黄芪多糖 黄芪多糖对糖尿病足部溃疡部位成纤维细胞增殖功用的促进作用
吴霞
[摘要] 意图 评论黄芪多糖对糖尿病足部溃疡成纤维细胞增殖功用的影响。办法 挑选糖尿病足部溃疡患者15例，取患者创面边际全厚皮片，别离、培育、传代成纤维细胞。比较不同浓度黄芪多糖对成纤维细胞增殖功用的影响。 成果 各组间吸光度A值比较差异有显着统计学含义（F=21.357，P＜0.01），其间100μg/mL组和500μg/mL组显着高于对照组，而500μg/mL组又显着高于100μg/mL组（t=3.926、7.254、4.359，P均＜0.01）。定论 黄芪多糖可以促进糖尿病足部溃疡成纤维细胞的增殖，而且跟着浓度的添加，促进效果越强。
[关键词] 黄芪多糖；糖尿病；溃疡；成纤维细胞
[中图分类号] R587.2[文献标识码] B[文章编号] 1673-9701（2014）15-0124-03
Effect of astragalus polysaccharide on proliferation of fibroblast at diabetic foot ulceration
WU Xia
Glycyresis Department，Donggang City TCM Hospital in Liaoning Province，Donggang 118300，China
[Abstract] Objective To discuss effect of astragalus polysaccharide on proliferation of fibroblast at diabetic foot ulceration. Methods Fifteen cases with diabetic foot ulceration were selected. Full thick skin graft at edge of ulcer were cut to separate， foster and passage fibroblast. Effects of different concentration of astragalus polysaccharide on proliferation of fibroblast were compared. Results Absorbance of four groups had significant difference（F=21.357，P＜0.01）. Absorbancea of group of 100μg/mL and group of 500μg/mL were higher than control group， and that of group of 500μg/mL was higher than group of 100μg/mL（t=3.926，7.254，4.359，P all ＜0.01）. Conclusion Astragalus polysaccharide can improve roliferation of fibroblast at diabetic foot ulceration， and the effect increase with concentration of astragalus polysaccharide increasing.
[Key words] Astragalus polysaccharide； Diabetic； Ulceration； Fibroblast糖尿病足首要指初期的糖尿病患者在没有呈现周围神经病变和周围血管病变前现已呈现足部感染、化脓、溃烂等症状。黄芪注射液首要用于医治病毒性心肌炎、心功用不全、免疫功用下降的缓慢肝炎等，也可用于医治白细胞削减症和血小板削减性紫癜以及缓慢肾炎、肾病综合征、糖尿病肾病等[1]。研讨显现，其外敷用于医治糖尿病足溃疡时能促进溃疡的愈合，削减截肢率。可是详细的机制还不十分明确。本研讨首要研讨黄芪多糖对糖尿病足部溃疡成纤维细胞增殖功用的影响。现报导如下。
