H型高血压：H型高血压患者代谢性相关目标及MTHFR基因多态性剖析

刘玲玲+唐智+肖林

[摘要]意图 剖析MTHFR基因在高血压患者中的多态性，评论H型高血压与同型半胱氨酸（Hcy）等代谢性生化目标的联系。办法 选取2013年7月～2016年6月我院收治的100例H型高血压患者和100例一般高血压患者为研讨目标，检测两组的血浆同型半胱氨酸（Hcy）和血脂、血糖等生化目标，比较MTHFR基因多态性。成果 H型高血压组的Hcy、尿酸（UA）、肌酐（Cr）水平显着高于一般高血压组（t=14.989、6.672、4.832，P<0.05）；H型高血壓组的MTHFR 677C/T 基因型频率散布以T等位基由于主，一般高血压组以C等位基因频率散布为主（P<0.05）。定论 高Hcy、UA、Cr水平与H型高血压的发作亲近相关，MTHFR基因677C/T纯合骤变TT基因型可能是H型高血压的重要遗传要素。

[关键词]H型高血压；MTHFR；基因多态性；同型半胱氨酸

[中图分类号] R544.1 [文献标识码] A [文章编号] 1674-4721（2017）08（c）-0098-04

[Abstract]Objective To analyze the polymorphism of MTHFR gene in patients with hypertension，and to explore the relationship between H-type hypertension and metabolic biochemical indexes such as homocysteine （Hcy）.Methods 100 patients with H-type hypertension and 100 patients with general hypertension treated in our hospital from July 2013 to June 2016 were selected as study subjects.Plasma homocysteine （Hcy） and blood lipids，blood glucose and other biochemical indicators were detected in two groups，and the polymorphism of MTHFR gene was compared.Results Hcy，uric acid （UA），creatinine （Cr） level in the H-type hypertension group were significantly higher than those in the general hypertension group （t=14.989，6.672，4.832，P<0.05）.The frequency distribution of MTHFR 677C/T genotype frequency of the H-type hypertension group was mainly T allele，and the frequency distribution of C allele was dominant in the general hypertension group （P<0.05）.Conclusion The level of Hcy，UA and Cr are closely related to the occurrence of H-type hypertension.Homozygous mutant TT genotype of MTHFR gene 677C/T may be an important genetic factor of H-type hypertension.

[Key words]H-type hypertension；MTHFR；Gene polymorphism；Homocysteine

高血压是影响心脑血管疾病的病理根底，血浆同型半胱氨酸（homocysteine， Hcy）水平>10 μmol/L的原发性高血压即为H型高血压（H-type hypertension）[1]。H型高血压患者Hcy水平较一般高血压患者显着升高，而Hcy是动脉粥样硬化性心血管疾病强有力的猜测因子[2]，且与脑卒中发作存在亲近的联系[3]。亚甲基四氢叶酸还原酶（MTHFR）可使同型半胱氨酸转化为甲硫氨酸，参加甲基化反响。本文要点评论H型高血压患者代谢性相关目标及剖析MTHFR基因多态性，以期为H型高血压的医治及相关并发症的防备供给参阅。

1 材料与办法

1.1 一般材料

选取2013年7月～2016年6月经本院确诊的100例H型高血压患者和100例一般高血压患者为研讨目标。当选规范：当选的病例组患者严厉依照高血压病JNCⅦ确诊规范。H型高血压组患者：男68例，女32例，年纪40～72岁，均匀（59.31±10.52）岁；一般型高血压组患者男64例，女36例，年纪43～75岁，均匀（61.24±10.78）岁。本研讨经医院道德委员会同意。扫除规范：①兼并急慢性肾功能不全、心功能不全、妊娠或正口服避孕药或其他可能影响血压药物患者；②近1个月内服用维生素B6、叶酸、维生素B12等影响血浆Hcy水平的药物患者；③继发性高血压或许血压难以操控合格者。两组患者的性别、年纪比较差异无统计学含义（P>0.05），具有可比性。

