生殖道b群链球菌感染：抗DNA酶B对小儿链球菌感染相关疾病的价值

点击：0时间：2018-10-11 20:11:28

蒋曼　华学明

[摘要] 意图评论抗DNA酶B对小儿链球菌感染相关疾病的价值。办法搜集本院2012年1月～2013年10月确诊为链球菌感染的患儿114例，将其分为急性风湿热组、急性咽炎和扁桃体炎组、急性肾小球肾炎组、风湿性心脏病组，一起选取健康儿童30例为对照组。用微量中和法检测抗DNA酶B，特定蛋白仪免疫散射比浊法检测抗链球菌溶血素O（ASO），并一起检测咽拭子培育、C反响蛋白（CRP）、红细胞沉降率（ESR）、血常规，别离测定各组的阳性率并进行比较。成果急性风湿热组、急性咽炎和扁桃体炎组、急性肾小球肾炎组抗DNA酶B阳性率别离为70.8%、33.3%、83.3%，高于ASO阳性率54.2%、23.3%、60.0%，差异有统计学含义（P<0.05）；两者联合检测阳性率别离为91.7%、53.3%、93.3%，均高于ASO独自检测阳性率，差异有统计学含义（P<0.05）。风湿性心脏病活动期抗DNA酶B阳性率为87.5%，显着高于非活动期抗DNA酶B阳性率21.4%，差异有统计学含义（P<0.05）。定论抗DNA酶B及ASO检测关于小儿链球菌感染病程的不一起期有不同含义，联合检测能显着进步检出阳性率，抗DNA酶B对判别链球菌感染相关疾病活动有必定含义。

[要害词] 抗DNA酶B；抗链球菌溶血素O；链球菌感染；风湿热；急性肾小球肾炎

[中图分类号] R725.04 [文献标识码] A [文章编号] 1674-4721（2014）08（b）-0118-03

[Abstract] Objective To investigate the value of anti-DNA enzyme B on related diseases in children with Streptococcus infection. Methods 114 cases of patients with Streptococcus infection in our hospital from January 2012 to October 2013 were collected，and were divided into acute rheumatic fever group，acute pharyngitis and tonsillitis group，acute glomerulonephritis group，rheumatic heart disease group，at the same time，30 cases of healthy children were selected as control group.Anti-DNA enzyme B was detected by micro-neutralization method，Anti-streptolysin O （ASO） was detected by specific protein analyzer immune nephelometry，and pharyngeal swab culture，C-reactive protein （CRP），erythrocyte sedimentation tate （ESR），blood routine were detected，at last the positive rate of each group were compared. Results Acute rheumatic fever group，acute pharyngitis and tonsillitis group，acute glomerulonephritis group of anti-DNA enzyme B positive rate was 70.8%，33.3%，83.3% respectively，higher than 54.2%，23.3%，60.0% of ASO positive rate，the difference was significant （P<0.05）；the positive rate of combined detection was 91.7%，53.3%，93.3%，higher than the positive rate of ASO detection alone，the difference was significant （P<0.05）.Active rheumatic heart disease of anti-DNA enzyme B positive detection rate was 87.5%，higher than 21.4% of unactive rheumatic heart disease，the difference was significant （P<0.05）. Conclusion The detection of anti-DNA enzyme B and ASO have different meanings for different stages of children with Streptococcus infection，joint detection of two methods can improve the positive rate，anti-DNA enzyme B has certain significance to the activities related to judge the Streptococcus infection disease.

[Key words] Anti-DNA enzyme B；Anti-streptolysin O；Streptococcus infection；Rheumatic fever；Acute glomerulonephritisendprint

