安排特异性基因的表达是调控的 URP1基因在肺癌安排中的表达及其含义

周鑫　漆滨　潘向阳

[摘要] 意图 研讨URP1基因在肺癌安排中的表达及其含义。 办法 运用免疫组化SP法检测152例肺癌安排和152例配对癌旁正常肺安排中的URP1表达状况。 成果 URP1基因在肺癌安排中的表达显着高于正常肺安排（P<0.05），在非小细胞肺癌中高表达，在小细胞肺癌中低表达；URP1在鳞癌的表达高于腺癌（P<0.05）和大细胞癌（P<0.05），腺癌与大细胞癌之间比较差异无统计学含义（P>0.05）；URP1基因表达水平与鳞癌的分解程度呈正相关（P<0.05）。定论 URP1基因参加肺癌的发作及开展进程。

[关键词] 肺肿瘤；基因表达；URP1；免疫组化；整合素

[中图分类号] R734.2 [文献标识码] A [文章编号] 1673-9701（2017）16-0004-03

[Abstract] Objective To study the expression and significance of URP1 gene in lung cancer tissues. Methods Immunohistochemical SP method was used to detect the expression of URP1 in 152 cases of lung cancer tissues and 152 cases of paired paracancer normal lung tissues. Results The expression of URP1 in lung cancer tissues was significantly higher than that in normal lung tissues （P<0.05）. URP1 was highly expressed in non-small cell lung cancer and was lowly expressed in small cell lung cancer.The expression of URP1 in squamous cell carcinoma was higher than that in adenocarcinoma（P<0.05） and large cell carcinoma （P<0.05）. There was no significant difference in the expression of UPR1 between adenocarcinoma and large cell carcinoma.The expression level of URP1 protein was positively correlated with the degree of differentiation of squamous cell carcinoma（P<0.05）. Conclusion URP1 gene is involved in the development and progression of lung cancer.

[Key words] Lung neoplasms； Gene expression； URP1； Immunohistochemistry； Integrin

肺癌作為严重危害人类健康的最常见恶性肿瘤，在我国癌症死因构成比中已超越20%，且发病率和逝世率一向呈上升趋势[1]；肺癌来源于肺泡上皮细胞和支气管黏膜柱状上皮细胞，其开展进程中机体多种基因和蛋白反常表达，并起促进效果[2]。URP1是新近研讨证明的整合素激活分子，其或许具有调理整合素的效果，并促进细胞间黏附效果的改动，然后影响肿瘤的发作开展[3]。本试验运用免疫组化法检测正常肺安排及肺癌安排中的URP1表达，以评论URP1基因表达与肺癌发作及开展的联系。

1 材料与办法

1.1 材料来历

挑选2014年11月～2016年12月我院胸外科手术切除留取的新鲜肺癌安排及配对癌旁正常肺安排用于免疫安排化学染色剖析，经病理学医生确诊后归入。共入组152例，其中男83例，女69例；鳞癌65例，腺癌43例，大细胞癌21例，小细胞癌23例，术前均无化疗和放射医治史，一切样本进行URP1基因免疫安排化学染色。

1.2 免疫安排化学法

选用URP1兔抗人多克隆抗体U1610-01（1∶1000美国United States Biological公司，Swampscott，MA）和Dako二步法抗兔免疫安排化学检测试剂盒（EnVision+/HRP/Rb；显色剂：Dako Liquid DAB Substrate Chromogen System）进行检测。试验进程：将白腊切片脱蜡水化，过氧化氢消除内源性过氧化物酶后进行抗原修正（高压热修正法），滴入URP1兔抗人多克隆抗体，孵化过夜，洗刷，参加二抗，洗刷，苏木素复染，脱水，封片，镜检。

1.3 成果鉴定规范

选用染色广度及强度双评分规范评价蛋白表达[4]：染色广度核算染色细胞所占份额，染色深度分为4级0～3+。阴性：染色广度<10%；弱阳性：深度1+/广度<50%或深度2+/广度<30%；中等阳性：深度2+/广度30%～60%或深度3+/广度<30%；强阳性：深度2+/广度>60%或深度3+/广度>30%。阴性和弱阳性为低表达，中等阳性和强阳性为高表达。

