辣椒碱溶于什么 辣椒碱立方液晶纳米粒的制备及体外点评
彭重生+周艳芳+韩珂+覃玲珍+吴传斌
[摘要] 该文首要评论辣椒碱立方液晶纳米粒的体外透皮吸收功能，选用改进的Franz涣散池体外透皮试验技能，对辣椒碱立方液晶纳米粒及其软膏剂进行体外透皮涣散试验。试验成果标明立方液晶纳米粒制剂相对于辣椒碱软膏剂而言，无促进药物浸透效果。但立方液晶纳米粒制剂中的辣椒碱在角质层、表皮层与真皮层中的停留量显着高于软膏剂（P<0.01），立方液晶纳米粒作为皮肤部分给药的载体可进步效果部位的有用药物浓度，皮肤靶向性好。
[关键词] 立方液晶纳米粒；辣椒碱；透皮涣散；皮肤靶向
立方液晶（lipid based cubic liquid crystalline/cubic phase）内部结构是三维延伸、双接连网络结构，具有共同的内部双水道结构[1-2]，由单油酸甘油酯或植烷三醇/水构成的立方液晶载药系统膜外表积较大（400 m2·g-1），有利于包封药物。立方液晶载药系统首要有3种给药方式：立方液晶凝胶、立方液晶纳米粒及前体给药。本课题组前期运用立方液晶的缓释及高黏度特性，将立方液晶前体成功运用于化疗栓塞[3-5]。
立方液晶凝胶和纳米粒常用于经皮传递系统，但凝胶的高黏附性及涂展性差约束了它的运用[1]。而纳米粒具有微乳/纳米乳、脂质体的归纳优势，外用优势十分显着；特别是运用植烷三醇（phytantriol）作为液晶资料，无酯键，化学性质安稳。
本试验以辣椒碱为原料药，并制备成立方液晶纳米粒，选用体外透皮试验评论了辣椒碱立方液晶纳米粒经皮传递系统的可行性。
1 资料
AG285电子分析天平（瑞士METTLER公司）；SB25-12DTD超声波清洗机（宁波新芝生物科技股份有限公司）；XW-80A 旋涡混合器（上海医科大学仪器厂）；NS1001L PANDA2K高压均质机（德国GEA集团Niro公司）；Zetasizer Nano ZS90 粒径测定仪（Malvern Instruments，Malvern，UK）；TK-12D型透皮涣散试验仪（上海锴凯科技交易有限公司）；
辣椒碱（原料药购自湖北恒硕化工有限公司，经反相硅胶柱纯化后，纯度≥95%），植烷三醇（DSM，Basel，Switzerland，Code No：0429082302，LOT No：UQ90818031），Poloxamer 407（PEO98POP67PEO98） BASF公司奉送 （Ludwigshafen，Germany），色谱纯甲醇（江苏汉邦，批号91696），18.2 MΩ超纯水（ELGA公司PURELAB Option-R 7/15纯化系统制备）；劲朗辣椒碱软膏（辣椒碱质量分数0.25 mg·g-1，长春普华制药股份有限公司）；
SD雄性大鼠，180～220 g，购于中山大学医学动物中心，动物合格证号SCXK（粤）2008-A063。
2 办法与成果
2.1 辣椒碱立方液晶纳米粒的制备 按优化后的处方及工艺进行制备[6]：称取辣椒碱7.5 mg于植烷三醇中，水浴上消融涡旋混合均匀，参加处方量的Poloxamer 407，60 ℃水浴上消融混合均匀后，参加适量超纯水，放置2 d后超声涣散，120 MPa压力下高压均质9次即得0.25 g·L-1辣椒碱立方液晶纳米粒。处方中植烷三醇与Poloxamer 407脂质资料占整个涣散系统10%，其间植烷三醇与Poloxamer 407的用量比为9∶1。
2.2 立方液晶纳米粒结构及粒径测定 取样品10 μL滴在覆有支撑膜的铜网上，停止10 min后用滤纸吸干，再滴加3%磷钨酸溶液于铜网上染色5 min，置于JEM1400透射电镜下调查并摄制相片。样品经超纯水稀释256倍后，用Zetasizer Nano ZS90 粒径测定仪测定粒径。
2.3 透析法测定辣椒碱立方液晶纳米粒包封率 取37 ℃的辣椒碱饱满溶液2 mL置于透析袋内，放于100 mL离心管中，参加超纯水50 mL，于37 ℃摇床中100 r·min-1振摇，每1 h取样1 mL，HPLC测定浓度[7]，测定辣椒碱透析平衡所需时刻。测定包封率时，取纳米粒液2 mL置于透析袋内，达平衡时刻点后，测定水液中辣椒碱浓度，包封率=C总浓度-游离/C总浓度×100%。
2.4 体外透皮试验 取体重为160～220 g的雄性SD大鼠，断颈处身后，当即用电推剪除掉大鼠腹部的毛发，手术剪取下腹部皮肤，除掉皮下脂肪安排，清水冲刷洁净再置于生理盐水中，冷藏备用。透皮试验选用立式透皮涣散池，SD大鼠腹部皮肤固定于涣散池的供应室与接纳室之间，角质层面向供应室与药物触摸。试验时，供应室平分别给予辣椒碱立方液晶纳米粒（CAP-CUB）、辣椒碱软膏（CAP-CRE），接纳液为20%乙醇。接纳系统置于（32±1）℃恒温水浴中，300 r·min-1电磁拌和，在1，2，3，4，5，6，7，8，9，10，11，12，24 h时刻点取样1 mL，当即补空白接纳液1 mL（补液时留意排尽接纳池中的气泡），样液经0.45 μm微孔滤膜过滤后HPLC测定辣椒碱含量。核算皮肤单位面积（cm2）的累积浸透量Q。
2.5 辣椒碱在皮肤停留量测定 在透皮试验结束时取下皮肤，用生理盐水冲净皮肤表里外表，并用棉签擦干，别离角质层，测定辣椒碱药物在角质层以及表皮层+真层皮中的停留量。
