微柱凝胶法：微柱凝胶技能在血小板穿插配型中的临床使用
郭建生+姚叶林+何英爱
[摘要] 意图 评论微柱凝胶技能在血小板穿插配型中的临床运用价值。 办法 选用微柱凝胶免疫剖析技能对8例免疫性血小板输注无效的患者进行穿插配型，挑选成果为“相合”的血小板进行血小板医治，核算剖析血小板计数增高指数（CCI），CCI>4.5×109/L阐明血小板输注有用。挑选8例输注无效进行配型的作为试验组，另挑选8例输注无效未配型的作为对照组，比较两组的血小板输注成果。 成果 试验组患者CCI均>4.5×109/L，输注有用，对照组患者CCI均<4.5×109/L，差异有统计学含义（P<0.01）。 定论 微柱凝胶免疫剖析技能能够防止或减轻由免疫原因引起的输注无效，此办法简略快速，成果精确牢靠，值得推广。
[关键词] 微柱凝胶免疫剖析技能；血小板输注无效；血小板穿插配型
[中图分类号] R457.1[文献标识码] A[文章编号] 1674-4721（2014）03（c）-0024-03
Clinical application of microbubes gel technology in platelet cross match
GUO Jian-sheng1 YAO Ye-lin2 HE Ying-ai2
1.Dongguan Center Blood Station,Guangdong Province,Dongguan 523930,China;2.Departement of Clinical Laboratory,Shilong People′s Hospital of Dongguan City in Guangdong Province,Dongguan 523326,China
[Abstract] Objective To explore the clinical application value of microbubes gel technology in platelet cross match.Methods Microbubes gel immunoassay technology was used to make cross match for 8 patients who were platelet transfusion refractoriness because of immunity,then platelet therapy was applied to those "matched" platelets,the platelet corrected count increment (CCI) was caculated and analysed,and if the CCI was higher than 4.5×109/L,the platelet transfusion was valid.Eight cases of transfusion performed with type were selected as the experimental group,and the other eight cases of transfusion performed without type were chosen as control group,the platelet transfusion result was compared.Results CCI of experimental group was higher than 4.5×109/L,of control group was lower than 4.5×109/L,there was significant difference between two groups (P＜0.01).Conclusion Microbubes gel immunoassay technology can avoid or reduce transfusion refractoriness causes by the immune,this method is simple and fast,and the results are accurate and relible.It is worth to promoting.
[Key words] Microbubes gel immunoassay technology;Platelet Transfusion Refractoriness;Platelet cross match
机采血小板的运用在本市普及率已达100％，各种恶性血液病患者或临床上需长时刻输注血小板的患者在输注进程中常常遇到输注无效的状况，首要原因是由于机体免疫发作了同种抗体，发作的同种抗体中首要有HLA抗体（占80%）[1]、血小板特异性抗体（HPA抗体）、ABH抗体等，其间血小板的抗原结构杂乱，免疫发作血小板抗体的概率很高，尤其是重复许多输注血小板的患者约50%以上发作血小板同种抗体，相当于红细胞同种抗体发作频率的几十倍[2]。因而挑选一种适宜的办法寻觅适宜的献血者，以防止患者免疫发作同种抗体后呈现输注无效的状况，这既可处理HLA抗体引起的输注无效，也可处理HPA及ABH等同种抗体引起的输注无效，是临床输血尤其是血小板输注无效中急需处理的问题。本研讨挑选8例各种原因引起血小板削减的患者，选用微柱凝胶免疫剖析技能进行血小板穿插合作，医治作用较好。