1.4 统计学办法

运用SPSS 14.0统计剖析软件，计数材料选用χ2查验，关于理论频数<5时，选用Fisher切当概率法。P<0.05为差异有统计学含义。

2 成果

2.1 URP1基因在正常肺安排和肺癌安排中的表达

URP1基因在正常肺安排和肺癌安排中的表达：URP1基因阳性表达呈棕黄色，其在肺癌安排和正常肺安排中的阳性表达率分别为53.3%（81/152）和8.6%（13/152），两者之间比较差异有统计学含义（χ2=69.5，P<0.05）。

2.2 URP1基因在不同病理类型肺癌安排中的表达

URP1基因在非小细胞癌的阳性表达率均高于小细胞癌（χ2=10.4，P<0.05）；在非小细胞肺癌亚型中，URP1基因阳性表达率：鳞癌大于腺癌（χ2=9.7，P<0.05）及大细胞癌（χ2=8.9，P<0.05），差异有统计学含义，大细胞癌与腺癌之间差异无统计学含义（χ2=0.2，P>0.05）。见表1。

2.3 URP1基因在高、中、低分解程度的肺癌安排中的表达

高、中、低分解鳞癌之间URP1基因阳性表达率差异有统计学含义（χ2=25.4，P<0.05），高分解鳞癌URP1基因阳性表达率高于中分解鳞癌（χ2=4.6，P<0.05），中分解鳞癌表达阳性率高于低分解鳞癌（χ2=4.8，P<0.05），分解越好者URP1基因表达阳性率越高。但腺癌分解程度与URP1基因阳性表达率之间差异无统计学含义（χ2=0.09，P>0.05）。见表2。

3 评论

整合素分子是一种细胞黏附受体，在细胞黏附、细胞搬迁、胚胎发育、损害修正等进程中发挥关键效果，经过介导细胞外基质与细胞及细胞与细胞间的黏附效果，直接影响细胞增殖、按捺凋亡并介导血管生成等进程，参加肿瘤的成长与开展[5-7]。

URP1是新近研讨证明的整合素激活分子，坐落染色体20p12.3，与新杆状线虫中的UNC-112蛋白同源，在整合素活化中发挥重要效果，参加整合素的双向信号传导[8，9]。近些年其与肿瘤的联系逐步被提醒，Kloeker[10]研讨显现URP1基因在70%的结肠癌和60%的肺癌中表达上调，定量PCR检测其在结肠癌表达上调4倍以上，肺癌表达上调60倍以上，国内研讨也标明URP1基因mRNA和蛋白表达在结肠癌中均上调，提示URP1基因参加结肠癌发作开展，并与肿瘤搬运相关[11]。

本研讨经过免疫安排化学技能检测不同病理类型肺癌中URP1基因表达，发现URP1基因在肺癌安排表达显着高于正常肺安排，证明UPR1基因参加了肺癌的发作开展进程，其机制或许与依靠TGF-β信号通路的EMT上皮间质转化（EMT）有关，EMT在肿瘤的复发与搬运进程中扮演着重要的效果[12]，URP1基因FERM功能域可与整合素B亚单位结合，构成黏着斑复合物，并经过TGF-β信号通路调控EMT，然后促进肺癌的发作和开展[4]。

肺癌按病理安排学可分两大类：小细胞癌和非小细胞癌，其中小细胞癌占比挨近20%，非小细胞癌占比超越80%，非小细胞癌又包含鳞癌、腺癌、大细胞癌，鳞癌、腺癌又可分为高分解、中分解、低分解，不同病理分解类型的肺癌的医治及预后存在差异，分解越低其成长速度越快，越早呈现搬运，预后越差[13]。经过本试验咱们发现不同病理类型的肺癌安排URP1阳性表达率也存在差异：鳞癌>腺癌>小细胞癌，提醒URP1基因表达或许与肺癌细胞来源相关联，来源于上皮细胞的鳞癌、腺癌阳性表达率高，而神经内分泌来源的小细胞癌阳性表达率低，另一方面，高分解鳞癌的URP1基因阳性表达率高于中分解鳞癌 ，中分解鳞癌表达阳性率高于低分解鳞癌，分解越好者URP1基因表達阳性率越高，提示URP1基因或许影响肺癌细胞的机动性、趋化性及侵袭性，URP1高表达的肿瘤侵袭、搬迁才能相对较弱，恶性程度相对较低，反之亦然，其详细调理机制需要进一步研讨。

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（收稿日期：2017-04-05）