改进酸性土壤对川芎药用质量的影响

宁梓君等

[摘要] 意图 研讨施用生石灰改进酸性土壤，进步土壤pH值，下降川芎镉含量的一起对川芎药用质量的影响。 办法 选取一块面积约为230 m2的酸性土壤，分为4等块。设置1个空白组（PCK组）和3个处理组（P1、P2、P3组）。在川芎栽种前，向川芎培养土壤施用生石灰，各组生石灰施用量别离为PCK：0 kg/hm2；P1：750 kg/hm2；P2：1125 kg/hm2；P3：1500 kg/hm2。依照2010版《药典》规则川芎项下办法对收获期川芎的药用质量进行点评。 成果 各组川芎样品的各项目标均契合《药典》（2010版）川芎项下定量要求。相关于PCK组，各处理组的浸出物及阿魏酸含量升高。P1、P2、P3组浸出物含量别离升高12.15%、7.99%、10.07%，阿魏酸含量别离升高0.88%、3.95%、21.93%，阿魏酸含量随生石灰的施用量增大而升高。 定论 以生石灰改进酸性川芎培养土壤未对川芎药用质量形成不良影响。生石灰可用于改进酸性川芎培养土壤以下降川芎镉含量的田间试验。

[要害词] 川芎；土壤改进；生石灰；药用质量；阿魏酸

[中图分类号] R282.2 [文献标识码] A [文章编号] 1674-4721（2015）02（a）-0004-04

Effect of acidic soil improvement on the medicinal quality of Ligusticum chuanxiong Hort.

NING Zi-jun1，2 LI Bin2 LI Chun-miao2 HE Chun-yang1，2 XIA Hou-lin1 CHEN Xing2

1.College of Pharmacy，Pharmaceutical Analysis，Chengdu University of Traditional Chinese Medicine，Chengdu 611130，China；2.Institute of Pharmaceutical Sciences，Sichuan Academy of Chinese Medicine Sciences，Chengdu 610041，China

[Abstract] Objective To study the effect of quicklime application on the medicinal quality of Ligusticum chuanxiong Hort. and the quicklime application was used to raise the soil pH values and reduce the Cd content in Ligusticum chuanxiong Hort.. Methods A piece of acidic soil which area was 230 m2 was divided into 4 equal portions.A blank group （PCK） and 3 treatment groups （P1，P2，P3） were set.Applying quicklime to the soil before planting Ligusticum chuanxiong Hort.（quicklime application rate： PCK：0 kg/hm2；P1：750 kg/hm2；P2：1125 kg/hm2；P3：1500 kg/hm2），then followed rules of Chinese Pharmacopoeia （edition 2010） to evaluate the medicinal quality of Ligusticum chuanxiong Hort.. Results All indexes of each group of Ligusticum chuanxiong Hort. met the requirement of Chinese Pharmacopoeia （edition 2010）.Compared with PCK group，ethanol soluble extractives and ferulic acid content was increased，ethanol soluble extractive of treatment groups were increased by 12.15%，7.99%，10.07% and ferulic acid content of them was increased by 0.88%，3.95%，21.93%，respectively and ferulic acid content was increased with the increasing of quicklime application rate. Conclusion No harmful effect was found on the medicinal quality of Ligusticum chuanxiong Hort. of the experiment of improving the acidic soils by quicklime application.Quicklime can be used on the field experiment of improving acidic soils and reducing the Cd content in Ligusticum chuanxiong Hort..

[Key words] Ligusticum chuanxiong Hort.；Soil improvement；Quicklime；Medicinal quality；Ferulic acid

川芎来历于伞形科藁本属植物川芎（Ligusticum chuanxiong Hort.）的枯燥根茎，为我国四川省的道地药材，主产于四川省彭州市和都江堰市。川芎入肝、胆、心包经，有活血行气、祛风止痛之成效，可用于医治胸痹心痛、月经不调、风湿痹痛等[1]。现有研讨标明，川芎植物有富集土壤中镉的才能[2-3]。镉是一种剧毒的重金属元素，经过食物链进入人体，对肝、肾、免疫体系和生殖体系等形成一系列损害，镉过量会使安排代谢体系发作妨碍以及按捺多种酶的活性，可引发骨痛病、肺水肿等多种疾病[4-5]。川芎对镉的富集才能严重影响了川芎的质量和药用价值，要挟服用者的用药安全，近年来川芎的镉含量超支，已经成为阻止其对外出口的首要因素。对此，本课题组对四川省彭州市川芎培养基地进行了长时间研讨查询，发现川芎中的镉首要来历于其培养土壤，而且镉含量随土壤酸度的增大而添加[6-7]。因而改进酸性土壤，进步土壤pH值是下降川芎镉含量的要害。