20世纪20年代Lancefcild将β溶血性链球菌根据抗原结构不同分为20个组，其间A族β溶血性链球菌致病力强，也最常见，A族链球菌（GAS）又名化脓性链球菌，是儿童细菌性感染的重要病原菌之一，可发生多种外毒素和侵袭性酶，常导致上呼吸道感染、猩红热、皮肤感染，偶可引起肺炎、败血症及迁徙性病灶，链球菌感染后经过变态反响引起风湿热和链球菌感染后肾小球肾炎。GAS每年引起全球约6亿例咽喉炎，1亿例皮肤感染[1]。部分患儿感染侵袭性GAS，严重者可导致中毒性休克归纳征（TSS），且病死率高，常达20%～30%，易与葡萄球菌感染所形成的TSS相混杂，故检测GAS感染具有重要的临床含义。抗链球菌溶血素O（ASO）和抗DNA酶B是A族溶血性链球菌发生的一种胞外产品感染链球菌后发生的抗体。查看血清中的相应抗体，有利于GAS感染的确诊。我国现在检测GAS感染的血清学办法常为ASO，常选用微量特定蛋白仪散底法，该法不只灵敏度低，而且漏检率高。抗DNA酶是针对细胞外不同抗原DNA酶B发生的抗体，关于检测GAS是近年来较为推行的一种办法，常选用微量中和法。本研讨对链球菌感染患儿，经过检测ASO和抗DNA酶B，比较两者独自及联合检测阳性率的差异。

1 材料与办法

1.1 一般材料

搜集本院2012年1月～2013年10月确诊为链球菌感染的患儿114例，其间男性86例，女人58例，年纪1～14岁，将其分为4组：急性风湿热组24例，均契合Jones确诊标准[2]；急性咽炎、扁桃体炎组30例，均契合GAS咽炎、扁桃体炎确诊标准[3]；急性肾小球肾炎组30例，均契合急性肾小球肾炎确诊标准[4]；风湿性心脏病组30例，活动期16例，非活动期14例。一起选取无以上疾病的健康儿童30例为对照组。5组研讨目标的性别、年纪差异无统计学含义（P>0.05），具有可比性。

1.2 办法

ASO选用西门子特种蛋白剖析仪BNⅡ，选用免疫散射比浊法测定，按标准操作规程操作，正常值<223 U/ml。检测抗DNA酶B选用微量中和法，试剂由广东省心血管病研讨所风湿热链球菌试验室供给，首要灭活血清，然后取3个系列倍比稀释血清，参加DNA酶B抗原，温育15 min，让抗原抗体充沛反响，然后加甲基绿-DNA底物，温箱内放置24 h，视底物色彩衰退状况断定抗DNA酶B抗体的滴度。阳性值选用美国心脏病学会引荐的标准，成人≥120 U/ml，儿童≥240 U/ml，2～6岁≥60 U/ml，7～18岁≥240 U/ml，或距离2次测定有2个滴度的抗体升高。一起进行咽拭子培育、C反响蛋白（CRP）、红细胞沉降率（ESR）、血常规测定。

1.3 统计学处理

选用SPSS 16.0进行统计学剖析，计数材料选用χ2查验，以P<0.05为差异有统计学含义。

2 成果

2.1 5组抗DNA酶B与ASO检测阳性率的比较

对照组抗DNA酶B与ASO检测均为阴性，急性风湿热组，急性咽炎、扁桃体炎组，急性肾小球肾炎组，风湿性心脏病活动期组，风湿性心脏病非活动期组抗DNA酶B及联合检测阳性率均高于ASO检测阳性率，差异有统计学含义（P<0.05）（表1）。

2.2 咽拭子培育成果

急性风湿热组咽拭子培育阳性率为0，急性咽炎、扁桃体炎组咽拭子培育阳性率为3.33%（1/30），急性肾小球肾炎组咽拭子培育阳性率为26.7%（8/30），风湿性心脏病组咽拭子培育阳性率为0。

本组114例链球菌感染患儿CRP为（33.0±15.5） g/L，ESR为（18.0±7.8） mm/h，白细胞计数为（10.80±6.12）×109/L，中性粒细胞计数为（6.30±4.05）×109/L，CRP相对升高显着，经过结合其他检测目标为药敏培育等找清病原菌指明晰根本方向，对照组炎症目标根本正常。