1.2 办法

1.2.1 Hcy的检测 收集患者空腹静脉血3 ml，3000 r/min离心10 min（离心半径3 cm）后置于-80℃冰箱待检。Hcy检测选用循环酶法，试剂盒由台湾台塑生医科技股份有限公司供给，操作依照试剂盒阐明进行。

1.2.2生化目标检测 收集一切患者空腹静脉血4 ml，高速离心后取血清，检测三酰甘油（TG）、总胆固醇（CHO）、低密度脂蛋白（LDL）、血糖（GLU）、尿酸（UA）及肌酐（Cr）含量。本研讨选用奥林巴斯AU2700全自动生化剖析仪及原装配套试剂盒，检测办法：酶学比色法。endprint

1.2.3 MTHFR 基因多态性剖析 MTHFR基因多态性检测选用聚合酶链反响-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）法，提取样本基因DNA，选用PCR-RFLP法扩增MTHFR 677C/T基因片段，扩增片段及产品经限制性内切酶进行酶切后，运用2%琼脂糖凝胶电泳分离，紫外线凝胶成像仪判别基因型，调查不同类型高血压患者MTHFR基因多态性及677C/T基因片段散布。

1.3 统计学办法

数据选用SPSS 20.0软件进行统计学剖析，Hcy等生化目标用均数±规范差（x±s）标明，选用t查验；MTHFR基因型频率选用χ2查验，以P<0.05为差异有统计学含义。

2 成果

2.1两组患者不同生化目标的比较

H型高血压组的Hcy、UA、Cr水平显着高于一般高血压组（P<0.05）；两组患者的TG、CHO、LDL、GLU水平比较差异无统计学含义（P>0.05）（表1）。

2.2 Hardy-Weinberg平衡查验

运用 Hardy-weinberg 遗传平衡查验软件对两组人群3个位点的基因型散布进行平衡查验，成果显现一般高血压组契合 Hardy-weinberg 遗传平衡。样本代表性杰出（表2）。

2.3 酶切反响成果

MTHFR C677T位点基因型 CC呈现282 bp条带；CT为282、176、106 bp三个条带；TT为176、106 bp 两个条带（图1）。

2.4 测序成果

依据测序图的单峰、双峰来判别基因型，单峰为纯合基因型，双峰为杂合基因型。C677C和T677T均为单峰，C677T为双峰（图2）。

2.5两组患者MTHFR基因型频率及等位基因频率散布的比较

H型高血压组MTHFR 677C/T 基因型频率散布以T等位基由于主，一般高血压组以C等位基因频率散布为主，两组比较差异有统计学含义（P<0.05）（表3）。

3 评论

H型高血压是伴同型半胱氨酸升高的高血压，它包含高血压、高Hcy两种风险要素。已有研讨证明，Hcy作为蛋氨酸代谢的中心产品，是动脉粥样硬化性心血管疾病强有力的猜测因子[4]，1969年，哈佛病理学家Mcully教授初次提出Hcy可导致血管动脉粥样硬化。2004年，Stroke杂志上对Hcy血管损害机制给予全面论述：经过氧化应激反响，损害内皮细胞；经过炎症因子损坏机体凝血和纤溶平衡，使机体处于血栓前状况经过信号转导通路，诱导血管平滑肌细胞的增殖等，從而加快血管内动脉粥样硬化的进程。由于Hcy在动脉粥样硬化的发动与发展中的显着地位，西方科学界把它称为“21世纪新的胆固醇”。已经有研讨证明，血浆Hcy每升高5 μmol/L，脑卒中风险增高59%，因而，血浆Hcy水平对猜测动脉粥样硬化性心血管疾病、脑卒中有重要含义[2-3]。关于心脑血管疾病的发作与Hcy的联系，总结可能的发病机制如下[5]：①Hcy对心脏、脑部血管内皮细胞具有必定的毒性作用，以及Hcy可导致血液中血小板的黏附性添加；②已有研讨证明[6]，Hcy及其衍生物能使血小板集合和凝血因子Ⅴ的活性受到影响，主要是Hcy及其衍生物会添加血小板凝血恶烷的发作；③Hcy可能影响血栓调理素的表达和蛋白C的活性，而表现为一种血栓剂。总归，很多的研讨标明，高Hcy血症是心脑血管疾病发作的重要的独立的风险要素之一。由我国科学家自主研制的Ⅰ类新药依那普利叶酸片已证明具有杰出的操控H型高血压的作用，并对亚甲基四氢叶酸还原酶（MTHFR）C677T TT基因型患者降压降Hcy作用更佳[7]；在以往的研讨中，高血压的发作和血脂、血糖等代谢反常亲近相关[8-11]。H型高血压是血浆Hcy水平>10 μmol/L的原发性高血压。本研讨中，H型高血压组，中Hcy、UA、Cr水平显着高于一般高血压组，两组患者的TG、CHO、LDL、GLU水平比较差异无统计学含义，提示高血脂、高血糖是导致高血压发病的重要要素，而Hcy、UA、Cr与H型高血压的发作亲近相关。

