2018川贝母一克 中药川贝母中脂肪酸成分的GC—MS剖析
单文静+吴健
[摘要]意图 评论中药材川贝母中脂肪酸成分。办法 选用石油醚索氏抽提法提取中药材川贝母中的脂肪油，经三氟化硼乙醚甲醇溶液甲酯化处理，用气相色谱-质谱联用法（GC-MS）测定脂肪酸的组成。成果 试验共分出7个峰，断定了川贝母所含有的5种脂肪酸成分首要为豆蔻酸、棕榈酸、亚油酸、丁酸、硬酯酸。定论 川贝母药材中含有多种重要脂肪酸成分，为川贝母脂肪酸成分的运用供给理论依据。
[要害词]川贝母；脂肪酸；化学成分；气相色谱-质谱法
[中图分类号] R286.0 [文献标识码] A [文章编号] 1674-4721（2016）11（c）-0135-03
[Abstract]Objective To analyzed Fatty Acids components in Fritillaria cirrhosa D.Don by GC-MS.Methods The contents and chemical compositions of the Fatty Acids in Fritillaria cirrhosa D.Don were investigated and determined in this paper.Fatty oil was extracted with petroleum ether.The oil was determined by GC-MS after the preparation of the methyl esters with BF3-CH3-OH.Results The experimental results showed that there were seperated 7 peaks，5 components of fatty acids in the oil of Fritillaria cirrhosa D.Don.There were Hexadecanoic acid，Octadecanoic acid，Tetradecanoic acid，Butanoic acid，Stearicacid.Conclusion The exepriment reveals that there are some impotent fatty acids in Fritillaria cirrhosa D.Don.These results provide a theoretical basis for management and utilization of atty acids in FritillariacirrhosaD.Don.
[Key words]Fritillaria cirrhosa D.Don；Fatty Acid；Chemistry composition；GC-MS
川贝母系百合科植物川贝母Fritillaria cirrhosa D.Don的枯燥鳞茎[1]。川贝母也是川产道地药材中最具有代表性的药材之一，具有清热润肺，化痰止咳的效果，有“止咳圣药”之称。临床首要用于虚劳咳嗽、肺热燥咳、瘰疬、乳痈、肺痈[2]，现在，未发现关于其脂肪酸成分的研讨报导。脂肪酸在生命进程中具有非常重要的效果[3-6]。本文用气相色谱-质谱联用法（GC-MS）对川贝母中的脂肪酸进行了测定， 旨在为进一步研讨川贝母的质量规范，规范药物的运用奠定根底。
1仪器与试药
1.1仪器
GC-17A气相色谱仪（日本岛津公司），RE-52A旋转蒸腾仪器（上海亚荣生化仪器厂），QP5050A质谱仪（日本岛津公司），HH-2数显恒温水浴锅（常州国华仪器有限公司），SHB-Ⅲ循环水式多用真空泵（郑州长城仪器厂）。
1.2药品与试剂
川贝母药材2013年6月购买于哈尔滨三棵树药材专业商场，经哈尔滨商业大学生药学博士项峥判定，承认其为百合科植物川贝母Fritillaria cirrhosa D.Don的枯燥鳞茎。石油醚、氢氧化钠、三氟化硼乙醚、正己烷、氯化钠、甲醇、正十八烷等均为剖析纯试剂，山东禹王化学试剂有用公司出产，水为纯净水。
2办法与成果
2.1处理办法