1材料与办法
1.1一般材料
挑选2013年3~6月在我院医治的糖尿病足部溃疡患者20例，糖尿病病程（6.1±2.0）年。入院时空腹血糖（12.6±2.5）mmol/L，餐后2h血糖（16.8±4.2）mmol/L，糖化血红蛋白（9.9±0.8）%。
1.2标本收集
取疮口边际全厚皮片，巨细为1.0 cm×1.0 cm，在含100 U/mL青霉素和100μg/mL链霉素的PBS液中漂洗，去除脂肪安排，剪成碎块，巨细为0.5 cm×0.5 cm，运用0.25%醋酸氯己啶消毒，PBS液冲刷，消化液消化，别离真皮表皮，去除表皮。真皮培育液中消化、过滤、离心、弃上清。参加培育液中，离心，弃去上清，重复3次。调整细胞浓度，查看细胞生机。依照1×106/mL接种到含胎牛血清、青霉素、链霉素的培育液中，37℃，5%CO2饱和湿度下培育。细胞进行传代，取4~6代细胞进行试验。
1.3试验办法
将对数成长期的细胞进行消化、离心，制成悬液，接种在96孔板中，没开孔0.5×104个，37℃，5%CO2，恒温培育箱中培育24h，参加含有不同浓度黄芪多糖的培育液，每个浓度4个复孔，浓度分别为20μg/mL、100μg/mL和500μg/mL，培育24h。另选1组仅参加含血清的培育液作为对照组。选用MTT办法调查成纤维细胞的成长状况，在570nm下测吸光度A值。
1.4统计学办法
选用SPSS15.0软件包进行统计学剖析，计量材料选用均数±标准差表明，不同浓度选用方差剖析，组间选用t查验。P＜0.05为差异有统计学含义。
2成果
对照组吸光度值为（0.412±0.021），20μg/mL组为（0.418±0.025），100μg/mL组为（0.462±0.014），500μg/mL组首要为（0.510±0.017）。各组比较差异有显着统计学含义（F=21.357，P＜0.01），其间100μg/mL组和500μg/mL组显着高于对照组，而500μg/mL组又显着高于100μg/mL组（t=3.926、7.254、4.359，P均＜0.01）。见图1。
图1 各组570nm吸光度A值
3评论
糖尿病足部溃疡首要指初期糖尿患者，没有呈现周围神经病变和周围血管病变，却已呈现足部感染、化脓、溃烂等症状。首要病因有神经病病变、血管病变、循环妨碍、免疫妨碍、皮肤中促进皮肤成长的胰岛素成长因子-1（IGF-1）削减等，其间首要是神经和血管病变在发作开展进程中发挥重要效果。足溃疡程度与患者的糖尿病患者全身神经病变、缺血性病变程度和经济收入密切相关。糖尿病足反映糖尿病构成足部神经、大血管的病变，并导致部分安排的破溃、感染、骨髓炎、坏死等，部分医治一般十分困难，许多患者最终需求进行截肢或截趾，足部感染分散导致全身脓毒症乃至危及生命。糖尿病足医治困难，难以愈合。成纤维细胞（fibroblast）是疏松结缔安排的首要细胞成分，由胚胎时期的间充质细胞（mesenchymal cell）分解而来。对不同程度的细胞变性、坏死和安排残缺以及骨创伤的修正有十分重要的效果。在创伤愈合中，成纤维细胞首要来源于真皮乳头层的部分成纤维细胞和未分解的间充质细胞以及血管周围的成纤维细胞和周细胞。在创伤修正的后期，成纤维细胞经过排泄胶原酶参加修正后安排的改建。在某些病理条件下，以成纤维细胞为首要细胞成分的肉芽安排或增生安排块还可以在非骨安排内发作钙化，引起异位骨化（ectopic ossification）。
endprint
