p53骤变 肾脏肿瘤中骤变型p53和CD44v6基因产品的表达剖析
耿娟娟
[摘要] 意图 评论肾脏肿瘤临床特征与骤变型p53以及CD44v6基因表达产品的联系。 办法 挑选79例肾脏肿瘤患者的临床材料进行回忆性剖析，一切患者均手术医治，测定肿瘤安排骤变型p53及CD44v6基因表达产品，并随访患者5年的生存率，剖析骤变型p53及CD44v6基因表达产品与患者临床特征、生存率的联系。 成果 良性肿瘤与恶性肿瘤P53蛋白、CD44v6蛋白的阳性率比较，差异有计算学含义（P<0.05），阴性及阳性表达患者5年生存率比较存在明显差异（P<0.05）。CD44v6蛋白在Ⅲ～Ⅳ期以及G3级的阳性表达率明显升高（P<0.01）。 定论 肾脏肿瘤中骤变型p53和CD44v6基因产品的表达与患者的5年生存率具有相关性，而CD44v6蛋白与病理分期以及病理分级具有相关性。
[关键词] 肾脏肿瘤；骤变型；p53；CD44v6；基因产品
Analysis of mutant p53 and CD44v6 gene products expression in kidney cancer
GENG Juanjuan
Special Wards， Southern Medical University Affiliated People's Hospital of Zhengzhou， Zhengzhou 450000， China
[Abstract] Objective To discuss mutant p53 and CD44v6 gene products expression in kidney cancer. Methods Clinical data of 79 cases of kidney cancer patients were selected for retrospectively analysis. All cases were treated by operation. Mutant p53 and CD44v6 gene product expression were detected and 5-year survival rates of patients were followed up. Results The positive rates of P53 protein and CD44v6 protein in benign and malignant tumors showed significant difference （P<0.05）， and 5-year survival rates of negative and positive expression groups showed significant difference （P<0.05）. The positive rate of CD44v6 protein in Ⅲ to Ⅳ and G3 were significantly higher （P<0.01）. Conclusion Mutant p53 and CD44v6 gene products expressions in kidney tumors are relevant with the 5-year survival rates. The CD44v6 protein expressions is correlated with pathological stage and histological grade.
[Key words] Kidney cancer； Mutant； p53； CD44v6； Gene product
