大鼠卵巢去除 补骨脂素对去卵巢发呆大鼠脑安排海马区的病理形态学影响

潘永梅++王建华+方敬+王蕊

[摘要]意图 评论补骨脂素对去卵巢发呆大鼠脑安排海马区的病理形状学影响。办法 2013年2月～2016年1月制备去卵巢发呆大鼠模型，分为假手术组、模型组和补骨脂素组，每组10只，其间补骨脂素组树立模型后接连灌胃给药29 d，模型组给予惯例生理盐水替代。调查比较各组大鼠脑安排海马区的病理形状。成果 与假手术组比较，模型组大鼠潜伏期显着延伸（P<0.05）；与模型组比较，补骨脂素组均能显着缩短潜伏期（P<0.05）；补骨脂素组大鼠穿越渠道次数显着添加，与模型组比较，差异有计算学含义（P<0.05）。假手术组、模型组、补骨脂素组SOD含量分别为（145.30±18.42）、（110.49±6.46）、（120.98±7.13）U/gprot，MDA含量分别为（2.87±0.44）、（4.46±0.63）、（3.19±0.42）nmol/mgprot。与假手术组比较，模型组SOD含量显着下降，MDA含量显着添加，三组比较差异有计算学含义（P<0.05）。超微透射电镜显现补骨脂素组锥体细胞形状得到改进，摆放均一、规整，结构明晰。定论 补骨脂素能进步去卵巢发呆大鼠的SOD氧化酶活性，下降MDA含量，然后有利于脑安排海马区的病理形状学的改进，进步回忆才能。

[关键词]补骨脂素；去卵巢发呆；脑安排海马区；病理形状学

[中图分类号] R749.99 [文献标识码] A [文章编号] 1674-4721（2016）09（b）-0009-03

[Abstract]Objective To investigate the effects of psoralen on ovariectomized rat dementia in hippocampus of rat brain tissue pathological effect.Methods From February 2013 to January 2016，the preparation of ovariectomized dementia rat model were divided the sham operation group，model group and psoraleae group，with 10 rats in each group，included psoralen group model after intragastric administration 29 d，model group were given routine saline instead. The pathological changes of the hippocampus of rats in each group were observed and compared.Results Compared with the sham group，rats in the model group，the latency were significantly prolonged（P<0.05）；compared with the model group，psoralen group were markedly shorted the incubation period （P<0.05）；and at the same time the psoralen group rats across the platform number were increased significantly，and compared the model group were significant difference （P<0.05）.The SOD contents in the sham group， model group，psoraleae group were （145.30±18.42），（110.49±6.46） and （120.98±7.13）U/gprot，the content of MDA were （2.87±0.44），（4.46±0.63） and （3.19±0.42）nmol/mgprot.Compared with the sham group，SOD content of the model group were significantly decreased，MDA content were increased significantly；and the contents of SOD and MDA in the psoralen group compared to the other groups difference were statistical significance （P<0.05）.Ultrastructural TEM showed that the morphology of pyramidal cells of psoralen group improved，uniform，neatly arranged，clear structure.Conclusion Psoralen in dementia rat ovarian application can improve the SOD enzyme activity，reduce MDA content，thus benefit the brain hippocampus pathological improvement，improve memory ability.

[Key words]Psoralen；Ovariectomized dementia；Hippocampus；Pathology

去卵巢发呆是最常见的一种进行性神经变性疾病，病因为卵巢功用损失，具有特异性神经病理改动，表现为大脑皮质遍及萎缩、神经纤维结、双螺旋纤维增多等[1-3]。跟着人口老龄化的加重，去卵巢发呆的患病率持续上升。中医以为去卵巢发呆是由“脑际空无”“肾精亏本”所引起的，中药防治去卵巢发呆有重要的效果[4]。中草药补骨脂具有温肾助阳、纳气平喘、温脾止泻等成效，补骨脂素属香豆素类物质，是补骨脂中的首要有用成分[5-6]。本文评论补骨脂素对去卵巢发呆大鼠脑安排海马区的病理形状学影响，旨在为后期抗发呆新药的规划、开发供给理论依据。

1材料与办法

1.1研讨目标

研讨时刻为2013年2月～2016年1月，挑选成年健康雌性清洁级Sprague-Dawley大鼠30只，动物合格证号：1112016，体重250～280 g，由河北医科大学试验动物中心供给。补骨脂素购自上海友思生物技术有限公司，超氧化物歧化酶（SOD）试剂盒、丙二醛（MDA）试剂盒购自南京建成生物工程研讨所（批号20090702）。

