安神补脑液几盒一阶段 安神补脑液制备工艺优化研讨
周颖
[摘要] 意图 为了优化安神补脑复方制剂制备工艺，进步药效。 办法 正交试验法断定最佳醇沉工艺。成果 药液相对密度为1.20，含醇量为60%，静置时刻24 h的醇沉作用最佳。定论 按优化工艺制得的制剂2，3，5，4-四羟基二苯乙烯-2-0-β-D-葡萄糖苷、淫羊藿苷含量和出膏率高，且质量安稳。
[关键词] 安神补脑液；正交规划；淫羊藿苷；制备工艺
[中图分类号] R461 [文献标识码] B [文章编号] 1673-9701（2014）10-0048-02
安神补脑液由鹿茸、制何首乌、淫羊藿、干姜、甘草、大枣、维生素B1等7味药物制成，具有生精补髓、益气养血、强脑安神等成效。适用于肾精缺乏、气血两亏所造成的的头晕、乏力、健忘、失眠；神经衰弱症见上述证候者。是临床上常用的成方制剂。尽管《我国药典》2010版一部中收载了该制剂，但“制法”项下仅记载了将“滤液浓缩至适量，加3倍量乙醇，静置，滤过，滤液备用”[1]， 关于醇沉工艺并没有详细的办法，为细化复方工艺，进步复方的药效和生物利费用，现选用正交法对该复方的醇沉工艺进行调查及优化。
1 仪器与试药
1.1 仪器
Agilent 1100型液相色谱体系，包含：高压二元泵（G1311A），可变波长检测器（G1313A），Agilent 1100 series色谱工作站（美国安捷伦科技有限公司）。
1.2 对照品
淫羊藿苷对照品购自中检所，供含量测定用，纯度>98%。
1.3 试剂
乙腈、甲醇均为色谱纯，乙醇为剖析纯，购自天津科密欧化学试剂有限公司。
1.4 药材
制何首乌、淫羊藿、干姜、甘草和大枣等药材购自沈阳市药材商场，经判定均为正品。
2 办法与成果
2.1醇沉前提取液的制备
因为药典中未记载该制剂的处方量，根据部颁规范的记载[2]，按处方配比取处方中的制何首乌62.5 g，淫羊藿50 g，干姜 12.5 g，甘草 6.25 g，大枣 12.5 g，精细测定。加水煎煮3次，第1次2 h，第2、3次各1 h，兼并煎液，滤过，滤液均匀分红三份，别离减压浓缩至相对密度为1.15、1.20、1.25时备用。
2.2供试品溶液制备及色谱条件
经过组方剖析，该复方醇沉部分的首要药味为何首乌和淫羊藿，因而，首要调查目标为出膏率、2，3，5，4-四羟基二苯乙烯-2-0-β-D-葡萄糖苷（以下简称二苯乙烯苷）、淫羊藿苷。选用HPLC法对该复方的上述两个成分一起进行含量测定。
2.2.1供试品溶液的制备 将醇沉后的溶液滤过，加水定容至1000 mL摇匀，精细汲取1～10 mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，即得。
2.2.2色谱条件 迪马DiamonsilTM C18色谱柱（4.5 mm×250 mm，5 μm）；乙腈-水为活动相， 梯度洗脱（0～10 min，乙腈体积分数为30%～50%；10～11 min，乙腈体积分数为50%～80%；11～15 min，乙腈体积分数为80%～100%；15～20 min，乙腈体积分数为100%）；流速为1.0 mL/min；检测波长为350 nm；柱温为30℃；进样量25 μL[3]。
2.3醇沉工艺的优化
选用L9（34）正交试验对醇沉条件中的密度、醇浓度及静置时刻进行3种水平的调查，断定最佳醇沉办法。其影响要素水平见表1。
表1 醇沉工艺相关要素水平表
按L9（34）正交表组织进行试验。取上述不同相对密度的三份样品别离按正交表组织试验。以出膏率、淫羊藿苷、二苯乙烯苷三个目标进行调查，加权归纳评分，其间总分100分，出膏率占20分，淫羊藿苷占40分、二苯乙烯苷占40分。正交剖析与加权评分红果见表2、表3。
表2 醇沉条件调查试验成果
表3 方差剖析表
注：F0.05（2，2）=19.00； F0.1（2，2）=9.00
