T淋巴细胞 支气管肺泡灌洗液T淋巴细胞亚群及肿瘤标志物检测在肺癌确诊中的使用价值

朱凤娇+潘连连+王传捷+叶军辉

[摘要] 意图 评论支气管肺泡灌洗液T淋巴细胞亚群及肿瘤标志物检测在肺癌确诊中的运用价值。 办法 选取50例在我院就诊的肺癌患者为调查组，并选取同期在我院就诊的肺部良性病变患者30例为对照组。两组患者均予以行支气管肺泡灌洗，搜集支气管肺泡灌洗液检测血清T淋巴细胞亚群、肿瘤标志物癌胚抗原（CEA）、细胞角蛋白19片段（CYFRA21-1）及鳞状细胞癌相关抗原（SCC）。调查并比较两组肺泡灌洗液T淋巴细胞亚群及肿瘤标志物水平的差异。 成果 调查组患者支气管肺泡灌洗液T淋巴细胞CD3+、CD4+水平显着低于对照组，CD8+水平显着高于对照组，CD4+/CD8+水平显着低于对照组，差异有统计学含义（P<0.05或P<0.01）；调查组患者支气管肺泡灌洗液肿瘤标志物CEA、CYFRA21-1、SCC 水均匀显着高于对照组，差异有统计学含义（P<0.01）。 定论 肺癌患者免疫功用低下，辅佐性T淋巴细胞削减，细胞毒性T淋巴细胞添加，检测支气管肺泡灌洗液T淋巴细胞亚群及肿瘤标志物能为临床确诊肺癌供给根据。

[要害词] 肺癌；支气管肺泡灌洗液；T淋巴细胞亚群；肿瘤标志物

[中图分類号] R734.2 [文献标识码] B [文章编号] 1673-9701（2017）35-0132-04

[Abstract] Objective To explore the application value of T lymphocyte subsets and tumor markers in bronchoalveolar lavage fluid in the diagnosis of lung cancer. Methods 50 patients with lung cancer treated in our hospital were selected as observation group and 30 patients with benign lung lesions in our hospital in the same period were selected as control group. The patients in the two groups were treated withbronchoalveolar lavage， and thebronchoalveolar lavage fluid was collected to detect serum T lymphocyte subsets， tumor markers including carcinoembryonic antigen（CEA）， cytokeratin 19 fragment（CYFRA21-1） and squamous cell carcinoma related antigen（SCC）. The differences of T lymphocyte subsets and tumor markers in the bronchoalveolar lavage fluid between the two groups were observed and compared. Results The levels of CD3+ and CD4+ in T lymphocytes ofbronchoalveolar lavage fluid in the observation group were significantly lower than those in the control group. The level of CD8+ in the observation group was significantly higher than that in the control group， the level of CD4+/CD8+ was lower than that in control group， and the differences were significant between the two groups（P<0.05 or P<0.01）. The levels of the tumor markers including CEA， CYFRA21-1 and SCC in the bronchoalveolar lavage fluid of the observation group were significantly higher than those in the control group， and the differences were significant（P<0.01）. Conclusion The lung cancer patients have low immune function， decreasedhelper T lymphocytes， increased cytotoxic T lymphocytes. Detection of T lymphocyte subsets and tumor markers in bronchoalveolar lavage fluid can provide the basis for clinical diagnosis of lung cancer.

[Key words] Lung cancer； Bronchoalveolar lavage fluid； T lymphocyte subsets； Tumor markers

肺癌是最常见的恶性肿瘤之一，其发病率高、病死率高，有研讨显现肺癌的5年生存率不到15%[1]。前期确诊与医治是医治肺癌的要害，但现在临床上缺少特异性的查看手法，临床上常经过X线、CT和磁共振等印象学查看进行开始确诊，但确诊有赖于肿块穿刺活检或手术切下的标本行病理查看，而经过穿刺活检或许形成肿瘤细胞分散，而且手术伤口较大，部分患者或许并不需手术医治，只需放化疗进行医治，故约束了临床医治[2]。支气管肺泡灌洗技能是经过支气管镜进行的无创操作技能，经过重复以无菌生理盐水灌洗、收回，灌洗液中含有支气管和肺泡掉落的细胞，能够获得下呼吸道病变的性质特色和活动程度，近年来逐步运用于肺部肿瘤的确诊及医治中[3-5]。本文评论支气管肺泡灌洗液T淋巴细胞亚群及肿瘤标志物水平对肺癌的确诊价值。endprint

