大肠埃希菌怎样医治：腹泻综合征致泻性大肠埃希菌血清型散布及耐药性的研讨
周敬纲 贾美丽 杨静
[摘要] 意图 评论腹泻综合征致泻性大肠埃希菌的血清型散布及耐药性，为临床合理运用抗生素供给依据。 办法 选取719份未运用抗生素腹泻患者的稀便、水样便、黏脓便或脓血便标本作为研讨目标，经过増菌、各种选择性培育基挑选、生化实验，对契合株进行致泻性大肠埃希菌的血清型分型，然后进行药敏实验。 成果 本次检测共检出65株血清凝聚致泻性大肠埃希菌，分属EPEC、EIEC、ETEC，以EPEC为主，占83.08%，共8个血清型，其间血清型O55：H59、O128：H67占58.47%，药物灵敏性高的抗生素为CFX（87.7%）、CTX（83.1%）和CIP（86.2%），耐药性高的抗生素为TET（56.9%）、GEN（69.2%）和NAL（52.3%）。 定论 本区域腹泻综合征中血清学阳性致泻性大肠埃希菌以EPEC为主，常见血清型为O55：H59、O128：H67。腹泻综合征致泻性大肠埃希菌对抗生素的灵敏性差异较大，其间检测菌株对CFX、CTX和CIP具有较高灵敏性。
[关键词] 致泻大肠埃希菌；血清型；耐药性
[中图分类号] R378.2+1 [文献标识码] A [文章编号] 1674-4721（2014）11（c）-0144-03
[Abstract] Objective To explore the serotype distribution and drug resistance of diarrheagenic Escherichia coli in diarrhea，and provide scientific basis for the reasonable use of antibiotics in clinic. Methods 719 specimens with watery， sticky purulent or bloody purulent stool without the use of antibiotics in diarrhea from May 2012 to April 2013 was selected as research object，which was bacteria-proliferated，filtrated from kinds of selective medium and treated with biochemical test.The fit samples of diarrheagenic Escherichia coli was serotyped and then treated with drug sensitive test. Results 65 strains of serum agglutination diarrheagenic Escherichia coli were detected，which could be assigned to EPEC、EIEC and ETEC respectively.The main part of these strains was EPEC and accounted for 83.08%.There were eight serotypes in total，serotype of O55：H59 and O128：H67 accounted for 58.47%.The antibiotic of high drug sensitivity was CFX （87.7%），CTX （83.1%） and CIP （86.2%）.The antibiotic of high drug tolerance was TET（56.9%），GEN（69.2%） and NAL（52.3%）. Conclusion The main serological positive diarrheagenic Escherichia coli of the local diarrhea syndrome is EPEC，the common serotypes are O55：H59 and O128：H67.The distinctions of the sensitivities of diarrheagenic Escherichia coli to antibiotics are large，and CFX， CTX and CIP has a high sensitivity for the detection of strains.
[Key words] diarrheagenic Escherichia coli；Serum type；Drug resistance
致泻性大肠埃希菌生计与人和动物的肠道中，随粪便排出而污染水源、土壤、食物、用具等，人群对致泻性大肠埃希菌遍及易感，依据其致病机制，致泻大肠埃希菌至少可分为5个类型[1]：肠产毒素大肠埃希菌（ETEC）、肠致病性大肠埃希菌（EPEC）、肠侵袭性大肠埃希菌（EIEC）、肠出血性大肠埃希菌（EHEC）、肠集聚性黏附性大肠埃希菌（EAEC）。其间，ETEC是发展我国家婴幼儿及旅游者腹泻的首要病原，EPEC是婴儿腹泻的首要病原，EIEC首要引起较大儿童和成人腹泻[2-6]。为了解本区域腹泻综合征中致泻性大肠埃希菌的血清型散布及药物灵敏情况，本研讨选取本区域腹泻综合征监测医院门诊未运用抗生素腹泻患者的稀便、水样便、黏脓便或脓血便等719份标本作为研讨目标，旨在为腹泻病的防治对策供给科学依据。