黄芪的药用迄今已有2000多年的前史，其有增强机体免疫功用、保肝、利尿、抗变老、抗应激、降压和较广泛的抗菌效果。黄芪多糖是豆科植物蒙古黄芪或膜荚黄芪的枯燥根经提取、浓缩、纯化而成的水溶性杂多糖。作为免疫促进剂或调理剂，一起具有抗病毒、抗肿瘤、抗变老、抗辐射、抗应激、抗氧化等效果[2，3]。黄芪多糖（APS）可显着增强非特异性免疫功用和体液免疫功用，黄芪皂苷能促进淋巴结B细胞增殖分解和浆细胞抗体构成。黄芪多糖显着增强巨噬细胞吞噬发光强度并按捺PGE2的开释，但进一步促进TNF的开释。黄芪在体液免疫、增强单核巨噬细胞的吞噬活性、对体细胞和天然杀伤细胞开释免疫活性物质、诱生干扰素和白细胞介素等多方面表现出多种生理活性。黄芪能促进巨噬细胞的吞噬功用，能促进B细胞的增殖而且按捺总补体活性，对白细胞介素有诱生效果。黄芪多糖是黄芪中免疫活性较强的一类物质，它能增强吞噬细胞的吞噬功用，从脾及胸腺分量、溶血素、血凝素以及脾细胞总数及空斑构成细胞测定看出，黄芪多糖、红芪多糖均能对环磷酰胺或强的松龙的免疫按捺效果有彻底及部分对立效果。黄芪多糖可经过调理含量以及促进磷脂酰肌醇代谢，进而进步创伤后活化T淋巴细胞内IL-2mRNA及IL-2RmRNA的基因转录表达，这可能是黄芪多糖纠正创伤后细胞免疫功用低下的机制之一。黄芪对干扰素体系有显着的刺激效果。黄芪还能促进各类血细胞的生成、发育及老练进程，促进骨髓的造血功用[4]。对体外培育肝细胞，黄芪能促进RNA及蛋白质组成，提示其能延伸细胞寿数，增强细胞代谢推延老化。黄芪可促进小鼠血清和蛋白质更新。
在本次试验中，当黄芪多糖浓度到达100μg/mL时，其对成纤维细胞的增殖促进效果显着添加，而浓度到达500μg/mL浓度时，促进效果进一步增强，提示黄芪多糖可以添加溃疡部位成纤维细胞的增殖，而且跟着浓度的添加，其增强效果逐步添加，这可能是黄芪外敷医治糖尿病足部溃疡患者可以促进溃疡愈合的机制之一。张正军等[5]研讨显现100 μg/mL黄芪多糖可下降MMP-2、MMP-9活性及其蛋白的表达。肖正华等[6]研讨显现糖尿病足部溃疡难以治好的原因与创伤渗出液中IL-1β量过高、成纤维细胞增殖才能显着受抑有关，黄芪多糖外敷可以下降创伤渗出液中IL-1β浓度，显着缩短溃疡GT和HT，下降截肢率。周倩等[7]研讨显现APS在（10～160）μg/mL浓度范围内可促进体外培育的糖尿病足溃疡Fb增殖，添加胶原组成，且呈量效、时效依靠联系；过高浓度（≥640μg/mL）的APS对Fb增殖、胶原组成发生按捺效果。朱贵明等[8]研讨显现黄芪多糖经过减慢染色体结尾限制性片段（TRF）长度缩短速度，进步衰白叟胚肺二倍体成纤维细胞生机，发挥抗变老效果。李光善等[9]研讨显现黄芪多糖对试验性糖尿病大鼠创面成纤维细胞增殖有促进效果，可是联合桂皮醛和川芎嗪效果更好。
综上所述，黄芪多糖可以促进糖尿病足部溃疡部位成纤维细胞的增殖，然后促进溃疡愈合，下降截肢危险。本研讨局限性首要是归入研讨的黄芪多糖浓度较少，没有研讨剖析进一步添加浓度会不会呈现按捺效果，期望在往后的研讨中进一步完善。
[参考文献]
[1]季宇彬，汲晨锋. 黄芪多糖对肿瘤模型小鼠红细胞免疫功用的影响[J]. 现代食品科技，2013，29（9）： 2042-2046，2052.
[2]李承德，周文宾，孙艳，等. 黄芪多糖对哮喘大鼠Th17／Treg细胞因子及肺部炎症的影响[J]. 我国药理学通报，2013，29（9）：1275-1278.
[3]任丽宏，王越，姚定国，等. 黄芪多糖对2型糖尿病大鼠血清IL-1β、IL-6、IL-18的影响效果[J]. 有用糖尿病杂志，2013，9（5）： 15-16.
[4]肖彬，徐月，何涵，等. 黄芪多糖对粒单核系造血细胞的抗凋亡效果[J]. 我国试验血液学杂志，2013，21（5）：1243-1247.
[5]张正军，肖正华，陈定宇，等. 黄芪多糖对糖尿病足溃疡渗出液成纤维细胞MMP-2、MMP-9表达的影响[J]. 我国糖尿病杂志，2007，15（4）：202-203.
[6]肖正华，周倩，余绮玲，等. 糖尿病足溃疡渗出液中IL-1β动态改变及黄芪提取液外敷医治[J]. 广州医学院学报，2008，36（6）： 11-14.
[7]周倩，王燕，肖正华，等. 黄芪多糖对糖尿病足溃疡成纤维细胞胶原组成的影响[J]. 解剖学研讨，2011，33（2）： 135-137.
[8]朱贵明，江旭东，王迪迪，等. 黄芪多糖对变老HDF细胞染色体结尾限制性片段长度的影响[J]. 我国老年学杂志，2012，32（8）： 1635-1637.