1.2办法

依照随机数字表法将30只Sprague-Dawley大鼠分为模型组、假手术组、补骨脂素组，每组10只。模型组、补骨脂素组惯例树立去卵巢发呆模型，补骨脂素组树立模型后接连灌胃给药29 d，假手术组与模型组给予惯例生理盐水替代，灌胃1次/d。在模型树立中，大鼠用10%的水合氯醛腹腔内打针麻醉，经脊柱旁切断将双侧卵巢去除，然后进行正常养殖，接连查看7 d未见大鼠动情周期标明大鼠造模成功。

1.3调查目标

在Morris水迷宫试验中，挑选上海吉量软件科技有限公司的水迷宫。水迷宫由一黑色正圆形水槽（d=160 cm）组成，水槽中有一圆形渠道（d=12 cm），水槽中水深没过渠道2 cm，水温24℃左右。将大鼠头朝水槽按次序顺次从四个象限放入水中，大鼠找到渠道并在其上逗留10 s后，记载学习回忆时刻与3 min内穿越渠道的次数。

在SOD与MDA测定中，第29天灌胃给药后，用10%水合氯醛350 mg/kg腹腔打针麻醉，处身后挑选大鼠脑安排海马区进行SOD与MDA的检测。

在海马区神经元形状调查中，选用超微透射电镜调查大鼠海马区神经元形状的改变。

1.4计算学办法

选用SPSS 13.0计算软件对数据进行剖析，计量材料以均数±标准差（x±s）表明，选用LSD法剖析或单因素方差剖析，以P<0.05为差异有计算学含义。

2成果

2.1各组大鼠空间学习回忆才能的比较

经过测定，与假手术组比较，模型组大鼠潜伏期显着延伸（P<0.05）；与模型组比较，补骨脂素组均能显着缩短潜伏期（P<0.05）；补骨脂素组大鼠穿越渠道次数显着添加，与模型组比较，差异有计算学含义（P<0.05）。

2.2各组大鼠脑安排SOD、MDA含量的比较

与假手术组比较，模型组SOD含量显着削减，MDA含量显着添加；补骨脂素可进步SOD含量，下降MDA含量，三组比较差异有计算学含义（P<0.05）。

2.3各组病理形状学的比较

透射电镜显现，模型组大鼠神经元核固缩，染色质浓缩，核仁结构不清，线粒体嵴缺失呈空泛，线粒体双层膜结构不清、肿胀，微管肿胀、开裂。假手术组神经元细胞核结构明晰，核仁呈圆形居中心，粗面内质网形状未见异常。补骨脂素组锥体细胞形状得到改进，摆放均一、规整，结构明晰。

3评论

去卵巢发呆是一种缓慢进行性疾病，临床表现以回忆、认知功用缺点为主，可伴有技术及品格、言语、运动、视觉空间妨碍等[7-8]。从机制上剖析，脑安排是体内氧负荷最大的器官之一，脑安排有着高的糖代谢和呼吸代谢，自由基危害在脑缺血再灌注危害中起重要效果，高浓度的不饱和脂肪酸组成脑神经元的膜结构，使得脑安排更易受自由基的危害[9-10]。正常机体氧自由基发生与铲除处于动态平衡，可是因为受各种因素的影响，机体氧自由基生成添加，内源性的自由基铲除削减，对脑安排发生损坏效果[11]。中医以为肾精在人体生命活动中具有重要的位置和效果，选用“补肾生精”的办法能够有用医治“善忘”“发呆”等疾病，在延平缓操控疾病的开展上有很好的效果[12]。补骨脂素为补骨脂中有用成分，属香豆素类化合物，具有抗氧化、抗炎、抗抑郁、抗菌、抗肿瘤等效果，其间药有用成分均对发呆形成的神经元危害具有维护效果[13]。本研讨显现，与假手术组比较，模型组大鼠潜伏期显着延伸（P<0.05）；与模型组比较，补骨脂素组均能显着缩短潜伏期（P<0.05）；一起补骨脂素组大鼠穿越渠道次数显着添加，与模型组比较有显着性差异（P<0.05）。