1 材料与办法
1.1 一般材料
选取本区域2012年5月～2013年4月腹泻综合征监测医院门诊未运用抗生素腹泻患者的稀便、水样便、黏脓便或脓血便等719份标本作为研讨目标，其间7岁以下婴幼儿618份，7岁以上儿童及成人101份。别离到含毒力基因致泻性大肠埃希菌65株，其间7岁以下婴幼儿59株，7岁以上儿童及成人6株。endprint
1.2 办法
1.2.1 别离 用无菌拭子收集少数粪便直接接种麦康凯（MAC）琼脂平板和O157显色平板上，温度（36±1）℃，培育18～24 h。
1.2.2 增菌 用无菌拭子收集少数粪便接种mEC肉汤增菌液，温度（36±1）℃，培育6 h后，取1 ml用O157免疫磁珠进行富集后，接种于O157显色平板和MAC平板18～24 h。
1.2.3 挑取可疑菌落 挑取MAC琼脂平板上发酵乳糖的桃红色、不透明的可疑菌落或O157显色平板上紫红色或淡紫色、中等巨细菌落进行生化初筛实验。
1.2.4 生化初筛 但凡TSI斜面产酸或不产酸、底层产酸、不发生H2S的菌株，进行IMViC实验，成果为（++--）或（-+--），尿素（-）。
1.2.5 血清型分型 经过上述实验对契合致泻大肠埃希菌的纯培育物，用相应的致泻大肠O多价、O单价、K、H确诊血清进行血清玻片凝聚实验。
1.2.6 药敏实验 纸片琼脂分散法（K-B法）。选用临床与实验室标准化协会（CLSI）引荐的8种抗革兰氏阴性菌抗生素：头孢西丁（CFX）、头孢噻肟（CTX）、四环素（TET）、庆大霉素（GEN）、氯霉素（CHL）、环丙沙星（CIP）、萘啶酸（NAL）、甲氧苄啶/磺胺甲唑（TMP/SMZ）进行药敏实验。质控菌株：大肠埃希菌ATCC25922。
1.3 计算学处理
选用SPSS 13.0计算软件对数据进行剖析，计数材料选用χ2查验，以P<0.05为差异有计算学含义。
2 成果
2.1 血清型分型
本次检测别离到血清凝聚致泻性大肠埃希菌65株，占所检标本总数的9.04%，其间EPEC检出率为7.51%，EIEC检出率为0.97%，ETEC检出率为0.56%。65株血清凝聚致泻性大肠埃希菌别离出的EPEC、EIEC、ETEC共分8种O血清型，其间EPEC分为6种不同血清型，首要血清型为O55：H59、O128：H67；EIEC和ETEC各别离出1种血清型（表1）。
2.2 药敏实验
65株致泻性大肠埃希菌抗生素药物灵敏全体情况为：灵敏性高的抗生素为CFX（87.7%）、CTX（83.1%）和CIP（86.2%），耐药性高的抗生素为TET（56.9%）、GEN（69.2%）和NAL（52.3%），CFX与CTX的灵敏性比较，差异无计算学含义（P>0.05）；CIP和NAL的耐药性比较，差异有计算学含义（P<0.01）；CHL（58.5%）和TMP/SMZ（53.8%）药物灵敏性比较，差异无计算学含义（P>0.05）；8种抗生素药敏中介株灵敏率介于1.5%～12.3%之间（表2）。
3 评论
大肠埃希菌感染全年均可发病，但大多发生于5～10月，其间7～9月为发病高峰期。致泻性大肠埃希菌生计于人和动物的肠道中，人群遍及易感，可引起急性胃炎、急性菌痢、出血性肠炎等，传达要素多种多样，可经过水、食物、日常生活用品、苍蝇等进行传达，还可经过触摸动物或带菌者传达。
本次检测共别离到血清凝聚致泻大肠埃希菌65株（9.04%），与国内相关报导根本契合[7-8]。65株分别为EPEC、EIEC、ETEC三种类型，其构成比为83.08%、 10.77%、 6.15%；血清型共分8种，其间EPEC分为6种不同血清型，首要血清型为O55：H59（38.46%）、O128：H67（20.00%）；EIEC（O28：H73）和ETEC（O8：H47）各1种血清型。成果显现，本区域2012～2013年腹泻样本中致泻性大肠埃希菌以EPEC为优势菌群。
相关文献报导，致泻大肠埃希菌对临床常用抗生素的耐药性不断添加，对氨基糖苷类抗生素的耐药性在70%左右[9-10]，对TET、CHL、NAL、TMP/SMZ等的耐药率也较高[11-12]，多重耐药菌株感染逐步增多[13]。
本次检测成果显现，本区域腹泻综合征致泻性大肠埃希菌对TET、GEN和NAL有较高的耐药性，这与相关报导类似[14-15]，而对CFX、CTX和CIP的耐药性很低。在致泻性大肠埃希菌感染临床用药方面，要结合药敏实验成果，选用灵敏的抗生素，合理进行医治。
综上所述，致泻性大肠埃希菌在腹泻中占有重要位置，临床应予以注重，关于腹泻患者，应进行致泻性大肠埃希菌检测，并依据检测成果选用效果必定、针对性强的窄谱抗生素进行医治，以削减耐药菌株的发生，一起也应慎重合理运用抗生素，避免形成肠道菌群失调或二重感染。
[参考文献]
[1] Campos LC，Franzolin MR，Trabulsi LR.Diarrheagenic Escherichia coli categories among the traditional enteropath- ogenic E.coli serogroups-A review[J]. Mem Inst Oswaldo Cruz，2004，99（6）：545-552.