3 评论

因为咽拭子培育阳性率极低，使咽拭子培育失掉临床辅导价值。脱氧核糖核酸B是GAS细胞外产品之一，具有较强的抗原性，大都GAS具有DNA酶B，当机体感染GAS后，发生很多的抗DNA酶B抗体，才引起抗DNA酶B的升高，而链球菌A、C、G族均可引起ASO升高，如被查看的血清标本被细菌污染、溶血、高脂蛋白、肝炎和肾病归纳征时，均可发生非特异性ASO增高，特异性不够高，故抗DNA酶B作为新的链球菌抗体测定办法，具有更好的特异性，且有较高的敏感性，还有杰出的稳定性和重复性，不受血脂、污染等要素的影响，不存在假阳性问题[5]。现在检测的抗链球菌抗体中抗DNA酶B保持阳性时刻最长。ASO和抗DNA酶B有不同的抗体动力学，在感染GAS后2周左右呈现ASO，其顶峰在第3～5周，其抗体高滴度继续时刻较短，2个月后常常现已检测不出，此刻大都已康复正常。在GAS感染后4～6周抗DNA酶B抗体反响呈现顶峰，比ASO呈现时刻要晚，其抗体高滴度继续时刻长，达3～6个月乃至以上，比ASO显着更长。因而，ASO联合抗DNA酶B检测可进步阳性率，两者有很好的互补效果。本研讨中ASO和抗DNA酶B联合检测急性风湿热组、急性咽炎和扁桃体炎组、急性肾小球肾炎组阳性率别离为91.7%、53.3%、93.3%，契合联合检测阳性率高于其独自检测阳性率这一观念。Ferrieri等[6]以为，如能选一项抗链球菌抗体测定，应首选抗DNA酶B，可是人体感染链球菌后，不行能针对某一种链球菌抗原发生100%的抗体反响，选用测定某一种单一抗体，漏诊率高，故主张一起测定两种或多种的链球菌抗体以进步阳性率。

急性链球菌感染后肾小球肾炎是儿童时期常见的肾脏疾病之一，在发展中及经济欠发达的国家发病率高，是由A族β溶血性链球菌感染引起的一种免疫复合物肾小球肾炎，首要表现为水肿、尿少、血尿、蛋白尿和高血压等肾炎归纳征临床表现[7]。急性链球菌肾炎一般是由前驱链球菌感染后起病，呼吸道感染引起者无症状间歇期为6～14 d，皮肤感染引起者为14～28 d。有研讨标明急性肾炎发病咽拭子培育出A族β溶血性链球菌的阳性率仅为30%，本研讨急性肾小球肾炎组阳性率仅为26.7%，ASO检测阳性率达50%～80%，本研讨急性肾小球肾炎组阳性率为60.0%，前期承受有用抗生素青霉素医治阳性率更低，临床轻型及亚临床型较多，简单呈现漏诊，故ASO联合抗DNA酶B检测链球菌可进步阳性检出率。endprint

确诊为风湿热有必要要有A族溶血性链球菌感染的血清学检测作为切当根据。1992年修订的风湿热确诊Jones标准，着重A族溶血性链球菌感染根据作为确诊风湿热的必要条件，并独自列为一项，不然风湿热的确诊不能成立，且引荐DNA酶B作为除ASO以外的最佳挑选[8]。因为现在风湿热患儿就诊时，大都已使用青霉素医治，有研讨标明，悉数GAS均对青霉素具有杰出的敏感性[9]，故临床表现多为轻型或不典型，链球菌感染的根据对确诊十分重要，且风湿热一般在GAS感染3周后起病，咽拭子简直培育不出链球菌[10]，其ASO顶峰期常已过，且现有研讨标明风湿热患儿ASO阳性率仅占50%左右，检测阳性率不高，给确诊形成巨大困难。但抗DNA酶B抗体高滴度继续时刻长，联合ASO检测，阳性率显着增高。别的部分儿童藏匿性风湿性心脏病就诊时病史时刻长，舞蹈病患儿一般发生在链球菌感染2～6个月后，ASO滴度已降至正常，确诊十分困难，但抗DNA酶B抗体继续时刻长，检测阳性率高，虽然链球菌感染不是上述两类疾病确诊的直接目标，但抗DNA酶B抗体能比较有用而又特异地监测人体受A族乙型溶血性链球菌感染的状况，该检测对临床上判别风湿性心脏病的病况，辅导医治都不失为一个很好的目标。链球菌初度感染后，风湿热发病率为1‰，易致复发，每次复发加剧心脏危害，故前期确诊、防备和操控A族β溶血性链球菌成为要点，避免病况发展形成心脏发生不行康复的改动。风湿性心脏病活动期组患儿抗DNA酶B检出的阳性率显着高于非活动期组患儿，提示活动期组A族溶血性链球菌感染率更高，是否提示抗DNA酶B检出的阳性率能够作为风湿性心脏病伴活动的一个目标，既往也有研讨赞同此观念。