本研讨中，H型高血压组MTHFR 677C/T基因型频率散布以T等位基由于主，一般高血压组以C等位基因频率散布为主。MTHFR 基因定坐落染色体1q36.3，第C677T位点骤变是现在已知的人类最常见且最重要的，其会影响酶的热敏理性，下降酶活性。血清MTHFR中C677T的骤变可导致血浆中Hcy和亚甲基四氢叶酸浓度上升，下降甲基化水平[12-15]。

本研讨成果标明，高Hcy、UA、Cr水平与H型高血压的发作亲近相关，MTHFR基因677C/T纯合骤变TT基因型可能是H型高血压的重要遗传要素，因而，临床对H型高血压患者需一起给予降血压和降血浆Hcy的药物医治，可防备脑卒中的发作，改进患者预后。

[参阅文献]

[1]我国高血压防治攻略修订委员会.我国高血压防治攻略2010年修订版[J].中华心血管病杂志，2011，39（7）：579-616.

[2]Mc Cully KS.Homocysteine and vascular disease[J].Nature Med，1996，2（4）：386-389.

[3]BrandI R，Probst R，Muller B，et al.Evaluation of lysatehomocysteine in patients with symptomatic arterial disease and unhealthy volunteers[J].Clin Chem，1999，45（5）：699-702.

[4]Wald DS，Morris JK，Wald NJ.Reconciling the evidence on serum homocysteine and ischaemic heart disease[J].PLoS One，2011，6（2）：e16473endprint

[5]Selhub J，D′Angelo A.Relationship between homocysteine and thrombotic disease[J].Am J Med Sci，1998，316（2）：129-141.

[6]Rodgers GM，Conn MT.Homocysteine，an atherogenic stimulus， reduces protein C activation by arterial and venous endothelial cells[J].Blood，1990，75（4）：895-901.

[7]Qin X，Li J，Cui Y，et al.MTHFR C677T and MTR A2756G polymorphisms and the homocysteine lowering efficacy of different doses of folic acid in hypertensive Chinese adults[J]. Nutr J，2012，11：2.

[8]Pool PE.The case for metabolic hypertension：is it time to restructure the hypertension paradigm？[J].Prog Cardiovasc Dis，1993，36（1）：1-38.

[9]Israili ZH，Lyoussi B，Hernández-Hernández R，et al.Metabolic syndrome：treatment of hypertensive patients[J].Am J Ther，2007，14（4）：386-402.

[10]Wilding J，Finer N.Obesity and risk of myocardial infarction：the INTERHEART study[J].Lancet，2006，367 （9516）：1053.

[11]Mancia G，De Backer G，Dominiczak A，et al.2007 Guidelines for the management of arterial hypertension：the task force for the management of arterial hypertensionof the European Society of Hypertension （ESH） and of the European Society of Cardiology （ESC）[J].Eur Heart J，2007，28（12）：1462-1536.

[12]Welch GN，Loscalzo J.Homocysteine and atherothrombosis[J].N Engl J Med，1998，338（15）：1042-1050.

[13]Kelly PJ，Rosand J，Kistler JP，et al.Homocysteine，MTHFR 677C→T polymorphism，and risk of ischermic stroke：results of a meta-analysis[J].Neurology，2002，59（4）：529-536.

[14]Den Heijer M，Letwington S，Clarke R.Homoeysteine，MTHFR and risk of venous thrombosis：a meta-analysis of published ep idemiological studies[J].J Thromb Haemost，2005，3（2）：292-299.

[15]Faraci FM，Lentz SR.Hyperhomocysteinemia，oxidative stress，and cerebral vascular dysfunction[J].Stroke，2004，35：345-347.

（收稿日期：2017-05-12 本文編辑：许俊琴）endprint