[9]李光善，李萍，盛巡，等. 黄芪多糖、桂皮醛、川芎嗪对试验性糖尿病大鼠创面成纤维细胞增殖效果的影响[J]. 我国中医根底医学杂志，2004，10（4）： 20-22.
（收稿日期：2014-01-03）
endprint
黄芪的药用迄今已有2000多年的前史，其有增强机体免疫功用、保肝、利尿、抗变老、抗应激、降压和较广泛的抗菌效果。黄芪多糖是豆科植物蒙古黄芪或膜荚黄芪的枯燥根经提取、浓缩、纯化而成的水溶性杂多糖。作为免疫促进剂或调理剂，一起具有抗病毒、抗肿瘤、抗变老、抗辐射、抗应激、抗氧化等效果[2，3]。黄芪多糖（APS）可显着增强非特异性免疫功用和体液免疫功用，黄芪皂苷能促进淋巴结B细胞增殖分解和浆细胞抗体构成。黄芪多糖显着增强巨噬细胞吞噬发光强度并按捺PGE2的开释，但进一步促进TNF的开释。黄芪在体液免疫、增强单核巨噬细胞的吞噬活性、对体细胞和天然杀伤细胞开释免疫活性物质、诱生干扰素和白细胞介素等多方面表现出多种生理活性。黄芪能促进巨噬细胞的吞噬功用，能促进B细胞的增殖而且按捺总补体活性，对白细胞介素有诱生效果。黄芪多糖是黄芪中免疫活性较强的一类物质，它能增强吞噬细胞的吞噬功用，从脾及胸腺分量、溶血素、血凝素以及脾细胞总数及空斑构成细胞测定看出，黄芪多糖、红芪多糖均能对环磷酰胺或强的松龙的免疫按捺效果有彻底及部分对立效果。黄芪多糖可经过调理含量以及促进磷脂酰肌醇代谢，进而进步创伤后活化T淋巴细胞内IL-2mRNA及IL-2RmRNA的基因转录表达，这可能是黄芪多糖纠正创伤后细胞免疫功用低下的机制之一。黄芪对干扰素体系有显着的刺激效果。黄芪还能促进各类血细胞的生成、发育及老练进程，促进骨髓的造血功用[4]。对体外培育肝细胞，黄芪能促进RNA及蛋白质组成，提示其能延伸细胞寿数，增强细胞代谢推延老化。黄芪可促进小鼠血清和蛋白质更新。
在本次试验中，当黄芪多糖浓度到达100μg/mL时，其对成纤维细胞的增殖促进效果显着添加，而浓度到达500μg/mL浓度时，促进效果进一步增强，提示黄芪多糖可以添加溃疡部位成纤维细胞的增殖，而且跟着浓度的添加，其增强效果逐步添加，这可能是黄芪外敷医治糖尿病足部溃疡患者可以促进溃疡愈合的机制之一。张正军等[5]研讨显现100 μg/mL黄芪多糖可下降MMP-2、MMP-9活性及其蛋白的表达。肖正华等[6]研讨显现糖尿病足部溃疡难以治好的原因与创伤渗出液中IL-1β量过高、成纤维细胞增殖才能显着受抑有关，黄芪多糖外敷可以下降创伤渗出液中IL-1β浓度，显着缩短溃疡GT和HT，下降截肢率。周倩等[7]研讨显现APS在（10～160）μg/mL浓度范围内可促进体外培育的糖尿病足溃疡Fb增殖，添加胶原组成，且呈量效、时效依靠联系；过高浓度（≥640μg/mL）的APS对Fb增殖、胶原组成发生按捺效果。朱贵明等[8]研讨显现黄芪多糖经过减慢染色体结尾限制性片段（TRF）长度缩短速度，进步衰白叟胚肺二倍体成纤维细胞生机，发挥抗变老效果。李光善等[9]研讨显现黄芪多糖对试验性糖尿病大鼠创面成纤维细胞增殖有促进效果，可是联合桂皮醛和川芎嗪效果更好。
综上所述，黄芪多糖可以促进糖尿病足部溃疡部位成纤维细胞的增殖，然后促进溃疡愈合，下降截肢危险。本研讨局限性首要是归入研讨的黄芪多糖浓度较少，没有研讨剖析进一步添加浓度会不会呈现按捺效果，期望在往后的研讨中进一步完善。
[参考文献]
[1]季宇彬，汲晨锋. 黄芪多糖对肿瘤模型小鼠红细胞免疫功用的影响[J]. 现代食品科技，2013，29（9）： 2042-2046，2052.