肾细胞癌在泌尿生殖系恶性肿瘤中居第二位，仅次于膀胱癌，归于实性恶性肿瘤。是否发作搬运以及肿瘤细胞的分解程度与患者的预后具有亲近的联系，而肿瘤细胞某些基因的骤变与肿瘤细胞的发作、开展、侵袭以及搬运亲近相关[1]。p53基因归于抑癌基因，而CD44v6在多种癌症细胞中呈高表达[2，3]。本研讨通过对79例肾细胞癌患者癌细胞中骤变型p53基因及CD44v6表达产品的检测，剖析其与肾细胞癌临床特征及患者生存率的联系。现将成果报导如下。
1 材料与办法
1.1 一般材料
回忆性剖析2000年1月～2005年12月在我院手术医治肾脏肿瘤患者79例的临床材料，一切患者病理确诊支撑肾脏肿瘤确诊，均经手术医治，留有白腊包埋的癌安排标本，且随访5年以上，有完好的随访材料。其间男61例，女18例，年纪30～67岁，均匀（52.1±10.5）岁。其间肾细胞癌72例，错构瘤7例。其间72例肾细胞癌患者的病理分型：45例为通明细胞癌，15例为乳头状细胞癌，7例为嫌色细胞癌，5例调集管癌；Robson分期：7例为Ⅰ期，45例为Ⅱ期，20例为Ⅲ～Ⅳ期；WHO病理分级：G1级11例，G2级26例，G3级35例。
1.2检测目标
检测癌细胞中骤变型p53以及CD44v6基因产品的表达，选用免疫组化SP法进行检测。一抗鼠抗人P53单克隆抗体、鼠抗人CD44v6单克隆抗体。癌旁正常安排为阴性对照，PBS替代一抗为空白对照。骤变型P53蛋白阳性表达细胞：细胞核呈棕黄色，或许核内有棕黄色颗粒；CD44v6蛋白阳性表达细胞：细胞膜呈棕黄色。
1.3研讨办法
回忆性剖析患者的临床材料，计算患者分级、分期、5年生存率等状况。剖析p53以及CD44v6基因产品的表达与患者分级、分期以及5年生存率的联系。
1.4计算学处理
选用SPSS 12.0计算学软件对数据进行剖析，计数材料选用卡方查验，P<0.05为差异有计算学含义。
2成果
2.1骤变型p53基因表达产品P53蛋白与患者肿瘤分期、分级以及5年生存率的联系
P53蛋白阳性表达：肾错构瘤无阳性表达，肾细胞癌患者72例中29例为阳性，占40.3%，肾良性肿瘤与恶性肿瘤P53蛋白的阳性率比较，差异明显（P<0.05）。不同分期的阳性表达：Ⅰ期2例（28.6%，2/7），Ⅱ期17例（37.8%，17/45），Ⅲ～Ⅳ期10例（50.0%，10/20）。不同病理分级阳性表达：G1级 4例（36.4%，4/11），G2 级8例（30.8%，8/26），G3级17例（48.6%，17/35）。72例肾癌患者中，P53蛋白阳性表达患者29例，5年生存率为31.03%（9/29），阴性表达患者43例，5年生存率为67.44%（29/43）。阴性及阳性表达患者5年生存率比较存在明显差异（P<0.05）。见表1、图1。
表1 P53蛋白阳性表达与肿瘤分期、分级以及5年生存率的联系
图1 骤变型P53蛋白阳性表达细胞，细胞核呈棕黄色，或许核内有棕黄色颗粒（×400）
2.2 CD44v6蛋白表达与分期、分级及5年生存率的联系
CD44v6蛋白阳性表达：肾错构瘤无阳性表达，肾恶性肿瘤患者72例中28例为阳性，占38.9%，肾良性肿瘤与恶性肿瘤CD44v6蛋白的阳性率比较，差异明显（P<0.05）。不同分期的阳性表达：Ⅰ期1例（14.3%，1/7），Ⅱ期12例（26.7%，12/45），Ⅲ～Ⅳ期15例（75.0%，15/20）。不同病理分级阳性表达：G1级 1例（9.1%，1/11），G2 级7例（26.9%，7/26），G3级20例（48.6%，17/35）。72例肾癌患者中，CD44v6蛋白阳性表达患者28例，5年生存率为25.00%（7/28），阴性表达患者44例，5年生存率为70.45%（31/44）。阴性及阳性表达患者5年生存率比较存在明显差异（P<0.05）。见表2、图2。
表2 CD44v6蛋白表达与分期、分级以及5年生存率的联系
图2 CD44v6蛋白阳性表达细胞，细胞膜呈棕黄色（×400）
3评论
