降钙素原检测办法 两种不同原理检测办法测定血清降钙素原的成果比对评价
邓海云 肖鸽飞 李桦 廖燕洁 梁燕霞
【摘要】 意图 以VIDAS Brahms双抗体免疫荧光法检测降钙素原（PCT）成果作为参照， 对Wondfo干式荧光免疫层析法测定PCT成果进行点评。办法 搜集72例患者的血清标本， 以双盲办法对上述标本别离选用VIDAS和Wondfo仪器进行PCT定量检测， 再经过计算学剖析点评两种办法测定PCT的一致性。成果 两种设备检测的PCT成果高度相关（r=0.987， P<0.01）；回归方程：Y=1.069X-0.021， F查验显现回归方程差异有计算学含义（P<0.05）；对回归方程的两个系数进行t查验显现， 截距（b）则反之差异无计算学含义（P=0.768>0.05）， 而斜率（a）比较差异有计算学含义（P<0.05）。PCT在定值0.23 ng/ml和0.50 ng/ml时的体系差错（SE%）别离为6.90%和2.70%。定论 两种办法检测PCT成果具有高度的相关性， 但二者存在必定的份额差错， Wondfo干式荧光免疫层析法检测PCT能够用于临床病况及效果监控。
【关键词】 降钙素原；体系差错；相关性
DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2017.23.015
Comparison and evaluation of the results of two different methods for the determination of serum procalcitonin DENG Hai-yun， XIAO Ge-fei， LI Ye， et al. Department of Clinical Laboratory， Zhuhai City Maternal and Child Health Care Hospital， Zhuhai 519001， China
【Abstract】 Objective To evaluate procalcitonin （PCT） results determined by Wondfo dry fluorescent immunochromatography， with PCT results determined by VIDAS Brahms double antibody immunofluorescence method as a reference. Methods Serum specimens were collected from 72 patients and their PCT was quantitatively detected by VIDAS and Wondfo devices in a double-blind manner. Statistical analysis was used to assess the consistency of the two methods for the determination of PCT. Results The PCT results of the two devices were highly correlated （r=0.987， P<0.01）； regression equation： Y=1.069X-0.021， F test showed that there was statistically significant difference in regression equation （P<0.05）. The t test of the two coefficients of the regression equation showed that there was no statistically significant difference in the intercept （b） （P=0.768>0.05）， while there was statistically significant difference in slope （a） （P=0.000<0.05）. The systematic errors （SE%） of PCT at 0.23 ng/ml and 0.50 ng/ml were respectively 6.90% and 2.70%. Conclusion The PCT results of the two devices are highly correlated， but there is a certain proportion of systematic errors. Wondfo dry fluorescent immunochromatography for determination of PCT can be used for clinical disease and efficacy monitoring.