[2]李承德，周文宾，孙艳，等. 黄芪多糖对哮喘大鼠Th17／Treg细胞因子及肺部炎症的影响[J]. 我国药理学通报，2013，29（9）：1275-1278.
[3]任丽宏，王越，姚定国，等. 黄芪多糖对2型糖尿病大鼠血清IL-1β、IL-6、IL-18的影响效果[J]. 有用糖尿病杂志，2013，9（5）： 15-16.
[4]肖彬，徐月，何涵，等. 黄芪多糖对粒单核系造血细胞的抗凋亡效果[J]. 我国试验血液学杂志，2013，21（5）：1243-1247.
[5]张正军，肖正华，陈定宇，等. 黄芪多糖对糖尿病足溃疡渗出液成纤维细胞MMP-2、MMP-9表达的影响[J]. 我国糖尿病杂志，2007，15（4）：202-203.
[6]肖正华，周倩，余绮玲，等. 糖尿病足溃疡渗出液中IL-1β动态改变及黄芪提取液外敷医治[J]. 广州医学院学报，2008，36（6）： 11-14.
[7]周倩，王燕，肖正华，等. 黄芪多糖对糖尿病足溃疡成纤维细胞胶原组成的影响[J]. 解剖学研讨，2011，33（2）： 135-137.
[8]朱贵明，江旭东，王迪迪，等. 黄芪多糖对变老HDF细胞染色体结尾限制性片段长度的影响[J]. 我国老年学杂志，2012，32（8）： 1635-1637.
[9]李光善，李萍，盛巡，等. 黄芪多糖、桂皮醛、川芎嗪对试验性糖尿病大鼠创面成纤维细胞增殖效果的影响[J]. 我国中医根底医学杂志，2004，10（4）： 20-22.
（收稿日期：2014-01-03）
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黄芪的药用迄今已有2000多年的前史，其有增强机体免疫功用、保肝、利尿、抗变老、抗应激、降压和较广泛的抗菌效果。黄芪多糖是豆科植物蒙古黄芪或膜荚黄芪的枯燥根经提取、浓缩、纯化而成的水溶性杂多糖。作为免疫促进剂或调理剂，一起具有抗病毒、抗肿瘤、抗变老、抗辐射、抗应激、抗氧化等效果[2，3]。黄芪多糖（APS）可显着增强非特异性免疫功用和体液免疫功用，黄芪皂苷能促进淋巴结B细胞增殖分解和浆细胞抗体构成。黄芪多糖显着增强巨噬细胞吞噬发光强度并按捺PGE2的开释，但进一步促进TNF的开释。黄芪在体液免疫、增强单核巨噬细胞的吞噬活性、对体细胞和天然杀伤细胞开释免疫活性物质、诱生干扰素和白细胞介素等多方面表现出多种生理活性。黄芪能促进巨噬细胞的吞噬功用，能促进B细胞的增殖而且按捺总补体活性，对白细胞介素有诱生效果。黄芪多糖是黄芪中免疫活性较强的一类物质，它能增强吞噬细胞的吞噬功用，从脾及胸腺分量、溶血素、血凝素以及脾细胞总数及空斑构成细胞测定看出，黄芪多糖、红芪多糖均能对环磷酰胺或强的松龙的免疫按捺效果有彻底及部分对立效果。黄芪多糖可经过调理含量以及促进磷脂酰肌醇代谢，进而进步创伤后活化T淋巴细胞内IL-2mRNA及IL-2RmRNA的基因转录表达，这可能是黄芪多糖纠正创伤后细胞免疫功用低下的机制之一。黄芪对干扰素体系有显着的刺激效果。黄芪还能促进各类血细胞的生成、发育及老练进程，促进骨髓的造血功用[4]。对体外培育肝细胞，黄芪能促进RNA及蛋白质组成，提示其能延伸细胞寿数，增强细胞代谢推延老化。黄芪可促进小鼠血清和蛋白质更新。