现在关于中、轻度镉污染的酸性土壤，施入生石灰是投入低、效率高的改进办法[8]。因为川芎是药用植物，故本研讨依照2010版《药典》规则的川芎项下办法对施用生石灰后收获期的川芎质量进行了点评，以期为后期研讨工作供给理论依据。

1 资料与仪器

1.1 供试样品

本试验的川芎样品均取自四川省敖平镇川芎培养基地。

1.2 首要试剂

甲醇（剖析纯：成都长联化工试剂有限公司；色谱纯：Fisher Scientific），甲苯（优级纯，成都长联化工试剂有限公司），冰醋酸（优级纯，成都市科龙化工试剂厂），阿魏酸对照品（我国药品生物制品检定所，批号：0773-9708），盐酸（优级纯，成都金山化学试剂有限公司），硝酸银（剖析纯，成都市科龙化工试剂厂）。

1.3 首要仪器

电子恒温鼓风枯燥箱（上海精宏试验设备有限公司），Waters e2659高效液相色谱仪（美国）配Waters 2486检测器（美国），JA2003N型电子天平（1/1万，上海精细科学仪器有限公司），AUW220D型电子天平（1/10万，岛津公司），Millipore超纯水机（美国）。

2 办法与成果

2.1 田间处理及样品收集

于彭州市敖平镇选取一块典型的酸性川芎培养土壤作为试验用地，总面积约230 m2。本研讨设置4个试验组：1个空白组和3个处理组，别离标记为PCK、P1、P2和P3。在川芎栽种前，将试验用地分为4等块，向各地块均匀撒入生石灰，施用量别离为PCK：0 kg/hm2；P1：750 kg/hm2；P2：1125 kg/hm2；P3：1500 kg/hm2。施撒后翻地混匀。于川芎收获期，在各地块内以“S”形线路随机取5点，收集川芎全株，天然风干，去除地上部分以及沙砾、须根等异物，切片，枯燥、破坏，得到川芎供试品。

2.2 查看

2.2.1 水分

精细称取药材粉末（过二号筛）12 g，置圆底烧瓶中，加甲苯约200 ml，并参加枯燥、洁净的沸石数粒。圆底烧瓶顺次衔接水分测定管以及冷凝管。自冷凝管顶端参加甲苯，至充溢水分测定管狭细部分。将圆底烧瓶置电热套中缓慢加热，待甲苯开端欢腾时，调理温度，使每秒钟馏出2滴。待测定管刻度部分的水量不再添加时，将冷凝管内部用甲苯冲刷，再用饱蘸甲苯的长刷将管壁上附着的甲苯推下，持续蒸馏5 min，放冷至室温，拆开设备，放置，待水与甲苯彻底别离。检读水量，核算含水量（%）。

2.2.2 总灰分与酸不溶灰分

精细称取药材粉末（过二号筛）4 g，置炽灼至恒重的坩埚中，称定分量。慢慢火热至彻底炭化时，逐步升高温度至600℃，使彻底灰化并至恒重。依据残渣分量，核算川芎供试品中总灰分含量（%）。取以上灰分，在坩埚中当心参加稀盐酸约10 ml，用表面皿掩盖坩埚，置水浴上加热10 min，表面皿用热水5 ml冲刷，洗液并入坩埚中，用无灰滤纸滤过，坩埚内的残渣用水洗于滤纸上，并洗刷至洗液不显氯化物反响停止。滤渣连同滤纸移置同一坩埚中，枯燥炽灼至恒重。依据残渣分量，核算川芎供试品中酸不溶性灰分的含量（%）。

2.3 浸出物

取药材粉末（过四号筛）3 g，精细称定，置100 ml的锥形瓶中，精细加70%乙醇50 ml，密塞，称定分量，静置1 h，衔接回流冷凝管，加热至欢腾，并坚持微沸1 h。放冷后，取下锥形瓶，密塞，再称定分量，用70%乙醇补足减失的分量，摇匀，用枯燥滤器滤过，精细量取滤液25 ml，置于枯燥至恒重的蒸发皿中，在水浴上蒸干后，于105℃枯燥3 h，置枯燥器中冷却30 min，敏捷精细称定分量。以枯燥品核算川芎供试品中醇溶性浸出物的含量（%）。

2.4 阿魏酸含量测定

2.4.1 色谱条件

Waters Symmetry C18色谱柱（4.6 mm×150 mm，5 μm），活动相为甲醇-1%醋酸溶液（20∶80），检测波长为230 nm，柱温30℃，进样量为10 μl。该色谱条件下，样品中阿魏酸与其他成分到达基线别离。对照品及川芎样品的高效液相色谱图如图1。