1 目标与办法

1.1 研讨目标

选取2014年1月～2016年1月期间在我院就诊的肺癌患者共50例为调查组。归入规范：均根据穿刺或术后病理成果证明契合原发性肺癌确诊。扫除规范：①兼并其他肺部疾病或其他恶性肿瘤肺搬运；②兼并严峻的循环系统、消化系统、血液系统疾病；③不肯承受支气管镜查看。其间男36例、女14例；年纪54～76岁，均匀（65.2±5.7）岁；按病理分为：小细胞肺癌9例（18.00%）、鳞癌27例（54.00%）、腺癌14例（28.00%）；按方位分为：左肺17例（34.00%）、右肺18例（36.00%）、两肺15例（30.00%）；按结节多少分：单发21例（42.00%）、多发29例（58.00%）；根据TNM分期分为：Ⅰa期3例，Ⅰb期3例，Ⅱa期8例，Ⅱb期7例，Ⅲa期12例，Ⅲb期14例，Ⅳ期3例。选取同期在我院就诊的肺部良性病变患者30例为对照组，一切患者均经过细菌学、印象学或病理学等查看办法清晰确诊，其间男22例、女8例；年纪48～78岁，均匀（64.5±5.5）岁；按肺部疾病分为：缓慢阻塞性肺疾病13例（43.3%）、支气管扩张9例（30.0%）、肺炎5例（16.7%）、肺结核3例（10.0%）。两组患者的年纪、性别等一般材料比较差异无统计学含义（P>0.05），具有可比性。本研讨方案经我院道德委员会赞同经过，归入患者均知情赞同，并签署知情赞同书。

1.2检测办法

两组患者均在局麻下行支气管镜（Olympus BF-1T-240型）查看，根据印象学定位的病变部位，将支气管镜置于病变部位，运用生理盐水进行重复灌洗，总量约为100 mL，收回灌洗液约50 mL，30 min内送检支气管肺泡灌洗液。将灌洗液过滤，去除黏液与杂质，选用离心机予以低温1500 r/min离心约10 min，运用RP-MI1640培育液清洗后悬浮于参加10%小牛血清的培育液中，在37℃培育箱中培育1 h，收集细胞。运用抗CD3+、抗CD4+、抗CD8+、单克隆抗体进行染色后检测T淋巴细胞亚群（美国BD FACSCalibur流式细胞仪）。运用放射免疫法检测癌胚抗原（CEA）、细胞角蛋白19片段（CYFRA21-1），酶联免疫法检测鳞状细胞癌相关抗原（SCC），所需试剂盒均采购自瑞士罗氏公司，操作程序严厉依照试剂盒所附的说明书进行试验操作。

1.3调查目标

调查并比较两组支气管肺泡灌洗液中T淋巴细胞亚群的改变，包含CD3+（68%～77%）、CD4+（41%～51%）和CD8+（23%～30%）水平以及CD4+/CD8+（1.4～2.0）的比值，并比较两组肿瘤标志物CEA（0～5 ng/mL）、CYFRA21-1（0～3.3 ng/mL）和SCC（0～2.5 ng/mL）的水平。

1.4 统计学办法

选用SPSS17.0 for windows统计学软件进行剖析处理，计量材料以均数±规范差（x±s）表明，各项数据遵守正态分布，组间比较选用成组t查验，P<0.05为差异有统计学含义。

2 成果

2.1 两组患者支气管肺泡灌洗液T淋巴细胞亚群水平比较

调查组患者支气管肺泡灌洗液T淋巴细胞CD3+和CD4+水平显着低于对照组，CD8+水平显着高于对照组，CD4+/CD8+水平显着低于对照组，差异均有统计学含义（P<0.05或P<0.01）（表1）。

