胱抑素C偏低 免疫透射比浊法与散射比浊法检测血清胱抑素C的方法学比较
刘雯 龚玲 曹伟 俞莹 应筱雯 鲍彩丽 杜山青
[摘要] 意图 对免疫透射比浊法测定血清胱抑素C的办法学功能行开始点评，并与免疫散射比浊法进行比较。 办法 运用Rohe Modular P全主动生化剖析仪与SIEMENS BN ProSpec特定蛋白仪别离对血清胱抑素C进行开始的办法学点评，包含精密度、线性回归实验、收回实验、搅扰实验。 成果 免疫透射比浊法和免疫散射比浊法无论是批内仍是批间精密度均契合要求，CV均<4.5%；2种办法从低检测规模到高检测规模，均有着杰出的线性回归，斜率均接近于1，截距均接近于0，R2均>0.95；免疫透射比浊法与免疫散射比浊法的收回率均>96%；搅扰物实验成果显现血红蛋白、三酰甘油及胆红素均对测定无显着影响。 定论 免疫透射查验的活络度较高，检测规模广，与免疫散射实验的成果根本共同，体系误差小、抗搅扰才能强，且愈加快速、有用和便当。
[关键词] 免疫透射比浊法；免疫散射比浊法；血清胱抑素C；办法学；查验
[中图分类号] R446.6 [文献标识码] B [文章编号] 1673-9701（2017）21-0096-03
Methodological comparison of transmitted immunoturbidimetric assay and scatter turbidimetric assay in the determination of serum cystatin C
LIU Wen GONG Ling CAO Wei YU Ying YING Xiaowen BAO Caili DU Shanqing
Clinical Laboratory， Yangpu Hospital Affiliated to Tongji University， Shanghai 200093， China
[Abstract] Objective To initially evaluate the methodological properties of serum cystatin C by transmitted immunoturbidimetric assay and compare it with scatter turbidimetric assay. Methods Methodological evaluation was carried out for the serum cystatin C by Rohe Modular P automatic biochemical analyzer and SIEMENS BN ProSpec specific protein instrument， including precision， linear regression test， recovery test and interference test. Results Transmitted immunoturbidimetric assay and scatter turbidimetric assay both conformed to the requirements of intra-or inter-batch precision， and CV was <4.5%； the two methods had good linear regression from the low detection range to the high detection range， the slope was both close to 1， the intercept was both close to 0， and R2 was both>0.95； the recovery rates of transmitted immunoturbidimetric assay and scatter turbidimetric assay were both>96%； interferent test results showed that hemoglobin， triglyceride and bilirubin had no significant effects on the determination. Conclusion The sensitivity of immune transmission test is high， the detection range is wide， which is consistent with the result of scatter turbidimetric assay. The system error is small， the anti-interference ability is strong， and it is more rapid， practical and convenient.
[Key words] Transmitted immunoturbidimetric assay； Scatter turbidimetric assay； Serum cystatin C； Methodology； Test
胱抑素C（CysC）又稱为半胱氨酸蛋白酶抑制剂C。近年来，因为高血压、糖尿病发病率的上升，其作为抱负的反映肾小球滤过率的活络目标日益遭到临床注重，国外对CysC的临床运用报导较多，以为其血浓度能够较精确地反映GFR[1-3]。现在已树立的多种测定办法，包含免疫荧光测定（FIA）、酶联免疫吸附法（ELISA）、免疫透射比浊法（PETIA）与免疫散射比浊法（PENIA），咱们运用Rohe Modular P全主动生化剖析仪与SIEMENS BN ProSpec特定蛋白仪对CysC进行了开始的办法学比较[4-5]，现将成果报导如下。
1 材料与办法
1.1 仪器
免疫透射比浊法运用Rohe Modular P全主动生化剖析仪、免疫散射比浊法运用SIEMENS BN ProSpec特定蛋白仪。