角质层中药物停留量的测定：用3M胶带黏贴毛侧鼠皮，丢掉第一次胶带层，从第2次起，累积15次黏贴鼠皮，将黏贴后的胶带剪碎，置于10 mL带塞离心管中，参加甲醇5 mL，用细胞破碎仪超声提取10 min，5 mL甲醇定容。试液经15 000 r·min-1超速离心10 min，取离心后的上清液，0.45 μm微孔滤膜过滤，HPLC测定试液中辣椒碱含量，核算角质层中药物停留量。endprint
表皮层+真层皮中药物停留量的测定：将去除角质层后的皮肤，用手术剪剪碎，加甲醇后细胞破碎仪超声提取，微孔滤膜过滤，HPLC测定，核算表皮层+真层皮中药物停留量。
3 成果
3.1 立方液晶纳米粒结构及粒径 制备的立方液晶纳米粒透射电镜下调查为六边形，见图1。经粒径测定仪测定均匀粒径为250 nm，见图2，散布较均匀。
3.2 包封率测定 试验进行到4 h时，辣椒碱饱满水溶液透析到达平衡，断定4 h为测定包封率的时刻点。成果显现纳米粒的包封率为97%。
3.3 体外透皮试验 大鼠腹部皮肤透皮成果见图3，立方液晶纳米粒制剂相对于辣椒碱软膏剂而言，无促进药物浸透效果。24 h后药物在皮肤和角质层中的总停留量见表1。立方液晶纳米粒制剂中的辣椒碱在角质层及表皮+真皮层中的停留量显着高于软膏剂（P<0.01），标明立方液晶纳米粒皮肤靶向功能好。
4 评论
Maia和Jenning等[8-9]提出了皮肤靶向（表皮靶向）概念，促进药物在表皮层的吸收，但削减药物进入血液。药物可耐久对部分病变细胞或安排起医治效果，进步医治指数，削减或防止全身性毒副效果。
皮肤靶向给药载体的研讨首要集中于纳米药物载体，Mura及Verma等以米诺地尔（minoxidil）及荧光素作为模型药物，发现脂质体粒径对皮肤靶向性有较大影响，粒径越小，药物在皮肤中的停留量越大[10-11]。选用载体技能进步药物的皮肤靶向性，正成为透皮给药系统研讨中的又一热门。
本试验证明立方液晶纳米粒未显着增强辣椒碱的透皮浸透量，与文献报道立方液晶载药系统具有杰出的促渗功能[12]不太相符，可能与辣椒碱的理化性质有关。辣椒碱为一强脂溶性药物，包裹于立方液晶脂质双分子层中，药物开释是一限速进程[1]；因为辣椒碱在水中溶解度较低的原因，故选用20%乙醇作为承受液[13]。经试验24 h后，药物在角质层及表皮+真皮层中的停留量显着要高于软膏剂组，可能是立方液晶纳米粒进入角质层后作为药物贮库并缓慢开释药物所造成的。
从现在的试验成果能够看出，立方液晶纳米粒在进步药物的皮肤靶向性方面具有较大的优势，但其适用药物规模及透皮机制需要深入研讨。
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Preparation and in vitro study on diffusion of capsaicin cubosome
PENG Xin-sheng1，ZHOU Yan-fang1，HAN Ke2，QIN Ling-zhen3，WU Chuan-bin3*
（1. School of Pharmaceutical Sciences，Guangdong Medical College，Dongguan 523808，China；
2.The Second Affiliated Hospital of Guangzhou Medical University，Guangzhou 510260，China；
3. School of Pharmaceutical Sciences，Sun Yat-Sen University，Guangzhou 510006，China）
[Abstract] This study was to investigate the permeability and absorbability of capsaicin cubosome across abdominal skin of the SD rats in vitro. Diffusion of capsaicin cubosome and cream was performed with the modified Franz diffusion cell technique. The capsaicin cubosome showed no enhancement of skin permeation within 24 hours. However，the deposition amounts of capsaicin in the rat skin in the cubosome group was markedly higher than those in the commercial cream group （P<0.01）. Cubosome showed excellent characetristic of skin-targed which could be a good carrier for the local transdermal drug delivery system.
[Key words] cubosome；capsaicin；diffusion；skin-targeted
doi：10.4268/cjcmm20140418endprint