1 材料与办法
1.1 一般材料
2013年2～11月由本市几家医院上送的患者血液标本8例，均为长时刻重复住院患者，年纪5～77岁，男性5例，女人3例。其间再生障碍性贫血2例，急性非淋巴细胞白血病1例，血小板削减性紫癜5例，屡次输注未经配型的机采血小板，血小板抗体检测为阳性，并排除非免疫要素（感染、发热等）。血型为O型3例，A型2例，B型2例，AB型1例。挑选此8例输注无效的进行配型者作为试验组，再挑选同期8例未配型者作为对照组。
1.2 仪器与试剂
1.2.1 仪器SORVALL Biofuge pico离心机，BYL型血型血清学多用离心机（BYF-I型，长春博研科学仪器有限公司），免疫微柱孵育器。
1.2.2 试剂试剂盒包含微柱凝胶抗人球蛋白试剂卡，指示红细胞等，由吉林省长春博迅生物技能职责有限公司供给，在有用期内运用。
1.3 配型输注办法
各挑选同血型5袋库存机采血小板（1医治量/袋），运用微柱凝胶免疫剖析技能穿插配型，O型红细胞加上抗人IgG致敏，作致敏红细胞用，该致敏红细胞与患者血浆各50 μl，放37℃孵育10 min，再将被检血小板按次序加入微柱凝胶管中，离心1000 r/min，1 min后调查检测成果。成果判读与微柱凝胶红细胞抗原抗体反响相同。致敏红细胞沉于微柱凝胶管底部的判为阴性，在凝胶管上面为强阳性，悬浮在凝胶中的为弱阳性。挑选配型成果为阴性的血小板进行输注。
1.4 血小板输注作用调查
在患者输注血小板行进行血小板计数，在输注血小板后24 h再进行血小板计数，核算记载输注后24 h血小板计数增高指数（CCI），用于评价患者血小板输注的作用（24 h CCI>4.5×109/L则血小板输注有用[3]）。
1.5 统计学剖析
运用SPSS 13.0软件进行统计学剖析，选用Fisher查验，以P<0.05为差异有统计学含义。
2 成果
2.1 穿插配型成果
8例患者别离与同血型的5袋机采血小板进行穿插合作试验，“+”为穿插合作成果阳性，“-”为穿插合作成果阴性。除患者5外，其他7位患者用5袋同型机采血小板进行配型，至少有1袋机采血小板合作成功。患者5从头挑选两袋同型血小板穿插合作后成果均为相合（表1）。
表1 穿插配型成果
2.2 患者输注穿插合作血小板后24 h的成果
8例患者血小板穿插合作后进行输注的作用见表2。
表2 患者输注穿插合作血小板后24 h的成果
24 h CCI>4.5×109/L则血小板输注有用
2.3 配型与未经配型血小板输注成果的比较
试验组在输注后CCI均>4.5×109/L，对照组CCI均＜4.5×109/L，两组差异有统计学含义（P<0.01）。
3 评论
血小板输注的有用性一向是倍受重视的研讨课题，这些年来尤其是免疫性要素（同种免疫）所引起的血小板输注无效愈加是研讨的焦点。由于国家一向推广成分输血，血小板的输注越来越被广泛运用。在临床上，联合化疗的患者、骨髓移植的患者等都需求输注血小板，导致血小板输注无效的状况常常发作，这就不只达不到医治的作用，乃至还耽搁病况。从另一视点剖析，现各大城市血液供给遍及严重，而机采血小板的供给愈加紧缺，长时刻以来各医院患者是血站收集一袋输一袋；现跟着本市临床血小板供给的相对富余（本市2013年血小板收集增长率达55.4％），为免疫性血小板输注无效患者进行输注前的穿插配型供给了可能。
影响血小板输注作用的原因有许多，归纳起来首要见于两大类[4]：一类为非免疫要素，包含发热、感染、脾大、活动性出血等；另一类为免疫性要素（同种免疫），包含HLA抗体（占80%）[1]、血小板特异性抗体（HPA抗体）、ABH抗体等。姚叶林等[5-6]研讨报导血小板抗体的检出率达19%～60%。假如进行血小板的穿插配型试验，挑选“合适性血小板输注”，能够很大程度地进步血小板输注作用，削减名贵血液资源的糟蹋。
本研讨挑选8例患者现已呈现了血小板输注无效，通过血小板穿插配型输注后CCI均>4.5×109/L，与未经配型的输注组比较，差异有统计学含义（P<0.01），阐明微柱凝胶免疫剖析技能用于血小板配型，能够防止或削减因免疫原因导致的血小板输注无效。方檀等[7]的报导选用SEPSA法对10例血小板输注无效的患者进行血小板配型，陈玫等[8]报导选用SEPSA法对12例血小板输注无效的患者进行血小板配型，成果显现10例患者CCI均>4.5×109/L，与本研讨成果共同。因而主张现已呈现了免疫性血小板输注无效的患者，尽可能地进行血小板配型后再行输注。
当时用于血小板穿插配型的血清学技能只提到了两种办法（SEPSA和MPHA）[9]，该两种办法试验进程杂乱，所需时刻较长。微柱凝胶免疫剖析技能已广泛用于穿插配血、血型正反判定、ABO抗体判定、不规则抗体挑选等，但用于血小板穿插配型则罕见报导。本研讨运用微柱凝胶免疫剖析技能进行血小板穿插配型，能够一起检测HLA、HPA及ABH抗体，到达抱负的试验成果，所需求的试验时刻也较短，约在1 h内就能够完结试验，办法简略快速，成果精确牢靠，值得有条件的单位推广运用。一起东莞市中心血站要有满足的机采血小板库存量以供进行血小板穿插配型运用，这就要呼吁更多的市民活跃投入到成分献血的队伍中，为广阔患者无私奉献！
[参考文献]
[1]陈小伍，于新发，田兆嵩.输血医治学[M].北京：科学出版社，2012：155.