直观剖析和方差剖析成果表明：三个调查要素中停止时刻对成果影响最为明显，为首要影响要素；药液相对密度和含醇量对成果影响较小，为非必须要素。最佳提取条件为A2B1C3，即药液相对密度为1.20，含醇量为60%，停止时刻24 h。
2.4验证试验
称取何首乌（制）、淫羊藿、干姜、甘草、大枣，共3份，别离加水煎煮3次，第1次2个小时，第2、3次各1个小时，兼并煎液，滤过，滤液减压浓缩至相对密度为1.20，参加乙醇使含醇量到达60%，停止放置24 h后别离测定出膏率、二苯乙烯苷、淫羊藿苷的量，见表4。
表4 验证试验成果
3评论
原提取工艺是将水提液浓缩至流浸膏，而流浸膏要求浓缩到每1 mL相当于原药材1 g，这对工业生产时质量监控极端不方便，因而，按流浸膏的份额浓缩后检测密度为1.20，因而挑选将水提液减压浓缩至相对密度为1.15、1.20、1.25备正交试验运用。检测目标由体积改为密度，为工业生产质量监控供给方便。
正交试验成果的断定办法是无明显性差异要素挑选最节能水平，有明显性差异要素挑选成果最高的要素水平。因为正交成果表明药液密度和含醇量两个要素无明显性差异，因而按节能准则挑选水平：药液密度挑选1.20，因为其比1.15加甲醇量相对较少，且比1.25需求消耗的动力少；挑选60%含醇量是因为其加醇量相对较少，节约资源。别的，静置时刻要素因为其三个水平的成果有明显性差异，因而挑选正交试验成果最好的水平，即24 h为最佳静置时刻。
根据传统的复方制备工艺，本试验仅调查优化何首乌（制）、淫羊藿、干姜、甘草、大枣的提取后的醇沉工艺，未对宝贵药材鹿茸的制备工艺进行优化。优化后的醇沉工艺可认为该复方往后的制剂工艺研讨供给根据。
[参考文献]
[1] 国家药典委员会. 中华人民共和国药典2010版一部[S]. 北京：我国医药科技出版社，2010：715-716.
[2] 中华人民共和国卫生部药典委员会. 中华人民共和国卫生部药品规范中药成方制剂第三册[S]. 1991：73-78.
[3] 王伟，许祺，杜秀芳，等. 高效液相色谱法一起测定安神补脑液中淫羊藿苷和二苯乙烯苷的含量[J]. 河北科技大学学报，2010，31（5）：403-405.endprint
[摘要] 意图 为了优化安神补脑复方制剂制备工艺，进步药效。 办法 正交试验法断定最佳醇沉工艺。成果 药液相对密度为1.20，含醇量为60%，静置时刻24 h的醇沉作用最佳。定论 按优化工艺制得的制剂2，3，5，4-四羟基二苯乙烯-2-0-β-D-葡萄糖苷、淫羊藿苷含量和出膏率高，且质量安稳。
[关键词] 安神补脑液；正交规划；淫羊藿苷；制备工艺
[中图分类号] R461 [文献标识码] B [文章编号] 1673-9701（2014）10-0048-02
安神补脑液由鹿茸、制何首乌、淫羊藿、干姜、甘草、大枣、维生素B1等7味药物制成，具有生精补髓、益气养血、强脑安神等成效。适用于肾精缺乏、气血两亏所造成的的头晕、乏力、健忘、失眠；神经衰弱症见上述证候者。是临床上常用的成方制剂。尽管《我国药典》2010版一部中收载了该制剂，但“制法”项下仅记载了将“滤液浓缩至适量，加3倍量乙醇，静置，滤过，滤液备用”[1]， 关于醇沉工艺并没有详细的办法，为细化复方工艺，进步复方的药效和生物利费用，现选用正交法对该复方的醇沉工艺进行调查及优化。
1 仪器与试药
1.1 仪器
Agilent 1100型液相色谱体系，包含：高压二元泵（G1311A），可变波长检测器（G1313A），Agilent 1100 series色谱工作站（美国安捷伦科技有限公司）。
1.2 对照品
淫羊藿苷对照品购自中检所，供含量测定用，纯度>98%。
1.3 试剂
乙腈、甲醇均为色谱纯，乙醇为剖析纯，购自天津科密欧化学试剂有限公司。
1.4 药材
制何首乌、淫羊藿、干姜、甘草和大枣等药材购自沈阳市药材商场，经判定均为正品。
2 办法与成果
2.1醇沉前提取液的制备