恶性肿瘤的发作与基因骤变具有亲近的联系，主要是抑癌基因发作失活或癌基因被激活。抑癌基因对细胞增殖、分解具有重要的调控效果。p53基因是人体的抑癌基因，其编码分子量为53kDa的蛋白质，因而被命名为p53基因。p53失活对肿瘤的发作和开展具有重要的效果。p53作为抗癌基因，其导致癌细胞自杀，然后避免癌变的发作，一起还协助细胞基因修正缺点[4]。可是这种功用也会协助遭到化疗药物损害的癌细胞发挥修正效果，使被修正的癌细胞构成新肿瘤。50%的恶性肿瘤存在p53基因骤变。p53基因编码的蛋白质是转录因子，操控细胞周期发动，发送许多关于细胞健康的信号，决议是否开端细胞割裂。当细胞受损后，又不能得以修正，则P53蛋白参加发动，促进细胞凋亡。p53基因骤变的细胞失掉这种操控，乃至会在晦气的条件下发作持续割裂。在正常状况下p53基因可推迟或监督细胞割裂，可判别DNA变异的程度，对变异较小者可促进细胞自我修正，对变异较大者，可诱导细胞发作凋亡。p53基因发作骤变后，其空间构象改动，失掉调控细胞成长、凋亡以及修正DNA的效果，骤变后的p53基因改动为了癌基因[5，6]。在本次研讨中，通过对骤变后p53基因表达的P53蛋白进行检测，判别肾脏肿瘤安排中p53基因的骤变状况，成果显现，恶性肿瘤P53阳性表达率明显高于良性肿瘤，这提示p53基因的骤变参加了肾脏恶性肿瘤的发作和开展进程。在对5年生存率的随访中，P53蛋白阳性表达的患者其5年生存率明显低于阴性表达的患者，提示p53基因骤变与患者5年生存率具有相关性。
CD44是广泛散布在细胞外表的一种跨膜糖蛋白，归于细胞黏附分子，基因在11号染色体的短臂上，依据外显子挑选性剪接成果分为标准型CD44（CD44S）和变异型（CD44v）。1991年在大鼠搬运性胰腺癌细胞中发现了一种CD44的变异体，其在大鼠CD44S蛋白第223～247位氨基酸残基间插入了含162个氨基酸的片段，该片段中含有4个O-糖基化位点以及3个N-糖基化位点，后来证明该片段含v6外显子编码。CD44具有介导细胞间的黏附效果，其作为淋巴细胞的“归巢”受体参加了淋巴细胞归位到淋巴安排的进程，其还具有活化T细胞的效果，并参加细胞内信号传递进程，调理淋巴细胞的再循环，介导淋巴细胞与内皮细胞黏附，参加免疫调理及肿瘤细胞的成长、增殖、搬运[7]。在恶性肿瘤中，CD44v6的表达状况并不共同，关于阳性表达的肿瘤安排，更简单发作滋润和搬运，而且阳性表达的患者5年生存率较低，预后较差。在正常安排中，CD44v6不表达或呈低表达，该基因处于失活或许休眠的状况，可是在恶性肿瘤中，其由标准型通过一系列的润饰，然后发挥改动肿瘤细胞粘附的效果，添加其黏附才能而促进肿瘤细胞部分侵袭滋润[8]。CD44v6蛋白是通明质酸酶的跨膜糖蛋白受体，可以衔接基质中的多种相关蛋白，使其结合通明质酸，构成癌细胞的伪足，使肿瘤细胞形状发作改动，为癌细胞的游走、迁徙提供条件，促进肿瘤细胞的滋润以及搬运。CD44v6是淋巴细胞的归巢受体，可以激活淋巴细胞，促进淋巴细胞发育，导致细胞极性发作改动，加强恶性肿瘤的生物活性，具有淋巴细胞类似的活动性，使其更简单进入淋巴体系而发作远处搬运。别的，血管中的配体也可结合发作了改动的癌细胞，促进搬运的肿瘤细胞在此处寄宿成长。在本次研讨中，CD44v6蛋白在肾脏恶性肿瘤中的阳性表达率显高于良性肿瘤安排，进一步剖析显现，肿瘤病例分期及分级越高，CD44v6蛋白的阳性表达率也越高，这也证明了以上定论，CD44v6蛋白参加了肿瘤细胞的部分滋润、远处搬运。对患者5年生存率进行随访，成果显现CD44v6蛋白阳性表达的患者其5年生存率明显较低。这可能是因为CD44v6蛋白促进了肿瘤细胞的远处搬运，患者病例分级和分期均较高，预后也往往较差。
综上所述，骤变型p53和CD44v6基因产品在恶性肾脏肿瘤安排中呈高表达，而且与患者5年生存率具有相关性，而CD44v6基因蛋白与恶性肿瘤的病理分级和病理分期均具有相关性，分期和分级越高，其阳性表达率也越高。
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