[2] 倪宏.42例小儿腹泻的临床研讨[J].我国医学立异，2012， 9（8）：121.
[3] 龚可胜.消旋卡多曲医治48例成人急性腹泻患者的效果查询[J].我国医学立异，2012，9（8）：44-45.
[4] 朱晓云.临沂市感染性腹泻病原菌查询剖析[J].工作与健康，2007，23（15）：1321-1323.
[5] 任春阳.EPEC相关毒力基因与腹泻的相关性[D].温州：温州医学院，2007.
[6] 杨锦红，任春阳，王军.肠致病性大肠埃希菌血清型散布及耐药性剖析[J].实验与查验医学，2008，26（2）：143-144.
[7] 张英.消旋卡多曲医治秋季腹泻的临床研讨[J].我国医学立异，2012，9（22）：28-29.
[8] 靳晓红，崔玉玲，李彦，等.济南区域3种致泻性大肠埃希菌的血清型剖析[J].临床查验杂志，2013，31（4）：319.
[9] 曹弟勇，徐彬.大肠埃希菌临床感染散布特征及耐药性剖析[J].医学查验与临床，2010，7（2）：98-100.
[10] 蒋鸿超，黄海林，奎莉越，等.701株儿童感染大肠埃希菌的临床散布和耐药性剖析[J].儿科医学杂志，2013，19（12）：38-40.
[11] 张鞠玲，崔恩博，鲍春梅，等.致泻性大肠埃希菌的散布及耐药特色研讨[J].流行症信息，2012，25（3）：180-182.
[12] 于国慧，董芳，刘锡清，等.2009年北京区域儿童感染性腹泻病原学及耐药性剖析[J].我国小儿急救医学，2011， 18（1）：33-35.
[13] 赵雪涛，闵红芳，张春华，等.致泻性大肠埃希菌抗生素灵敏实验比较与剖析[J].我国卫生查验杂志，2013，23（14）：3000-3003.
[14] 孙迎军.2006至2009年濮阳市肠道致泻菌耐药情况查询[J].我国有用医刊，2010，37（23）： 84-85.
[15] 顾松叶，石亚素，龚红霞.舟山海岛腹泻患者的病原菌监测及致泻大肠埃希菌药敏实验[J].我国卫生查验杂志，2007，17（9）：1670-1671.
（收稿日期：2014-10-09 本文修改：祁海文）endprint
1.2 办法
1.2.1 别离 用无菌拭子收集少数粪便直接接种麦康凯（MAC）琼脂平板和O157显色平板上，温度（36±1）℃，培育18～24 h。
1.2.2 增菌 用无菌拭子收集少数粪便接种mEC肉汤增菌液，温度（36±1）℃，培育6 h后，取1 ml用O157免疫磁珠进行富集后，接种于O157显色平板和MAC平板18～24 h。
1.2.3 挑取可疑菌落 挑取MAC琼脂平板上发酵乳糖的桃红色、不透明的可疑菌落或O157显色平板上紫红色或淡紫色、中等巨细菌落进行生化初筛实验。
1.2.4 生化初筛 但凡TSI斜面产酸或不产酸、底层产酸、不发生H2S的菌株，进行IMViC实验，成果为（++--）或（-+--），尿素（-）。
1.2.5 血清型分型 经过上述实验对契合致泻大肠埃希菌的纯培育物，用相应的致泻大肠O多价、O单价、K、H确诊血清进行血清玻片凝聚实验。
1.2.6 药敏实验 纸片琼脂分散法（K-B法）。选用临床与实验室标准化协会（CLSI）引荐的8种抗革兰氏阴性菌抗生素：头孢西丁（CFX）、头孢噻肟（CTX）、四环素（TET）、庆大霉素（GEN）、氯霉素（CHL）、环丙沙星（CIP）、萘啶酸（NAL）、甲氧苄啶/磺胺甲唑（TMP/SMZ）进行药敏实验。质控菌株：大肠埃希菌ATCC25922。