因为药典中未记载该制剂的处方量，根据部颁规范的记载[2]，按处方配比取处方中的制何首乌62.5 g，淫羊藿50 g，干姜 12.5 g，甘草 6.25 g，大枣 12.5 g，精细测定。加水煎煮3次，第1次2 h，第2、3次各1 h，兼并煎液，滤过，滤液均匀分红三份，别离减压浓缩至相对密度为1.15、1.20、1.25时备用。
2.2供试品溶液制备及色谱条件
经过组方剖析，该复方醇沉部分的首要药味为何首乌和淫羊藿，因而，首要调查目标为出膏率、2，3，5，4-四羟基二苯乙烯-2-0-β-D-葡萄糖苷（以下简称二苯乙烯苷）、淫羊藿苷。选用HPLC法对该复方的上述两个成分一起进行含量测定。
2.2.1供试品溶液的制备 将醇沉后的溶液滤过，加水定容至1000 mL摇匀，精细汲取1～10 mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，即得。
2.2.2色谱条件 迪马DiamonsilTM C18色谱柱（4.5 mm×250 mm，5 μm）；乙腈-水为活动相， 梯度洗脱（0～10 min，乙腈体积分数为30%～50%；10～11 min，乙腈体积分数为50%～80%；11～15 min，乙腈体积分数为80%～100%；15～20 min，乙腈体积分数为100%）；流速为1.0 mL/min；检测波长为350 nm；柱温为30℃；进样量25 μL[3]。
2.3醇沉工艺的优化
选用L9（34）正交试验对醇沉条件中的密度、醇浓度及静置时刻进行3种水平的调查，断定最佳醇沉办法。其影响要素水平见表1。
表1 醇沉工艺相关要素水平表
按L9（34）正交表组织进行试验。取上述不同相对密度的三份样品别离按正交表组织试验。以出膏率、淫羊藿苷、二苯乙烯苷三个目标进行调查，加权归纳评分，其间总分100分，出膏率占20分，淫羊藿苷占40分、二苯乙烯苷占40分。正交剖析与加权评分红果见表2、表3。
表2 醇沉条件调查试验成果
表3 方差剖析表
注：F0.05（2，2）=19.00； F0.1（2，2）=9.00
直观剖析和方差剖析成果表明：三个调查要素中停止时刻对成果影响最为明显，为首要影响要素；药液相对密度和含醇量对成果影响较小，为非必须要素。最佳提取条件为A2B1C3，即药液相对密度为1.20，含醇量为60%，停止时刻24 h。
2.4验证试验
称取何首乌（制）、淫羊藿、干姜、甘草、大枣，共3份，别离加水煎煮3次，第1次2个小时，第2、3次各1个小时，兼并煎液，滤过，滤液减压浓缩至相对密度为1.20，参加乙醇使含醇量到达60%，停止放置24 h后别离测定出膏率、二苯乙烯苷、淫羊藿苷的量，见表4。
表4 验证试验成果
3评论
原提取工艺是将水提液浓缩至流浸膏，而流浸膏要求浓缩到每1 mL相当于原药材1 g，这对工业生产时质量监控极端不方便，因而，按流浸膏的份额浓缩后检测密度为1.20，因而挑选将水提液减压浓缩至相对密度为1.15、1.20、1.25备正交试验运用。检测目标由体积改为密度，为工业生产质量监控供给方便。
正交试验成果的断定办法是无明显性差异要素挑选最节能水平，有明显性差异要素挑选成果最高的要素水平。因为正交成果表明药液密度和含醇量两个要素无明显性差异，因而按节能准则挑选水平：药液密度挑选1.20，因为其比1.15加甲醇量相对较少，且比1.25需求消耗的动力少；挑选60%含醇量是因为其加醇量相对较少，节约资源。别的，静置时刻要素因为其三个水平的成果有明显性差异，因而挑选正交试验成果最好的水平，即24 h为最佳静置时刻。
根据传统的复方制备工艺，本试验仅调查优化何首乌（制）、淫羊藿、干姜、甘草、大枣的提取后的醇沉工艺，未对宝贵药材鹿茸的制备工艺进行优化。优化后的醇沉工艺可认为该复方往后的制剂工艺研讨供给根据。
[参考文献]
[1] 国家药典委员会. 中华人民共和国药典2010版一部[S]. 北京：我国医药科技出版社，2010：715-716.