[2]王培华.输血技能学[M].北京：公民卫生出版社，1998：178-182.
[3]李敬兰，曹金霓.血小板输注无效的原因与防治[J].我国输血杂志，1994，7（4）：217.
[4]李济生，赵冉.血小板输注无效的原因及防备[J].有用医技杂志，2004，11（5）：589.
[5]姚叶林，郭建生，何英爱.微柱凝胶免疫剖析技能检测血小板抗体的运用[J].查验医学与临床，2013，10（增刊1）：83-84.
[6]史恩祥，范海丽，王苗武，等.卡式微柱凝胶法检测血小板抗体的运用[J].临床输血与查验，2007，9（1）：70-71.
[7]方檀，杨岩，王初.血小板配型处理免疫性血小板输注无效10例调查[J].吉林医学，2005，26（12）：1338.
[8]陈玫，胡荣花，方建.免疫性血小板输注无效12例处理[J].我国输血杂志，2004，17（1）：55.
[9]血站技能操作规程[Z].卫医政发[2012].
（收稿日期：2014-02-13本文修改：郭静娟）
[基金项目] 广东省东莞市医疗卫生科技方案一般项目立项（201210515026021）
1.5 统计学剖析
运用SPSS 13.0软件进行统计学剖析，选用Fisher查验，以P<0.05为差异有统计学含义。
2 成果
2.1 穿插配型成果
8例患者别离与同血型的5袋机采血小板进行穿插合作试验，“+”为穿插合作成果阳性，“-”为穿插合作成果阴性。除患者5外，其他7位患者用5袋同型机采血小板进行配型，至少有1袋机采血小板合作成功。患者5从头挑选两袋同型血小板穿插合作后成果均为相合（表1）。
表1 穿插配型成果
2.2 患者输注穿插合作血小板后24 h的成果
8例患者血小板穿插合作后进行输注的作用见表2。
表2 患者输注穿插合作血小板后24 h的成果
24 h CCI>4.5×109/L则血小板输注有用
2.3 配型与未经配型血小板输注成果的比较
试验组在输注后CCI均>4.5×109/L，对照组CCI均＜4.5×109/L，两组差异有统计学含义（P<0.01）。
3 评论
血小板输注的有用性一向是倍受重视的研讨课题，这些年来尤其是免疫性要素（同种免疫）所引起的血小板输注无效愈加是研讨的焦点。由于国家一向推广成分输血，血小板的输注越来越被广泛运用。在临床上，联合化疗的患者、骨髓移植的患者等都需求输注血小板，导致血小板输注无效的状况常常发作，这就不只达不到医治的作用，乃至还耽搁病况。从另一视点剖析，现各大城市血液供给遍及严重，而机采血小板的供给愈加紧缺，长时刻以来各医院患者是血站收集一袋输一袋；现跟着本市临床血小板供给的相对富余（本市2013年血小板收集增长率达55.4％），为免疫性血小板输注无效患者进行输注前的穿插配型供给了可能。