2.2两组患者支气管肺泡灌洗液肿瘤标志物水平比较

调查组患者支气管肺泡灌洗液肿瘤标志物CEA、CYFRA21-1和SCC水均匀显着高于对照组，差异有统计学含义（P<0.01）（表2）。

3评论

近年来，跟着经济的开展，空气污染不断加剧，肺癌患者逐年增多，在我国经济兴旺区域，肺癌的发病率已跃居一切恶性肿瘤的第一位[6]。肺癌起病隱匿，前期常无临床症状，有研讨显现超越50%的肺癌患者确诊时现已是晚期，错失最佳的医治时刻，严峻影响患者的预后[7，8]。现在临床上确诊肺癌的辅佐查看较多，包含血清肿瘤标志、CT、磁共振、纤维支气管镜、肺穿刺活检等[9-11]，其间纤维支气管镜活检和刷检是最主要的手法，但部分肺癌，特别是周围型肺癌无法经过纤维支气管镜确诊[12，13]。60年代后期跟着可曲性光纤维支气管镜的开发和运用，逐步鼓起支气管肺泡灌洗。自1974年Reynolds和 Newball报导支气管肺泡灌洗技能以来，为研讨某些肺疾病，特别是某些间质性肺疾病，如结节病、特发性肺纤维化（IPF）、过敏性肺泡炎、肺泡蛋白堆积症、胶原血管病伴间质性肺疾病（CVD-ILD）、组织细胞增多症、尘肺、肺损害与修正及免疫受损患者的肺部感染等疾病，拓荒了一个新的研讨途径和检测手法，有学者乃至将支气管肺泡灌洗液称为“液体肺活检”[14]。

支气管肺泡灌洗技能具有无创性等长处，但灌洗液的检测成分较多，其间检测肿瘤标志物如CEA、CYFRA21-1、SCC等最为多见。CEA是一种蛋白多糖复合物，广泛存在于内胚叶来源的肿瘤中，能反映人体多种肿瘤的存在[15]。CYFRA21-1是上皮细胞的结构蛋白之一，在恶性上皮细胞中因为肿瘤细胞的加快降解导致很多CYFRA21-1开释[16，17]。SCC是一种糖蛋白存在于子宫颈、肺、头颈等非角化癌的细胞中[18]。当肺恶性肿瘤发作时血清中3种肿瘤标志物将显着升高，而肺泡灌洗液中3种肿瘤标志物的浓度更是血清中的数倍，其对肺癌的确诊价值现已得到临床的广泛认可[19]。本次研讨也发现调查组支气管肺泡灌洗液肿瘤标志物CEA、CYFRA21-1和SCC 水均匀高于对照组，与国内报导附近[20-22]。近年来有研讨显现肺癌会对患者的细胞免疫功用形成影响，患者会呈现部分或全身免疫功用障碍，这与肿瘤的发作、开展密切相关[23-27]。T淋巴细胞是介导细胞免疫的重要因子，其包含辅佐性T淋巴细胞CD3+、CD4+和细胞毒性淋巴细胞CD8+，其间辅佐性T淋巴细胞具有杀伤肿瘤的效果，而细胞毒性T淋巴细胞能排泄免疫抑制因子，具有抑制效应性T细胞活化的效果，然后削减对肿瘤细胞的杀伤效果。杨国辉等[12]报导肺癌患者支气管肺泡灌洗液中CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+均下降，存在显着的T淋巴细胞功用紊乱。而莫扬[27]报导肺癌患者Th水平下降，Th/Ts比值较正常人显着下降。本研讨成果显现调查组患者支气管肺泡灌洗液T淋巴细胞CD3+、CD4+水平显着低于对照组，CD8+水平显着高于对照组，CD4+/CD8+水平显着低于对照组。由此成果能够发现肺癌患者的辅佐性T淋巴细胞CD3+、CD4+水平会呈现下降，而细胞毒性T淋巴细胞CD8+会呈现上升，本文以为这与肺癌患者免疫功用遍及低下相关，部分低下的免疫功用愈加有利于肿瘤细胞的快速成长。而关于肺部良性病变患者，疾病往往不影响部分细胞免疫功用，因而肺泡灌洗液中T淋巴细胞水平处于正常水平。因而经过检测支气管肺泡灌洗液中T淋巴细胞及肿瘤标志物水平能有用地猜测肺癌的发作与开展，为前期确诊肺癌供给有用的协助。但本研讨未对不同分期及不同病理类型肺癌患者的支气管肺泡灌洗液T淋巴细胞及肿瘤标志物水平进行比较，鄙人一步研讨中加以完善。endprint

总归，肺癌患者免疫功用低下，辅佐性T淋巴细胞削减，细胞毒性T淋巴细胞添加，检测支气管肺泡灌洗液T淋巴细胞亚群及肿瘤标志物能为临床确诊肺癌供给根据。

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（收稿日期：2017-08-30）endprint