【Key words】 Procalcitonin； Systematic errors； Correlation
降鈣素原（procalcitonin， PCT）是降钙素（calcitonin， CT）的激素原， 为甲状腺C细胞排泄所发作。正常生理状况下， 血清PCT水平低到简直检测不到（<0.1 ng/ml）。而在细菌感染特别是在脓毒症、休克等全身炎症反响综合征的状况时， 血清PCT水平会明显升高。作为细菌性感染非特异的炎症灵敏目标， PCT在临床上得到了广泛运用[1， 2]。现在， 检测PCT的国产设备及试剂很多出现， 良莠不齐， 检测成果的溯源性有待完善， 其正确度能否满意临床的要求成为人们重视的焦点。本文以VIDAS Brahms PCT检测成果作为参照， 点评国产万孚（Wondfo）PCT检测办法的相关性及偏倚， 然后判别Wondfo PCT检测成果运用于临床的适宜性。
1 材料与办法
1. 1 一般材料 选取72例2015年6月～2016年6月就诊于珠海市妇幼保健院的患者， 别离患新生儿肺炎、化脓性扁桃体炎、急性支气管肺炎、感染性腹泻、脓毒血症等炎性疾病。搜集患者的高、中、低值的新鲜血清标本72例。
1. 2 仪器与试剂 万孚飞测全自动干式荧光免疫剖析仪FS-301及其配套的特定干式试剂（批号21010907）；法国梅里埃VIDAS免疫荧光剖析仪及其配套Brahms PCT试剂（批号1004914100）。
1. 3 测定办法 PCT检测试验开端前， 查验人员应该了解比对试验计划， 承受厂家工程师训练， 娴熟操作仪器并能进行保养和毛病扫除。在内部质量操控（IQC）或外部质量操控（EQC）均在控的状况下， 严厉依照规范操作程序（SOP）文件操作， 选用双盲办法别离选用VIDAS Brahms双抗体免疫荧光法和Wondfo干式荧光免疫层析法进行PCT定量检测。首要办法为：选用干式荧光免疫层析的办法（A组）， 待测物与荧光符号抗体构成免疫复合物， 经过层析， 别离固定在检测区和质控区。LED蓝光激起荧光免疫复合物上的荧光物质发光， 光波被信号搜集并转化为电信号， 经过电信号的强弱核算出待测样品中PCT的浓度。运用双抗体夹心荧光免疫法（B组），
构成固相抗PCT抗体-PCT抗原-PCT荧光抗体结合物， 所测得的荧光与标本中PCT抗原的浓度呈正比。核算相关系数r≥0.975为线性相关杰出；核算斜率， 截距， 树立直线回归方程， 对两种办法的体系差错进行t查验， 判别体系的可承受性[3]。依据临床运用要求， 将给定的医学决议水平浓度Xc（0.5 ng/ml[4]）代入回归方程， 核算参阅办法（Y）与比照办法（X）之间的SE%。SE=|Yc - Xc|， SE%=（SE/Xc）×100%。参照厂家试剂运用阐明书， SE%小于T±20%作为临床可承受规范。
1. 4 计算学办法 选用SPSS18.0计算学软件对数据进行计算剖析。计量材料以均数±规范差（ x-±s）标明， 选用t查验。相关性剖析选用Pearson相关性剖析和直线回归剖析。P<0.05标明差异具有计算学含义。
2 成果
2. 1 測定成果中最高值为25.51 ng/ml， 最低值为<0.05 ng/ml。
A组和B组进行配对t查验， 差异无计算学含义（P=0.342>0.05）。
2. 2 离群点的查看以（B组检测值-A组检测值）为Y轴， B组检测值为X轴做偏倚图。见图1。 或许存在离群点， 以相对偏倚差均值的4倍（0.472）为可承受限， 故在B组检测值为0.05 ng/ml， A组检测值为0.14 ng/ml为离群点（相对偏倚差为0.474>0.472）， 从数据组中除掉此数值。
图1 两种办法成果差值与参比办法均值的偏倚图
2. 3 相关性剖析以B组检测值为X轴， A组检测值为Y轴做散点图。见图2。经Pearson相关性剖析， A、B两组数据呈明显性正相关（r=0.987， P<0.01）；经回归剖析可得：Y=1.069X-0.021（F=2661.186， P<0.05）；对回归方程的两个系数进行t查验， t（b）=-0.296， t（a）=51.587， P（b）=0.768>0.05， P（a）=0.000<0.05。
图2 两种办法比较的散点图
2. 4 临床可承受功能点评取两个点0.23 ng/ml（<0.5 ng/ml）、