有学者指出，香豆素类物质是一类重要的植物雌激素，补骨脂素或许是经过雌激素信号通路发挥改进发呆功用的效果[14]，但详细的效果机制需要进一步深入研讨。MDA是脂质体过氧化的首要终产物，其含量可直接反映机体中自由基水平及脂质过氧化反响程度，过多的活性氧将会进犯DNA、酶类、生物膜类等，终究导致细胞逝世。SOD是一种金属蛋白，能够经过歧化反响铲除氧自由基，然后维护细胞不受毒性氧自由基的危害[15]。本研讨显现，与假手术组比较，模型组SOD含量显着削减，MDA含量显着添加；补骨脂素可进步SOD含量，下降MDA含量，三组比较差异有计算学含义（P<0.05），提示补骨脂素有更强的整理自由基的才能和抗氧化才能。电镜形状学研讨也证明，补骨脂素对大鼠海马神经元结构有必定的维护效果。

综上所述，补骨脂素能进步去卵巢发呆大鼠的SOD氧化酶活性，下降MDA含量，然后有利于脑安排海马区的病理形状学的改进，进步回忆才能。

[参考文献]

[1]田方泽，畅洪昇，周静洋，等.去卵巢所造成的老年发呆模型的研讨评论[J].国际科学技术：中医药现代化，2014，18（6）：1406-1410.

[2]彭声明，陈勤，陈逸青，等.菟丝子总黄酮对内排泄阑珊发呆模型小鼠学习回忆功用的影响及维护效果机制[J].激光生物学报，2014，21（3）：218-226.

[3]Zhou X，Li Y，Shi X，et al.An overview on therapeutics attenuating amyloid β level in Alzheimer′s disease：targeting neurotransmission， inflammation，oxidative stress and enhanced cholesterol levels[J].Am J Transl Res，2016，8（2）：246-269.

[4]田方泽，畅洪昇，周静洋，等.锁阳乙酸乙酯部位对去卵巢发呆大鼠学习回忆功用和海马神经元形状的影响[J].北京中医药大学学报，2014，37（11）：763-766.

[5]杨红旗，李学，孙治坤，等.雌激素对大鼠空间回忆功用的影响及其或许机制[J].中华脑科疾病与恢复杂志（电子版），2013，3（3）：175-179.

[6]徐秋玲，刘涛.电针对老年发呆症大鼠海马CaMKⅡ表达的影响[J].时珍国医国药，2013，24（1）：236-238.

[7]Papenberg G，Ferencz B，Mangialasche F，et al.Physical activity and inflammation：effects on gray-matter volume and cognitive decline in aging[J].Hum Brain Mapp，2016，5（9）：119-123.

[8]唐伟，邓正国，曹江燕.女人卵巢囊腺癌误诊为尿潴留1例报导[J].重庆医学，2013，42（17）：2054-2055.

[9]Solis-Gaspar C，Vazquez-Roque RA，de Jesús Gómez-Villalobos M，et al.Cerebrolysin improves memory and ameliorates neuronal atrophy in spontaneously hypertensive，aged rats[J].Synapse，2016，9（21）：115-118.

[10]程念，胡进中，田玲玲，等.头绪宁对老年性发呆模型大鼠脑安排SIRT1基因表达的影响[J].我国老年学杂志，2012，32（16）：3462-3464.

[11]陈丽，刘西玲，谷超超，等.吡格列酮对阿尔茨海默病模型大鼠学习回忆妨碍的改进及海马区BDNF、TrkB表达的效果[J].我国临床研讨，2016，29（1）：9-12.

[12]Qin S，Chen Q，Wu H，et al.Effects of naringin on learning and memory dysfunction induced by gp120 in rats[J].Brain Res Bull，2016，30（124）：164-171.

[13]张婷，曾庆桦，刘滢，等.胰淀素在发呆小鼠和正常小鼠脑内的散布和表达改变[J].第三军医大学学报，2016，38（3）：258-263.

[14]吴林，赵海涛，陈炜，等.益肺宣肺降浊方对血管性发呆大鼠脑安排海马CaMPK-Ⅱ及突触蛋白表达的影响[J].中医杂志，2015，56（21）：1871-1874.

[15]李虹霖，孙兴华，李默，等.头穴丛刺对老年性发呆大鼠学习回忆才能的影响[J].针灸临床杂志，2015，31（10）：74-76.

（收稿日期：2016-06-17 本文修改：王红双）