[2] 中华人民共和国卫生部药典委员会. 中华人民共和国卫生部药品规范中药成方制剂第三册[S]. 1991：73-78.
[3] 王伟，许祺，杜秀芳，等. 高效液相色谱法一起测定安神补脑液中淫羊藿苷和二苯乙烯苷的含量[J]. 河北科技大学学报，2010，31（5）：403-405.endprint
[摘要] 意图 为了优化安神补脑复方制剂制备工艺，进步药效。 办法 正交试验法断定最佳醇沉工艺。成果 药液相对密度为1.20，含醇量为60%，静置时刻24 h的醇沉作用最佳。定论 按优化工艺制得的制剂2，3，5，4-四羟基二苯乙烯-2-0-β-D-葡萄糖苷、淫羊藿苷含量和出膏率高，且质量安稳。
[关键词] 安神补脑液；正交规划；淫羊藿苷；制备工艺
[中图分类号] R461 [文献标识码] B [文章编号] 1673-9701（2014）10-0048-02
安神补脑液由鹿茸、制何首乌、淫羊藿、干姜、甘草、大枣、维生素B1等7味药物制成，具有生精补髓、益气养血、强脑安神等成效。适用于肾精缺乏、气血两亏所造成的的头晕、乏力、健忘、失眠；神经衰弱症见上述证候者。是临床上常用的成方制剂。尽管《我国药典》2010版一部中收载了该制剂，但“制法”项下仅记载了将“滤液浓缩至适量，加3倍量乙醇，静置，滤过，滤液备用”[1]， 关于醇沉工艺并没有详细的办法，为细化复方工艺，进步复方的药效和生物利费用，现选用正交法对该复方的醇沉工艺进行调查及优化。
1 仪器与试药
1.1 仪器
Agilent 1100型液相色谱体系，包含：高压二元泵（G1311A），可变波长检测器（G1313A），Agilent 1100 series色谱工作站（美国安捷伦科技有限公司）。
1.2 对照品
淫羊藿苷对照品购自中检所，供含量测定用，纯度>98%。
1.3 试剂
乙腈、甲醇均为色谱纯，乙醇为剖析纯，购自天津科密欧化学试剂有限公司。
1.4 药材
制何首乌、淫羊藿、干姜、甘草和大枣等药材购自沈阳市药材商场，经判定均为正品。
2 办法与成果
2.1醇沉前提取液的制备
因为药典中未记载该制剂的处方量，根据部颁规范的记载[2]，按处方配比取处方中的制何首乌62.5 g，淫羊藿50 g，干姜 12.5 g，甘草 6.25 g，大枣 12.5 g，精细测定。加水煎煮3次，第1次2 h，第2、3次各1 h，兼并煎液，滤过，滤液均匀分红三份，别离减压浓缩至相对密度为1.15、1.20、1.25时备用。
2.2供试品溶液制备及色谱条件
经过组方剖析，该复方醇沉部分的首要药味为何首乌和淫羊藿，因而，首要调查目标为出膏率、2，3，5，4-四羟基二苯乙烯-2-0-β-D-葡萄糖苷（以下简称二苯乙烯苷）、淫羊藿苷。选用HPLC法对该复方的上述两个成分一起进行含量测定。
2.2.1供试品溶液的制备 将醇沉后的溶液滤过，加水定容至1000 mL摇匀，精细汲取1～10 mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，即得。