1.2 试剂
均为仪器配套试剂，其间BN-P的质控品来历于配套试剂盒；Modular P的质控品来历于上海市临床查验中心。罗氏与西门子的CysC校准品值可溯源至ERM-DA472。
1.3 标本来历
标本均来自2016年1～10月的我院住院患者标本。
1.4 办法
1.4.1 两种办法的批内精密度测定 将Modular P生化剖析仪上的CysC低值、高值质控品及BN ProSpec特定蛋白仪上的CysC低值、高值质控品接连测定20次用于核算批内精密度。
1.4.2 两种办法的批间精密度测定 将Modular P生化剖析仪上的CysC低值、高值质控品以及BN ProSpec特定蛋白仪上的CysC低值、高值质控品每天测定5次，每次距离>1 h，接连测定4 d用于核算批间精密度。
1.4.3 两种办法的线性剖析 取2种不同办法的低浓度（接近于检测下限）和高浓度标本，按5/5 L+0/5 H、4/5 L+1/5 H、3/5 L+2/5 H、2/5 L+1/5 H、1/5 L+4/5 H、0/5 L+5/5 H的份额装备样本，对样本进行检测，每个样本检测3次，取均值作为终究成果。依据装备联系核算预期样本量，并以之为横轴，实践均匀值为纵轴制造回归剖析模型。
1.4.4 两种办法的收回实验 取混合血清样本参加等体积、不同浓度的CysC规范液，参加规范液浓度别离为1/2原规范液浓度，核算收回率。
1.4.5 两种办法的搅扰实验 选用新鲜全血装备成搅扰物，分为5.0 g/L、10.0 g/L两种血红蛋白浓度；胆红素搅扰物直接运用罗氏Cfas冻干规范品；三酰甘油酯搅扰物直接运用脂肪注射液，用0.9%NACL直接配制成浓度为4.7 mmol/L和9.5 mmol/L搅扰物，别离用免疫透射比浊法和免疫散射比浊法进行搅扰实验。
1.5 计算学剖析
运用SPSS13.0计算软件包进行数据处理，选用描述性剖析，偏态散布计量材料用中位数表明，计数材料用%表明，两种查验计划别离选用CysC线性实验剖析并制作线形图，查验值α=0.05。
2 成果
2.1 免疫透射比浊法和免疫散射比濁法的批内精密度点评
批内比照显现，散射比浊法的低值质控品和高值质控品的CV值均略高于透射比浊法，但两组比照差异无计算学含义（P>0.05）。
2.2 免疫透射比浊法和免疫散射比浊法的批间精密度比较
批间比照显现，散射比浊法的低值质控品和高值质控品的CV值均略高于透射比浊法，但两组比照差异无计算学含义（P>0.05）。
2.3 免疫散射比浊法检测CysC线性实验剖析
散射比浊法的CysC线性实验R2=0.99197，透射比浊法的CysC线性实验R2=0.99231
2.4 收回实验（免疫散射比浊法）
取混合血清标本（CysC浓度为1.12 mg/L）参加0.176 mg/L、0.885 mg/L、1.764 mg/L、浓度的规范液，并参加50%浓度的规范液，均匀收回率为97.0%。
2.5 收回实验（免疫透射比浊法）
取混合血清标本（CysC浓度为0.966 mg/L）参加0.377 mg/L、1.510 mg/L、3.525 mg/L浓度的规范液，并参加50%浓度的规范液，均匀收回率为98.2%。
2.6 搅扰实验
3 评论
散射比浊法和透射比浊法的原理有所差异，前者是运用光线被液体粒子折射后的偏转视点来判别相关成分的含量，而后者则主要是检测复合物成分对光线的吸收率来剖析成分[6-7]。以往以为免疫透射查验尽管具有必定优势，但存在查验规模狭隘、活络度较低的缺点，主要是因为查验复合物并不能彻底阻挠光线的经过或复合物过少导致浊度改变难以表现。近年来，跟着查验医学的日趋开展，全主动生化仪现在的技能已十分老练[8-9]。
以往普遍以为免疫透射比浊法的活络度不行抱负，检测规模不行宽，原因是免疫复合物颗粒太小阻挠不了光线的经过；或是免疫复合物的数量太少，其浊度改变对光通量的透过影响不大，特别是在低浓度时愈加显着[10-11]。而在抗原过量情况下，透射比浊法易呈现钩状效应而导致成果偏低。而在速率散射比浊法检测时，仪器规划有抗原过量检测体系，抗原过量时会提示样本稀释，然后到达检测成果的精确性和精密度[12-13]。由此，在比较实验中，速率散射比浊法在低浓度和高浓度测定中能够得到较为精确的成果。可是，在底层医疗单位，常常没有条件满意运用散射比浊法测定特定蛋白，运用免疫透射比浊法检测就显得愈加重要。其次，跟着查验医学的日趋开展，查验质量管理已规范化，实验室应注重不同检测办法之间检测成果是否存在共同性的问题[14]。从本文数据来看，能够看出免疫透射比浊法与免疫散射比浊法的相关性好，R2>0.95。其回归方程，斜率均接近于1，截距均接近于0；免疫透射比浊法无论是批内精密度仍是批间精密度都十分好，CV均<5%。
以往以为，因为免疫透射比浊法所选用的全主动生化剖析仪，可联合运用双波长检测、样本主动稀释，与样本空白对照检测，有助于最小化搅扰要素对检测的影响，而且本研讨挑选的试剂厂商，供给了全面具体的技能参数设置，在运用以上特定蛋白检测参数时，现已充沛运用仪器的各项技能条件，使临床上常见的搅扰物所能引起的搅扰降到了最小。而免疫散射比浊法对较大颗粒的CH，严峻溶血时的Hb搅扰等，仪器自身或许就存在缺乏，在检测试剂和仪器参数设置等方面，也未充沛进步临床抗搅扰物的实践才能[15]。因而，免疫散射比浊法的抗搅扰才能较弱，但仍是契合临床检测要求。但从本次研讨的搅扰实验的成果可知溶血、黄疸、脂血对2种办法的测定搅扰均很小。
免疫透射比浊法还有其他一些长处，如仪器出资本钱低，不需要另配专用的特定蛋白剖析仪；患者收费低；因为能够和生化样本兼并，故能够下降采血管的本钱；生化剖析仪的检测速度快，查验陈述时间短[16]。
因而，與免疫散射比浊法比较，免疫透射比浊法具有优秀的精密度，类似的剖析活络度和检测规模，杰出的相关性，抗搅扰才能小，体系误差小，且愈加有用和便利。
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（收稿日期：2017-04-12）