2.4.2 对照品溶液制备

取阿魏酸对照品适量，精细称取20 mg，置100 ml棕色量瓶中，用70%甲醇水溶液稀释至刻度，摇匀，得对照品储藏液。精细量取储藏液1 ml，置10 ml棕色量瓶中，用70%甲醇水溶液稀释至刻度，摇匀，得对照品溶液。

2.4.3 供试品溶液制备

取药材粉末（过四号筛）适量，精细称取0.5 g，置具塞锥形瓶中，精细参加70%甲醇50 ml，密塞，称定分量，加热回流30 min，放冷，再称定分量，用70%甲醇补足减失的分量，摇匀，静置，取上清液，滤过，取续滤液，即得。

2.4.4 办法学考察

2.4.4.1 线性及规模考察 精细汲取对照品溶液3、5、10、15、20 μl，注入HPLC色谱仪。以峰面积（A）对剖析物质量浓度（C）做线性回归，如图2，成果标明阿魏酸在0.062～0.411 μg规模内，线性联系杰出。

图2 阿魏酸对照品峰面积及线性联系图

1.阿魏酸

2.4.4.2 精细度试验 精细汲取对照品溶液10 μl，注入HPLC色谱仪，接连进样6次，核算对照品中阿魏酸峰面积的RSD为0.61%。

2.4.4.3 重复性试验 精细称取编号为PCK的川芎药材粉末6份，按“2.4.3”项下办法制备供试品溶液，别离进样10 μl，核算供试品中阿魏酸峰面积的RSD为1.25%。

2.4.4.4 稳定性试验 按“2.4.3”项下办法制备供试品溶液，别离于0、2、4、8、12、24 h进样10 μl，核算供试品中阿魏酸峰面积的RSD为0.78%。

2.4.4.5 加样收回试验 取已知阿魏酸含量的川芎药材粉末适量，精细称取0.2 g，共6份，置具塞锥形瓶中。别离参加阿魏酸对照品5 ml后，按“2.4.3”项下办法制备供试品溶液，依法测定，成果见表1，核算收回率。收回率（%）=（加样后测得量-样品中阿魏酸量）/加样量×100%。

表1 加样收回试验

2.5 测定成果

依照以上办法对川芎样品各项目标进行测定，成果见表2。

表2 川芎样品各目标测定成果

*系指2010版《我国药典》川芎项下目标

由表2可知，各组川芎样品的各项目标均契合《药典》（2010版）川芎项下定量要求。相关于PCK组，各处理组的含水量及酸不溶灰分含量有必定的升高，总灰分含量下降，浸出物及阿魏酸含量升高。P1、P2、P3组浸出物含量别离升高12.15%、7.99%、10.07%，阿魏酸含量别离升高0.88%、3.95%、21.93%，各组阿魏酸含量随生石灰的施用量增大而升高。升高量（%）=（处理组测得量-PCK组测得量）/PCK组测得量×100%。

3 评论

3.1 测定川芎各目标的办法

本试验严厉依照《药典》（2010版）川芎项下办法对川芎样品的水分、灰分、浸出物和阿魏酸含量进行测定和剖析，重现性及稳定性杰出。川芎中化学成分较杂乱，其间阿魏酸、川芎嗪和藁本内酯是公认的首要药效成分[9]，但因为川芎嗪含量太低，仅占生药量的0.01%～0.02%，且具有提高性，藁本内酯不稳定，可发作脱氢、氧化、水解、降解等异构化反响[10-11]，所以本试验参照《药典》（2010版）要求以阿魏酸含量作为点评川芎药用质量的参阅目标。

3.2 生石灰对川芎质量的影响

由以上测定成果可知，施用生石灰后，川芎药材质量契合《药典》（2010版）中川芎项下定量要求，且浸出物及阿魏酸含量升高。相关于PCK组，处理组的含水量及灰分含量有必定的改变，但均低于《药典》（2010版）中的定量要求，故可认为此改变未对川芎的药用质量形成影响。已有研讨标明，施用石灰可下降土壤中重金属活性，添加土壤对重金属的吸附效果，一起还具有改进土壤结构，调理土壤营养，促进作物的成长的功用[12-14]。川芎浸出物及阿魏酸含量升高，可能与生石灰促进川芎成长，使其根茎生物量添加有关。成果提示，施用生石灰对川芎药材质量无不良影响，生石灰可用于改进酸性的川芎培养土壤。

[参阅文献]

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（收稿日期：2014-08-05 本文修改：郭静娟）