取川贝母粗粉约5 g，精细称定，置于250 ml圆底烧瓶中，参加石油醚100 ml，80℃水浴锅中回流8 h，滤过，置于500 ml圆底烧瓶中，减压收回石油醚，得到脂肪油；参加0.5 mol/L氢氧化钠甲醇溶液5 ml，置80℃回流皂化40 min，至油珠悉数消失；再参加体积分数为15%的三氟化硼乙醚甲醇溶液2 ml，酯化反响15 min，放冷；精细参加正己烷5 ml反响5 min，取出，置于分液漏斗中，参加饱满氯化钠溶液5 ml，振摇，静置。精细量取上层溶液2 ml，置于10 ml量瓶中，正己烷稀释至刻度，摇匀，即得。
2.2色谱条件
色谱柱：DB-1石英毛细管柱（30 mm×0.25 mm，0.25 μm）（大连中汇达科学仪器有限公司）；进样口温度：290℃；升温程序：初始温度180℃，以5℃/min升至290℃保持10 min；载气：体积分数为99.999%的氦气；进样量：0.5 μl；分流比∶10∶1；流速：0.8 ml/min。
2.3 质谱条件
离子源：电子炮击离子源（EI），离子源温度：225℃，电子能量：75 eV，气相色谱质谱接口温度：235℃，质量扫描规模：m/z=35～510。
2.4成果
川貝母脂肪酸成分的测定选用脂肪酸甲酯化法对川贝母中脂肪酸成分进行别离、剖析，共别离得到7个色谱峰（图1）。
川贝母石油醚提取物甲酯化后的总离子流色谱图（TIC），依据 GC-MS 规范质谱数据库检索，断定每一种成分的化学结构，一切化合物的匹配度（≥60%），终推测出脂肪酸成分5个（表1）。
3评论
3.1脂肪油提取时刻的调查
选用石油醚（60～90℃）为提取溶剂，调查不同的提取时刻（4、8、12 h）对川贝母中各脂肪酸成分的影响，最终得出定论，提取时刻为8 h的条件下，川贝母中的脂肪酸提取率较高。
3.2 甲酯化办法的挑选
挑选甲醇为酯化试剂、三氟化硼为催化剂的甲醇-三氟化硼法进行酯化反响，办法简洁、快速[7]。
3.3 川贝母中脂肪酸的特色
川贝母中脂肪酸成分含量较高的依次为亚油酸和棕榈酸，其间亚油酸的含量最高。亚油酸和棕榈酸是川贝母的首要脂肪酸，占脂肪酸总量的92.64%，亚油酸是人体必需的但又不能在人体自行组成的不饱满脂肪酸，对血管壁功用的安稳与改进起着重要的效果[8]。
在川贝母中检测到肉豆蔻酸，能够从大豆发酵后的产品中提取纯化得到，现在现已证明其有很强的抗肿瘤效果，是一种极具商场前景的抗肿瘤药物[9-10]。
文献[11]经过肉豆蔻酸对过氧化氢诱导SH-SY5Y神经细胞损害的评论亦标明：20～40 μg/ml的肉豆蔻酸对过氧化氢诱导的SH-SY5Y神经细胞氧化损害具有维护效果。
现在人类健康遭到严重威胁的疾病中，癌症的死亡率仅次于心血管病。抗肿瘤药物研讨要点从传统的细胞毒类药物现已转移到新式抗肿瘤药物领域中，其间以阻断特异肿瘤细胞内信号转导通路为热门，因而能以细胞信号转导通路中要害酶为靶点的高效、低毒、特异性强的新式抗癌药物成为当今抗肿药物研制的重要方向[12]。试验标明，肉豆蔻酸能够阻断花生四烯酸的通路，搅扰环氧合酶-2的后继产品血栓素A2的发生，且结尾支链脂肪酸可经过按捺髓过氧化物酶的开释，减轻自由基反响形成的安排损害[13]。以参加140 mg/ml肉豆蔻酸后培育的肿瘤和正常细胞，试验证明肉豆蔻酸能够高效地诱导癌细胞凋亡，不会引起正常人乳腺上皮细胞凋亡[14]。黄枚等[15]的试验也标明肉豆蔻酸有高效的抗癌活性而且可明显进步鼠的生命存活期。黄健等[16]为了研讨肉豆蔻酸促进肿瘤凋亡的机制，选取半胱氨酸蛋白酶宗族研讨其对各种底物的效果，试验标明肉豆蔻酸能够使癌细胞阻滞于G0/G1期，加快凋亡的进程。文献[17-18]研讨肉豆蔻酸抗小鼠肿瘤效果试验证明，肉豆蔻酸能够经过阻断小鼠宫颈癌U14肿瘤CPT-1酶通路，抗肿瘤效果强度与按捺肿瘤线粒体CPT-1酶活性呈正比，一起与传统抗癌药物比较，肉豆蔻酸表达出明显的抗肿瘤特色，其最高抑瘤率可达64.9%，且毒副效果小。
综上所述，川贝母作为川产道地药材中最具有代表性的药材，其间的脂肪酸成分，特别是含量较高的亚油酸，棕榈酸等成分具有多种生物活性。试验成果提示，川贝母中可提取出很多对人体有利的脂肪酸成分，可对川贝母资源的开发、使用和质量规范制订起必定指导效果。
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（收稿日期：2016-07-18 本文修改：顾雪菲）