵袭性真菌感染患者中，出院时临床确诊IFI患者42例，非IFI患者66例；非IFI的真菌（1，3）-β-D-葡聚糖浓度为（9.6±4.2）pg/mL，而IFI患者的浓度较非IFI组显着升高，为（78.7±32.1）pg/mL，差异具有计算学含义（t=17.302，P<0.01）。
2.2 IFI组患者两种检测办法比较
42例IFI组患者中，真菌培育阳性28例，阳性率66.7%，而G试验阳性34例，阳性率高达81.0%，高于真菌培育查验办法，但经卡方查验，差异无计算学含义（χ2=1.93，P>0.05），见表1。
2.3 两组患者真菌培育成果和G试验成果比较
两种检测办法在两组患者检测后比较发现：真菌培育确诊IFI灵敏度为66.7%、特异度为80.3%、阳性猜测值为68.3%、阴性猜测值为79.1%；而血浆G试验的灵敏度为81.0%、特异度为92.4%、阳性猜测值为87.1%、阴性猜测值为88.4%。见表2。
3评论
侵袭性真菌感染（IFI）系指在宿主免疫功用缺点或低下时，因为条件致病性真菌侵入人体，在安排、器官或血液中成长、繁衍，并导致炎症反响及安排损害的疾病。重症监护病房（ICU）中，因为许多高危要素如机械通气、中心静脉置管、彻底胃肠外养分、血液透析、外科大手术、重症胰腺炎以及糖皮质激素、免疫抑制剂的广泛运用，侵袭性真菌感染（IFI）的发病率居高不下[7]，而由肺部IFI所造成的的重症肺炎多见，发病率和病死率高[1，8，9]，但前期因缺少特异性的临床表现，传统检测办法如安排病理、印象学、镜检等因有伤口性、灵敏性低、耗时长等原因受到限制，因而，前期确诊好不容易。
G试验检测广泛存在于真菌细胞壁中的（1，3）-β-D-葡聚糖（除隐球菌和接合菌），人体的吞噬细胞吞噬真菌后，能继续开释该物质，使血液及体液中含量增高。血浆（1，3）-β-D-葡聚糖可特异性激活鲎（Limulus）变形细胞裂解物中的G因子，引起裂解物凝结，这成为判别真菌感染的新途径。以往有研讨证明，G试验在真菌感染的前期确诊中具有活跃的临床价值[10-15]。在本研讨中，ICU内非IFI组的血浆（1，3）-β-D-葡聚糖浓度为（9.6±4.2）pg/mL，而IFI组患者的血浆浓度显着升高，达（78.7±32.1）pg/mL，差异有计算学含义（t=17.302，P<0.01），阐明（1，3）-β-D-葡聚糖在ICU内肺部IFI的前期确诊中具有重要临床含义。在42例临床确诊的IFI组患者中，真菌培育阳性28例，阳性率66.7%，而G试验阳性34例，阳性率高达81.0%，高于真菌培育阳性率，但经卡方查验，差异无计算学含义（χ2=1.93，P>0.05）；在确诊效能方面，经过比较42例临床确诊为IFI患者和66例非IFI患者发现：真菌培育确诊IFI灵敏度为66.7%、特异度为80.3%、阳性猜测值为68.3%、阴性猜测值为79.1%，而血浆G试验的灵敏度为81.0%、特异度为92.4%、阳性猜测值为87.1%、阴性猜测值为88.4%，可见G试验在确诊ICU肺部IFI患者的特异度和灵敏度均非常抱负。一起，G试验的高阴性猜测值和高灵敏度在扫除性确诊IFI具有较好的临床含义，可用于辅导临床用药，避免抗真菌药物的过度医治。在确诊时刻方面，本研讨中，G试验从接纳标本到出具陈述仅需2 h，较传统的安排培育（约3～5 d）具有显着的优势。Acosta J等[16]一项针对ICU内非粒细胞缺少患者的研讨发现，G试验可猜测IFI，其阳性成果呈现的时刻较血培育阳性早5.6 d。尽管G试验不能判别何种真菌感染，但已有研讨[17，18]证明血浆中（1，3）-β-D-葡聚糖浓度改变与病况的严峻程度相关，而且对效果的监测也具有必定的含义。国外有学者[19，20]发现（1，3）-β-D-葡聚糖浓度水平可以反映肺内真菌的负荷量，（1，3）-β-D-葡聚糖浓度升高的IFI患者预后不良的份额更高，当初始水平≥287 pg/mL时，G试验猜测IFI患者28 d病死率的敏感性为65%，特异性为70%[21]。在本次研讨后续的追寻监测中发现，28例真菌培育阳性的患者中，有22例（1，3）-β-D-葡聚糖阳性成果显着早于印象学成果和临床症状，且其浓度随病况发作动态改变。
综上所述，血浆（1，3）-β-D-葡聚糖检测在ICU内肺IFI前期确诊中具有快速、精确、简易特色，一起可以辅导抗真菌用药，动态监测病况发展，具有较杰出的临床价值。
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（收稿日期：2017-11-27）