在本次试验中，当黄芪多糖浓度到达100μg/mL时，其对成纤维细胞的增殖促进效果显着添加，而浓度到达500μg/mL浓度时，促进效果进一步增强，提示黄芪多糖可以添加溃疡部位成纤维细胞的增殖，而且跟着浓度的添加，其增强效果逐步添加，这可能是黄芪外敷医治糖尿病足部溃疡患者可以促进溃疡愈合的机制之一。张正军等[5]研讨显现100 μg/mL黄芪多糖可下降MMP-2、MMP-9活性及其蛋白的表达。肖正华等[6]研讨显现糖尿病足部溃疡难以治好的原因与创伤渗出液中IL-1β量过高、成纤维细胞增殖才能显着受抑有关，黄芪多糖外敷可以下降创伤渗出液中IL-1β浓度，显着缩短溃疡GT和HT，下降截肢率。周倩等[7]研讨显现APS在（10～160）μg/mL浓度范围内可促进体外培育的糖尿病足溃疡Fb增殖，添加胶原组成，且呈量效、时效依靠联系；过高浓度（≥640μg/mL）的APS对Fb增殖、胶原组成发生按捺效果。朱贵明等[8]研讨显现黄芪多糖经过减慢染色体结尾限制性片段（TRF）长度缩短速度，进步衰白叟胚肺二倍体成纤维细胞生机，发挥抗变老效果。李光善等[9]研讨显现黄芪多糖对试验性糖尿病大鼠创面成纤维细胞增殖有促进效果，可是联合桂皮醛和川芎嗪效果更好。
综上所述，黄芪多糖可以促进糖尿病足部溃疡部位成纤维细胞的增殖，然后促进溃疡愈合，下降截肢危险。本研讨局限性首要是归入研讨的黄芪多糖浓度较少，没有研讨剖析进一步添加浓度会不会呈现按捺效果，期望在往后的研讨中进一步完善。
[参考文献]
[1]季宇彬，汲晨锋. 黄芪多糖对肿瘤模型小鼠红细胞免疫功用的影响[J]. 现代食品科技，2013，29（9）： 2042-2046，2052.
[2]李承德，周文宾，孙艳，等. 黄芪多糖对哮喘大鼠Th17／Treg细胞因子及肺部炎症的影响[J]. 我国药理学通报，2013，29（9）：1275-1278.
[3]任丽宏，王越，姚定国，等. 黄芪多糖对2型糖尿病大鼠血清IL-1β、IL-6、IL-18的影响效果[J]. 有用糖尿病杂志，2013，9（5）： 15-16.
[4]肖彬，徐月，何涵，等. 黄芪多糖对粒单核系造血细胞的抗凋亡效果[J]. 我国试验血液学杂志，2013，21（5）：1243-1247.
[5]张正军，肖正华，陈定宇，等. 黄芪多糖对糖尿病足溃疡渗出液成纤维细胞MMP-2、MMP-9表达的影响[J]. 我国糖尿病杂志，2007，15（4）：202-203.
[6]肖正华，周倩，余绮玲，等. 糖尿病足溃疡渗出液中IL-1β动态改变及黄芪提取液外敷医治[J]. 广州医学院学报，2008，36（6）： 11-14.
[7]周倩，王燕，肖正华，等. 黄芪多糖对糖尿病足溃疡成纤维细胞胶原组成的影响[J]. 解剖学研讨，2011，33（2）： 135-137.
[8]朱贵明，江旭东，王迪迪，等. 黄芪多糖对变老HDF细胞染色体结尾限制性片段长度的影响[J]. 我国老年学杂志，2012，32（8）： 1635-1637.
[9]李光善，李萍，盛巡，等. 黄芪多糖、桂皮醛、川芎嗪对试验性糖尿病大鼠创面成纤维细胞增殖效果的影响[J]. 我国中医根底医学杂志，2004，10（4）： 20-22.
（收稿日期：2014-01-03）
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