0.5 ng/ml别离代入线性回归方程， 终究核算出SE%=6.90%、2.70%， 均<20%。
3 评论
临床上细菌感染性疾病极为常见， 而病原学确诊耗时长， 在微生物血培育成果出来前临床上已盲目地运用抗菌药物， 造成了抗菌药物的乱用， 也加剧了患者经济担负。赶快找到便利、有用的试验办法对细菌感染性疾病进行确诊及辨别确诊， 并精确点评细菌感染性疾病的发作、开展， 有着非常重要的临床运用价值[5]， 特别关于妇幼特殊人群。
本文选用SPSS18.0计算软件Pearson相关性查验显现：VIDAS Brahms双抗体免疫荧光法和Wondfo 干式荧光免疫层析法检测PCT成果具有的高度相关性（r=0.987， P<0.01）， 阐明试验数据散布合理、随机差错能够承受。从散点图和偏倚图中除掉离群值后， 两种办法检测的PCT成果表现出较好的线性， 回归方程为：Y=1.069X-0.021。但回归系数的t查验标明：截距比较差异无计算学含义（P>0.05）， 而斜率比较差异有计算学含义（P<0.05）， 阐明两种办法间存在必定的份额差错， 因而要设法找出差错的改变规则， 用批改公式或批改曲线对丈量成果进行批改， 以用于临床病况及效果监控。
据调查， 现在国内三级甲等以上医院的临床试验室现已遍及了自动化仪器， 其间进口设备以及试剂所占份额超越 95%， 基本上处于独占位置， 国产全自动免疫体系处于开展期[6]。
现在临床上PCT的试剂大多为进口仪器及其配套试剂盒， 试剂和耗材价格贵重， 仪器保护本钱高， 依赖性过强， 增加了患者的经济和精神上的担负。但是， 有陈述指出， 检测设备办法为免疫层析法， 免疫层析胶体金技能无法直接完成定量和半定量， 而是经过反响上色的比较直接定量有其缺乏[7]。
但无可厚非的是， 与VIDAS Brahms双抗体免疫荧光法比较， 荧光免疫层析法检测PCT无需贵重的设备且操作简略、快速和价廉 [8]。Wondfo PCT检测体系归于及时检测（POCT）体系， 具有便利放置、标本用量少、检测便利等长处， 在必定程度上确保了急诊患者的快速定量检测， 提高了服务质量和降低了医疗费用[9]。因而， 在POCT免疫层析法测定PCT在投入检测前有必要依照EP15-A2进行精密度验证试验， 断定其经过精密度验证后再依据EP9进行后续体系性的办法比对试验， 并进行相关调整[10]， 以满意临床需求。
总归， 两种办法检测PCT成果具有高度的相关性， 但二者存在必定的份额差错。Wondfo干式荧光免疫层析法检测PCT能够用于临床病况及效果监控。
参阅文献
[1] Wang MM， Cui SN， Gong YX. Comparison on Serum Levels of Procalcitonin of Children with Viral and Bacterial Infection. Infection International， 2013（3）：123-126.
[2] Karagoz E， Tanoglu A. Clinical importance of serum procalcitonin in ulcerative colitis patients. World Journal of Gastroenterology， 2014， 20（42）：15941-15942.
[3] 楊有业， 张秀明， 余元龙， 等.临床查验办法学点评.北京：公民卫生出版社， 2008：118.
[4] Que TL. Procalcitonin for the clinical laboratory： a review. Pathology， 2007， 39（4）：383.
[5] 卯建， 赵滢， 苏艳丹， 等. PCT定量检测在细菌感染中的临床运用. 世界查验医学杂志， 2014， 35（1）：37-38.
[6] 李耀华.国内外免疫自动化开展趋势现状与剖析.医药论坛杂志， 2011， 32（14）：197-200.
[7] 吴立翔.胶体金免疫层析技能在临雜病确诊中晒究发展.重庆医学， 2013， 1（42）：91-93.
[8] 郭莉娜， 杨启文， 伊洁， 等. 荧光免疫层析法降钙素原检测试剂盒临床功能点评. 协和医学杂志， 2016， 7（3）：208-211.
[9] 耿伏生. 国产荧光免疫剖析仪检测降钙素原在急诊科的运用. 医药论坛杂志， 2014， 35（8）：158-159.
[10] 蔺亚晖， 程军， 于金星， 等. 两种检测办法测定降钙素原的精密度验证及比对研讨. 符号免疫剖析与临床， 2016， 23（7）：829- 833.
[收稿日期：2017-04-17]