Mulla等[11]的研讨显现儿童侵袭性GAS（IGAS）的逝世首要原因为STSS，因为其起病藏匿，病况发展快，易误诊、误治，预后较差。在曩昔的30年，儿童IGAS发病率显着增加，且感染类型也与成人显着不同[12]。因为发病率上升及较高的逝世率，需注重儿童IGAS感染。且只需经过细菌学检测，不然易与金黄色葡萄球菌所形成的的TSS区别。

在其他结缔组织疾病中，与链球菌感染也有密切联系。有文献报导，系统性红斑狼疮患者中，GAS感染发生率高于正常人，系统性红斑狼疮病况活动组血清中抗DNA酶B抗体的阳性率显着高于非活动组，提示GAS感染与系统性红斑狼疮的病况活动可能有必定关联性，GAS有可能是系统性红斑狼疮发病本质的人发病和病况活动的诱因之一。加用针对GAS医治可能对缓解病况有必定协助。兼并肾危害时需求扫除GAS感染，GAS感染与系统性红斑狼疮病况活动有必定联系[13]。血清阴性脊柱关节病患者中链球菌感染发生率高，周围关节痛在抗DNA酶B阳性和阴性患者中有显着差异，标明血清阴性脊柱关节病患者兼并GAS感染时周围关节痛发生增多，部分关节痛可能系GAS引起。是否是血清阴性脊柱关节病的发病和复发的重要原因值得深入评论。血清抗DNA酶B 测定是了解血清阴性脊柱关节病是否兼并GAS感染较好的办法，关于辨别血清阴性脊柱关节病兼并GAS感染与单纯血清阴性脊柱关节病病况活动有必定参阅价值[14]。

在盛行病学研讨中，根据ASO断定的GAS感染率，其季节性散布却无显着差异，而抗DNA酶B水平呈秋、冬、春季高，夏日低的季节性改变，与风湿热的发病率的季节性散布规则一起；DNA酶B水平高的区域，其风湿热/风湿性心脏病发病率高，可作为该区域风湿热/风湿性心脏病盛行水平的开始估测和进一步研讨的参阅[15]。

因为链球菌感染所形成的疾病临床表现多样，触及科室很多，若病因不明，简单形成误诊漏诊，若医治不标准或不及时，常使病况延迟或间断性重复发生，所以进步链球菌感染的检出率，下降误诊误治率很重要。链球菌细胞壁外层的M蛋白是具有很强免疫原性的GAS外表蛋白，但因为其血清型很多及与人体心瓣膜、肾脏的基底膜等具有一起抗原而在制备GAS疫苗及医治性抗体方面受限[16]。现在尚无安全有用的疫苗使用于临床，有用足量抗菌药物的使用是医治IGAS感染的要害，而关于皮肤软组织感染联合外科手术是重要的医治手法[17]。故确诊链球菌是重要的根据。因为ASO与抗DNA酶B的抗体动力学不同，关于急性链球菌感染及疾病前期，3～5周内，ASO处于高滴度，阳性率高，此刻首选ASO进行检测。而DNA酶B抗体高滴度继续时刻长，关于慢性感染及感染后引起的本身免疫性疾病，应首选抗DNA酶B作为检测办法。关于轻型或不典型患儿，主张ASO和抗DNA酶B两种办法联合检测，只需单一检测阳性即可确诊链球菌感染，进步了链球菌感染的确诊阳性率。本研讨证明ASO和抗DNA酶B两者联合检测在链球菌感染患儿中的阳性率超越任何单一抗体检测的阳性率，提示ASO和抗DNA酶B联合检测可进步小儿链球菌感染的检出阳性率[18-19]，两者有重要的互补效果[20]，而且具有平行、独立的确诊效果[15]。研讨标明抗DNA酶B抗体关于风湿性心脏病及系统性红斑狼疮活动、血清阴性脊柱关节病患儿判别疾病活动有必定含义，值得进一步研讨和评论，并可作为该区域风湿热/风湿性心脏病盛行水平的开始估测和进一步研讨的参阅。

综上所述，抗DNA酶B对链球菌感染相关性疾病有重要的含义，值得推行。

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（收稿日期：2014-06-17 本文修改：郭静娟）endprint