影响血小板输注作用的原因有许多，归纳起来首要见于两大类[4]：一类为非免疫要素，包含发热、感染、脾大、活动性出血等；另一类为免疫性要素（同种免疫），包含HLA抗体（占80%）[1]、血小板特异性抗体（HPA抗体）、ABH抗体等。姚叶林等[5-6]研讨报导血小板抗体的检出率达19%～60%。假如进行血小板的穿插配型试验，挑选“合适性血小板输注”，能够很大程度地进步血小板输注作用，削减名贵血液资源的糟蹋。
本研讨挑选8例患者现已呈现了血小板输注无效，通过血小板穿插配型输注后CCI均>4.5×109/L，与未经配型的输注组比较，差异有统计学含义（P<0.01），阐明微柱凝胶免疫剖析技能用于血小板配型，能够防止或削减因免疫原因导致的血小板输注无效。方檀等[7]的报导选用SEPSA法对10例血小板输注无效的患者进行血小板配型，陈玫等[8]报导选用SEPSA法对12例血小板输注无效的患者进行血小板配型，成果显现10例患者CCI均>4.5×109/L，与本研讨成果共同。因而主张现已呈现了免疫性血小板输注无效的患者，尽可能地进行血小板配型后再行输注。
当时用于血小板穿插配型的血清学技能只提到了两种办法（SEPSA和MPHA）[9]，该两种办法试验进程杂乱，所需时刻较长。微柱凝胶免疫剖析技能已广泛用于穿插配血、血型正反判定、ABO抗体判定、不规则抗体挑选等，但用于血小板穿插配型则罕见报导。本研讨运用微柱凝胶免疫剖析技能进行血小板穿插配型，能够一起检测HLA、HPA及ABH抗体，到达抱负的试验成果，所需求的试验时刻也较短，约在1 h内就能够完结试验，办法简略快速，成果精确牢靠，值得有条件的单位推广运用。一起东莞市中心血站要有满足的机采血小板库存量以供进行血小板穿插配型运用，这就要呼吁更多的市民活跃投入到成分献血的队伍中，为广阔患者无私奉献！
[参考文献]
[1]陈小伍，于新发，田兆嵩.输血医治学[M].北京：科学出版社，2012：155.
[2]王培华.输血技能学[M].北京：公民卫生出版社，1998：178-182.
[3]李敬兰，曹金霓.血小板输注无效的原因与防治[J].我国输血杂志，1994，7（4）：217.
[4]李济生，赵冉.血小板输注无效的原因及防备[J].有用医技杂志，2004，11（5）：589.
[5]姚叶林，郭建生，何英爱.微柱凝胶免疫剖析技能检测血小板抗体的运用[J].查验医学与临床，2013，10（增刊1）：83-84.
[6]史恩祥，范海丽，王苗武，等.卡式微柱凝胶法检测血小板抗体的运用[J].临床输血与查验，2007，9（1）：70-71.
[7]方檀，杨岩，王初.血小板配型处理免疫性血小板输注无效10例调查[J].吉林医学，2005，26（12）：1338.
[8]陈玫，胡荣花，方建.免疫性血小板输注无效12例处理[J].我国输血杂志，2004，17（1）：55.
[9]血站技能操作规程[Z].卫医政发[2012].