1.3 计算学处理
选用SPSS 13.0计算软件对数据进行剖析，计数材料选用χ2查验，以P<0.05为差异有计算学含义。
2 成果
2.1 血清型分型
本次检测别离到血清凝聚致泻性大肠埃希菌65株，占所检标本总数的9.04%，其间EPEC检出率为7.51%，EIEC检出率为0.97%，ETEC检出率为0.56%。65株血清凝聚致泻性大肠埃希菌别离出的EPEC、EIEC、ETEC共分8种O血清型，其间EPEC分为6种不同血清型，首要血清型为O55：H59、O128：H67；EIEC和ETEC各别离出1种血清型（表1）。
2.2 药敏实验
65株致泻性大肠埃希菌抗生素药物灵敏全体情况为：灵敏性高的抗生素为CFX（87.7%）、CTX（83.1%）和CIP（86.2%），耐药性高的抗生素为TET（56.9%）、GEN（69.2%）和NAL（52.3%），CFX与CTX的灵敏性比较，差异无计算学含义（P>0.05）；CIP和NAL的耐药性比较，差异有计算学含义（P<0.01）；CHL（58.5%）和TMP/SMZ（53.8%）药物灵敏性比较，差异无计算学含义（P>0.05）；8种抗生素药敏中介株灵敏率介于1.5%～12.3%之间（表2）。
3 评论
大肠埃希菌感染全年均可发病，但大多发生于5～10月，其间7～9月为发病高峰期。致泻性大肠埃希菌生计于人和动物的肠道中，人群遍及易感，可引起急性胃炎、急性菌痢、出血性肠炎等，传达要素多种多样，可经过水、食物、日常生活用品、苍蝇等进行传达，还可经过触摸动物或带菌者传达。
本次检测共别离到血清凝聚致泻大肠埃希菌65株（9.04%），与国内相关报导根本契合[7-8]。65株分别为EPEC、EIEC、ETEC三种类型，其构成比为83.08%、 10.77%、 6.15%；血清型共分8种，其间EPEC分为6种不同血清型，首要血清型为O55：H59（38.46%）、O128：H67（20.00%）；EIEC（O28：H73）和ETEC（O8：H47）各1种血清型。成果显现，本区域2012～2013年腹泻样本中致泻性大肠埃希菌以EPEC为优势菌群。
相关文献报导，致泻大肠埃希菌对临床常用抗生素的耐药性不断添加，对氨基糖苷类抗生素的耐药性在70%左右[9-10]，对TET、CHL、NAL、TMP/SMZ等的耐药率也较高[11-12]，多重耐药菌株感染逐步增多[13]。
本次检测成果显现，本区域腹泻综合征致泻性大肠埃希菌对TET、GEN和NAL有较高的耐药性，这与相关报导类似[14-15]，而对CFX、CTX和CIP的耐药性很低。在致泻性大肠埃希菌感染临床用药方面，要结合药敏实验成果，选用灵敏的抗生素，合理进行医治。
综上所述，致泻性大肠埃希菌在腹泻中占有重要位置，临床应予以注重，关于腹泻患者，应进行致泻性大肠埃希菌检测，并依据检测成果选用效果必定、针对性强的窄谱抗生素进行医治，以削减耐药菌株的发生，一起也应慎重合理运用抗生素，避免形成肠道菌群失调或二重感染。
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[15] 顾松叶，石亚素，龚红霞.舟山海岛腹泻患者的病原菌监测及致泻大肠埃希菌药敏实验[J].我国卫生查验杂志，2007，17（9）：1670-1671.