2.2.2色谱条件 迪马DiamonsilTM C18色谱柱（4.5 mm×250 mm，5 μm）；乙腈-水为活动相， 梯度洗脱（0～10 min，乙腈体积分数为30%～50%；10～11 min，乙腈体积分数为50%～80%；11～15 min，乙腈体积分数为80%～100%；15～20 min，乙腈体积分数为100%）；流速为1.0 mL/min；检测波长为350 nm；柱温为30℃；进样量25 μL[3]。
2.3醇沉工艺的优化
选用L9（34）正交试验对醇沉条件中的密度、醇浓度及静置时刻进行3种水平的调查，断定最佳醇沉办法。其影响要素水平见表1。
表1 醇沉工艺相关要素水平表
按L9（34）正交表组织进行试验。取上述不同相对密度的三份样品别离按正交表组织试验。以出膏率、淫羊藿苷、二苯乙烯苷三个目标进行调查，加权归纳评分，其间总分100分，出膏率占20分，淫羊藿苷占40分、二苯乙烯苷占40分。正交剖析与加权评分红果见表2、表3。
表2 醇沉条件调查试验成果
表3 方差剖析表
注：F0.05（2，2）=19.00； F0.1（2，2）=9.00
直观剖析和方差剖析成果表明：三个调查要素中停止时刻对成果影响最为明显，为首要影响要素；药液相对密度和含醇量对成果影响较小，为非必须要素。最佳提取条件为A2B1C3，即药液相对密度为1.20，含醇量为60%，停止时刻24 h。
2.4验证试验
称取何首乌（制）、淫羊藿、干姜、甘草、大枣，共3份，别离加水煎煮3次，第1次2个小时，第2、3次各1个小时，兼并煎液，滤过，滤液减压浓缩至相对密度为1.20，参加乙醇使含醇量到达60%，停止放置24 h后别离测定出膏率、二苯乙烯苷、淫羊藿苷的量，见表4。
表4 验证试验成果
3评论
原提取工艺是将水提液浓缩至流浸膏，而流浸膏要求浓缩到每1 mL相当于原药材1 g，这对工业生产时质量监控极端不方便，因而，按流浸膏的份额浓缩后检测密度为1.20，因而挑选将水提液减压浓缩至相对密度为1.15、1.20、1.25备正交试验运用。检测目标由体积改为密度，为工业生产质量监控供给方便。
正交试验成果的断定办法是无明显性差异要素挑选最节能水平，有明显性差异要素挑选成果最高的要素水平。因为正交成果表明药液密度和含醇量两个要素无明显性差异，因而按节能准则挑选水平：药液密度挑选1.20，因为其比1.15加甲醇量相对较少，且比1.25需求消耗的动力少；挑选60%含醇量是因为其加醇量相对较少，节约资源。别的，静置时刻要素因为其三个水平的成果有明显性差异，因而挑选正交试验成果最好的水平，即24 h为最佳静置时刻。
根据传统的复方制备工艺，本试验仅调查优化何首乌（制）、淫羊藿、干姜、甘草、大枣的提取后的醇沉工艺，未对宝贵药材鹿茸的制备工艺进行优化。优化后的醇沉工艺可认为该复方往后的制剂工艺研讨供给根据。
[参考文献]
[1] 国家药典委员会. 中华人民共和国药典2010版一部[S]. 北京：我国医药科技出版社，2010：715-716.
[2] 中华人民共和国卫生部药典委员会. 中华人民共和国卫生部药品规范中药成方制剂第三册[S]. 1991：73-78.
[3] 王伟，许祺，杜秀芳，等. 高效液相色谱法一起测定安神补脑液中淫羊藿苷和二苯乙烯苷的含量[J]. 河北科技大学学报，2010，31（5）：403-405.endprint