（收稿日期：2014-02-13本文修改：郭静娟）
[基金项目] 广东省东莞市医疗卫生科技方案一般项目立项（201210515026021）
1.5 统计学剖析
运用SPSS 13.0软件进行统计学剖析，选用Fisher查验，以P<0.05为差异有统计学含义。
2 成果
2.1 穿插配型成果
8例患者别离与同血型的5袋机采血小板进行穿插合作试验，“+”为穿插合作成果阳性，“-”为穿插合作成果阴性。除患者5外，其他7位患者用5袋同型机采血小板进行配型，至少有1袋机采血小板合作成功。患者5从头挑选两袋同型血小板穿插合作后成果均为相合（表1）。
表1 穿插配型成果
2.2 患者输注穿插合作血小板后24 h的成果
8例患者血小板穿插合作后进行输注的作用见表2。
表2 患者输注穿插合作血小板后24 h的成果
24 h CCI>4.5×109/L则血小板输注有用
2.3 配型与未经配型血小板输注成果的比较
试验组在输注后CCI均>4.5×109/L，对照组CCI均＜4.5×109/L，两组差异有统计学含义（P<0.01）。
3 评论
血小板输注的有用性一向是倍受重视的研讨课题，这些年来尤其是免疫性要素（同种免疫）所引起的血小板输注无效愈加是研讨的焦点。由于国家一向推广成分输血，血小板的输注越来越被广泛运用。在临床上，联合化疗的患者、骨髓移植的患者等都需求输注血小板，导致血小板输注无效的状况常常发作，这就不只达不到医治的作用，乃至还耽搁病况。从另一视点剖析，现各大城市血液供给遍及严重，而机采血小板的供给愈加紧缺，长时刻以来各医院患者是血站收集一袋输一袋；现跟着本市临床血小板供给的相对富余（本市2013年血小板收集增长率达55.4％），为免疫性血小板输注无效患者进行输注前的穿插配型供给了可能。
影响血小板输注作用的原因有许多，归纳起来首要见于两大类[4]：一类为非免疫要素，包含发热、感染、脾大、活动性出血等；另一类为免疫性要素（同种免疫），包含HLA抗体（占80%）[1]、血小板特异性抗体（HPA抗体）、ABH抗体等。姚叶林等[5-6]研讨报导血小板抗体的检出率达19%～60%。假如进行血小板的穿插配型试验，挑选“合适性血小板输注”，能够很大程度地进步血小板输注作用，削减名贵血液资源的糟蹋。
本研讨挑选8例患者现已呈现了血小板输注无效，通过血小板穿插配型输注后CCI均>4.5×109/L，与未经配型的输注组比较，差异有统计学含义（P<0.01），阐明微柱凝胶免疫剖析技能用于血小板配型，能够防止或削减因免疫原因导致的血小板输注无效。方檀等[7]的报导选用SEPSA法对10例血小板输注无效的患者进行血小板配型，陈玫等[8]报导选用SEPSA法对12例血小板输注无效的患者进行血小板配型，成果显现10例患者CCI均>4.5×109/L，与本研讨成果共同。因而主张现已呈现了免疫性血小板输注无效的患者，尽可能地进行血小板配型后再行输注。
当时用于血小板穿插配型的血清学技能只提到了两种办法（SEPSA和MPHA）[9]，该两种办法试验进程杂乱，所需时刻较长。微柱凝胶免疫剖析技能已广泛用于穿插配血、血型正反判定、ABO抗体判定、不规则抗体挑选等，但用于血小板穿插配型则罕见报导。本研讨运用微柱凝胶免疫剖析技能进行血小板穿插配型，能够一起检测HLA、HPA及ABH抗体，到达抱负的试验成果，所需求的试验时刻也较短，约在1 h内就能够完结试验，办法简略快速，成果精确牢靠，值得有条件的单位推广运用。一起东莞市中心血站要有满足的机采血小板库存量以供进行血小板穿插配型运用，这就要呼吁更多的市民活跃投入到成分献血的队伍中，为广阔患者无私奉献！
[参考文献]
[1]陈小伍，于新发，田兆嵩.输血医治学[M].北京：科学出版社，2012：155.
[2]王培华.输血技能学[M].北京：公民卫生出版社，1998：178-182.
[3]李敬兰，曹金霓.血小板输注无效的原因与防治[J].我国输血杂志，1994，7（4）：217.
[4]李济生，赵冉.血小板输注无效的原因及防备[J].有用医技杂志，2004，11（5）：589.
[5]姚叶林，郭建生，何英爱.微柱凝胶免疫剖析技能检测血小板抗体的运用[J].查验医学与临床，2013，10（增刊1）：83-84.
[6]史恩祥，范海丽，王苗武，等.卡式微柱凝胶法检测血小板抗体的运用[J].临床输血与查验，2007，9（1）：70-71.
[7]方檀，杨岩，王初.血小板配型处理免疫性血小板输注无效10例调查[J].吉林医学，2005，26（12）：1338.
[8]陈玫，胡荣花，方建.免疫性血小板输注无效12例处理[J].我国输血杂志，2004，17（1）：55.
[9]血站技能操作规程[Z].卫医政发[2012].
（收稿日期：2014-02-13本文修改：郭静娟）
[基金项目] 广东省东莞市医疗卫生科技方案一般项目立项（201210515026021）