（收稿日期：2014-10-09 本文修改：祁海文）endprint
1.2 办法
1.2.1 别离 用无菌拭子收集少数粪便直接接种麦康凯（MAC）琼脂平板和O157显色平板上，温度（36±1）℃，培育18～24 h。
1.2.2 增菌 用无菌拭子收集少数粪便接种mEC肉汤增菌液，温度（36±1）℃，培育6 h后，取1 ml用O157免疫磁珠进行富集后，接种于O157显色平板和MAC平板18～24 h。
1.2.3 挑取可疑菌落 挑取MAC琼脂平板上发酵乳糖的桃红色、不透明的可疑菌落或O157显色平板上紫红色或淡紫色、中等巨细菌落进行生化初筛实验。
1.2.4 生化初筛 但凡TSI斜面产酸或不产酸、底层产酸、不发生H2S的菌株，进行IMViC实验，成果为（++--）或（-+--），尿素（-）。
1.2.5 血清型分型 经过上述实验对契合致泻大肠埃希菌的纯培育物，用相应的致泻大肠O多价、O单价、K、H确诊血清进行血清玻片凝聚实验。
1.2.6 药敏实验 纸片琼脂分散法（K-B法）。选用临床与实验室标准化协会（CLSI）引荐的8种抗革兰氏阴性菌抗生素：头孢西丁（CFX）、头孢噻肟（CTX）、四环素（TET）、庆大霉素（GEN）、氯霉素（CHL）、环丙沙星（CIP）、萘啶酸（NAL）、甲氧苄啶/磺胺甲唑（TMP/SMZ）进行药敏实验。质控菌株：大肠埃希菌ATCC25922。
1.3 计算学处理
选用SPSS 13.0计算软件对数据进行剖析，计数材料选用χ2查验，以P<0.05为差异有计算学含义。
2 成果
2.1 血清型分型
本次检测别离到血清凝聚致泻性大肠埃希菌65株，占所检标本总数的9.04%，其间EPEC检出率为7.51%，EIEC检出率为0.97%，ETEC检出率为0.56%。65株血清凝聚致泻性大肠埃希菌别离出的EPEC、EIEC、ETEC共分8种O血清型，其间EPEC分为6种不同血清型，首要血清型为O55：H59、O128：H67；EIEC和ETEC各别离出1种血清型（表1）。
2.2 药敏实验
65株致泻性大肠埃希菌抗生素药物灵敏全体情况为：灵敏性高的抗生素为CFX（87.7%）、CTX（83.1%）和CIP（86.2%），耐药性高的抗生素为TET（56.9%）、GEN（69.2%）和NAL（52.3%），CFX与CTX的灵敏性比较，差异无计算学含义（P>0.05）；CIP和NAL的耐药性比较，差异有计算学含义（P<0.01）；CHL（58.5%）和TMP/SMZ（53.8%）药物灵敏性比较，差异无计算学含义（P>0.05）；8种抗生素药敏中介株灵敏率介于1.5%～12.3%之间（表2）。
3 评论
大肠埃希菌感染全年均可发病，但大多发生于5～10月，其间7～9月为发病高峰期。致泻性大肠埃希菌生计于人和动物的肠道中，人群遍及易感，可引起急性胃炎、急性菌痢、出血性肠炎等，传达要素多种多样，可经过水、食物、日常生活用品、苍蝇等进行传达，还可经过触摸动物或带菌者传达。
本次检测共别离到血清凝聚致泻大肠埃希菌65株（9.04%），与国内相关报导根本契合[7-8]。65株分别为EPEC、EIEC、ETEC三种类型，其构成比为83.08%、 10.77%、 6.15%；血清型共分8种，其间EPEC分为6种不同血清型，首要血清型为O55：H59（38.46%）、O128：H67（20.00%）；EIEC（O28：H73）和ETEC（O8：H47）各1种血清型。成果显现，本区域2012～2013年腹泻样本中致泻性大肠埃希菌以EPEC为优势菌群。
相关文献报导，致泻大肠埃希菌对临床常用抗生素的耐药性不断添加，对氨基糖苷类抗生素的耐药性在70%左右[9-10]，对TET、CHL、NAL、TMP/SMZ等的耐药率也较高[11-12]，多重耐药菌株感染逐步增多[13]。
本次检测成果显现，本区域腹泻综合征致泻性大肠埃希菌对TET、GEN和NAL有较高的耐药性，这与相关报导类似[14-15]，而对CFX、CTX和CIP的耐药性很低。在致泻性大肠埃希菌感染临床用药方面，要结合药敏实验成果，选用灵敏的抗生素，合理进行医治。
综上所述，致泻性大肠埃希菌在腹泻中占有重要位置，临床应予以注重，关于腹泻患者，应进行致泻性大肠埃希菌检测，并依据检测成果选用效果必定、针对性强的窄谱抗生素进行医治，以削减耐药菌株的发生，一起也应慎重合理运用抗生素，避免形成肠道菌群失调或二重感染。
[参考文献]
[1] Campos LC，Franzolin MR，Trabulsi LR.Diarrheagenic Escherichia coli categories among the traditional enteropath- ogenic E.coli serogroups-A review[J]. Mem Inst Oswaldo Cruz，2004，99（6）：545-552.
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（收稿日期：2014-10-09 本文修改：祁海文）endprint